Odczynniki do dysocjacji komórek
W celu odtworzenia ich natywnych środowisk, fenotypy komórek adherentnych (takich jak komórki nabłonkowe) są zazwyczaj wysiewane na powierzchnie poddane hodowli tkankowej, do których przyczepiają się w celu przetrwania i proliferacji. W celu rozmnażania, liczenia i dalszej analizy, komórki adherentne i komórki z tkanek stałych muszą zostać zdysocjowane w celu utworzenia zawiesin.Zawiesiny jednokomórkowe są wymagane do liczenia komórek, ponownego wysiewu do podhodowli i testów/analiz komórkowych.
Odczynniki do dysocjacji mogą obejmować naturalnie występujące enzymy lub łagodniejsze nieenzymatyczne alternatywy. Odczynniki te działają poprzez chelatowanie wapnia, aby zapobiec przyczepianiu się kadheryn do powierzchni lub siebie nawzajem, uwalniając komórki z tych powierzchni podczas procesu hodowli. Odczynniki do dysocjacji komórek stosowane w procesie hodowli komórkowej mogą być specyficzne dla substratów macierzy zewnątrzkomórkowej (ECM).
Nasza kompleksowa kolekcja odczynników do dysocjacji komórek obejmuje:
Trypsyna, rekombinowana trypsyna, trypsyna StableCell™
Trypsyna jest proteazą serynową i jednym z najczęściej stosowanych enzymów odszczepiających stosowanych w adherentnymi liniami komórkowymi i do dysocjacji tkanek. Surowe preparaty trypsyny są zazwyczaj bardziej wydajne w obu zastosowaniach, ale inkubacja komórek z wysokim stężeniem trypsyny lub przez zbyt długi czas grozi uszkodzeniem błon komórkowych i może zabić komórki. Hodowane komórki są najczęściej usuwane z podłoża hodowlanego poprzez traktowanie trypsyną w połączeniu z EDTA (kwas etylenodiaminotetraoctowy), w którym stężenie trypsyny może wynosić od 0,025% do 0,5%.
Roztwory trypsyny StableCell™ zostały opracowane w celu odłączania komórek w taki sam sposób, jak standardowe roztwory trypsyny, bez konieczności dzielenia, zamrażania i rozmrażania trypsyny. Oszczędza to znaczną ilość czasu, eliminując potrzebę dzielenia i oczekiwania na rozmrożenie trypsyny w celu pasażowania komórek lub eksperymentów oraz zwalnia cenne miejsce w zamrażarkach laboratoryjnych. Nasze roztwory trypsyny StableCell™ są zalecane do przechowywania w temperaturze 2-8 °C, ale nasze badania wskazują, że trypsyna StableCell™ zachowuje >90% aktywności i wydajności nawet podczas przechowywania w temperaturze 37 °C.
Collagenase and Dispase
Kolagenaza rozszczepia wiązania peptydowe w natywnym, trójhelikalnym kolagenie. Ze względu na swoją unikalną zdolność do hydrolizy natywnego kolagenu, jest szeroko stosowana w izolacji komórek z tkanek zwierzęcych. Kolagenazy występują w różnych mikroorganizmach i wielu różnych komórkach zwierzęcych. Najsilniejszą z nich jest "surowa" kolagenaza wydzielana przez beztlenową bakterię Clostridium histolyticum.
Dyspazy są szybkimi, skutecznymi, delikatnymi i neutralnymi proteazami, które mogą oddzielać nienaruszone płaty nabłonka w hodowli od podłoża. Dispase I została użyta do trawienia tkanki płucnej i przetwarzania komórek do barwienia przepływowego, a także do izolacji mysich komórek T CD4.
Odczynniki do dysocjacji dla hodowli specjalnych
Do dysocjacji lub odłączania komórek i tkanek, które mogą wymagać łagodniejszej aktywności enzymatycznej, Accutase® i Accumax™ wykorzystują wydajne enzymy w niższym stężeniu. Rozwiązania te:
- Skutecznie odłączają embrionalne i neuronalne komórki macierzyste
- Delikatnie odłączają, aby zachować żywotność komórek & mogą zwiększyć wydajność komórek
- Nie wymagają neutralizacji<
Analiza pojedynczych komórek
Analiza pojedynczych komórek wymaga żywotnych pojedynczych komórek jako danych wejściowych podczas pracy z próbkami tkanek. Dzięki tym analizom naukowcy mogą badać różnice w populacjach kultur komórkowych w badaniach nad komórkami macierzystymi, immunologią i rakiem. Odkryj nasze wysokiej jakości odczynniki do dysocjacji, które są niezbędne do optymalizacji protokołów, tworzenia najlepszych praktyk i zapewnienia wiarygodnych danych z analizy pojedynczych komórek.
Powiązane zasoby dotyczące produktów
- Brochure: Enzymes for Cell Dissociation and Lysis
- Protokół dysocjacji komórek trypsyną
Trypsyna jest powszechnie stosowana do oddzielania przylegających komórek od powierzchni. Dostępna jest szeroka gama roztworów trypsyny, aby spełnić specyficzne wymagania linii komórkowej.
- Przewodnik po dysocjacji tkanek: Typy enzymów kolagenazy, dyspazy i liberazy
Kolagenazy, enzymy rozkładające natywny kolagen, który utrzymuje tkanki zwierzęce razem, są wytwarzane przez różne mikroorganizmy i wiele różnych komórek zwierzęcych.
Zaloguj się lub utwórz konto, aby kontynuować.
Nie masz konta użytkownika?