Klasyczne media i bufory
Odmiany pożywek do hodowli komórkowych zostały udoskonalone, aby zaspokoić zapotrzebowanie na bardziej fizjologiczne środowisko dla różnych hodowli komórek ssaków. Te pożywki i sole, wraz z ich składnikami, zostały zakwalifikowane do szerokiego zakresu zastosowań w hodowli komórkowej i są produkowane w naszych najnowocześniejszych zakładach. Wybierz pożywkę odpowiednią do danego zastosowania w oparciu o parametry, w tym stężenie glukozy, suplementację L-glutaminą lub stabilną glutaminą, włączenie wskaźnika pH czerwieni fenolowej oraz formaty sproszkowane lub płynne.
DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium)
DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium) jest najbardziej odpowiednią pożywką dla wielu fenotypów komórek adherentnych spośród zdefiniowanych pożywek do hodowli komórek i tkanek. Modyfikacja Dulbecco jest ulepszoną formułą uzupełniającą, która zwiększa zawartość wybranych aminokwasów i witamin w oryginalnej pożywce Eagle'a nawet czterokrotnie. Nasza oferta obejmuje różne stężenia glukozy, a także preparaty z L-glutaminą i bez niej. Produkty bez wskaźnika pH czerwieni fenolowej są dostępne do zastosowań wrażliwych na estrogeny, a nasza kompleksowa oferta obejmuje wygodne, gotowe do użycia formaty płynne, a także ekonomiczne pożywki w proszku dla łatwiejszego przechowywania i dłuższego okresu trwałości.
RPMI 1640 Media
Nazwany na cześć instytutu Roswell Park, gdzie został opracowany przez Moore'a et al, Podłoża RPMI 1640 są zoptymalizowane do hodowli nieadherentnych typów komórek, takich jak limfocyty i inne komórki krwi. Formuła oparta jest na serii pożywek RPMI 1630 z wykorzystaniem wodorowęglanowego systemu buforowania i zmian w ilości aminokwasów i witamin. Pożywka RPMI 1640 była stosowana do hodowli ludzkich leukocytów prawidłowych i nowotworowych. Po odpowiednim uzupełnieniu, preparat ten wykazał szerokie zastosowanie do wspomagania wzrostu wielu typów hodowanych komórek, w tym świeżych ludzkich limfocytów w 72-godzinnym teście stymulacji fitohemaglutyniną (PHA).
Formuły pożywek DMEM/F12
W ostatnich latach naukowcy donosili o hodowli różnych linii komórkowych w pożywce bez surowicy, która zawierała suplement składników odżywczych, czynników wzrostu i hormonów w miejsce surowicy. Mather i Sato (BBRC, 1985) zgłosili udaną hodowlę komórek Leydiga i Sertoliego w pożywce bez surowicy, która zawierała insulinę, transferynę, naskórkowy czynnik wzrostu, hormon leutynizujący lub hormon folikulotropowy, somatomedynę i hormon wzrostu. Chociaż hormony i ich stężenia są specyficzne dla badanego typu komórek, pożywką uznaną za optymalną dla tych badań była mieszanina 1:1 mieszaniny Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) i Ham's F-12 Nutrient Mixture, znanej również jako DMEM/F12. Bufor HEPES może być zawarty w preparacie w końcowym stężeniu 15 mM, aby zrekompensować utratę zdolności buforowania spowodowaną wyeliminowaniem surowicy.
MEM (Minimum Essential Medium)
Opracowany przez Harry'ego Eagle'a pracującego w NIH, Minimum Essential Medium (MEM) zawiera niezbędne aminokwasy uniwersalne dla potrzeb wielogatunkowych i jest jednym z najczęściej stosowanych syntetycznych podłoży do hodowli komórkowych. Wczesne próby hodowli normalnych fibroblastów ssaków i niektórych podklonów komórek HeLa wykazały, że mają one specyficzne wymagania żywieniowe, które nie mogą być spełnione przez pożywkę podstawową Eagle'a (BME). Późniejsze badania z wykorzystaniem tych i innych komórek w hodowli wykazały, że można wprowadzić dodatki do BME, aby wspomóc wzrost szerszej gamy wybrednych komórek. MEM, który zawiera te modyfikacje, zawiera wyższe stężenia aminokwasów, dzięki czemu pożywka jest bardziej zbliżona do składu białkowego komórek ssaków.
MEM był używany do hodowli szerokiej gamy komórek hodowanych w monowarstwach. Opcjonalna suplementacja nieistotnych aminokwasów do preparatów zawierających sole Hanksa lub Earle'a poszerzyła użyteczność tej pożywki. Formuła została dodatkowo zmodyfikowana poprzez opcjonalną eliminację wapnia, aby umożliwić wzrost komórek w zawiesinie.
Formuły pożywek Ham's F-10 i F-12
Mieszanki pożywek Ham's zostały pierwotnie opracowane w celu wspierania wzrostu kilku klonów komórek jajnika chomika chińskiego (CHO), a także klonów komórek HeLa i mysich komórek L, ale nadają się również do hodowli hepatocytów, fuzji wirusów i testów toksyczności. Mieszaniny te zostały opracowane do stosowania z dodatkiem lub bez dodatku surowicy, w zależności od rodzaju hodowanych komórek.
- Ham's F-10 wykazano, że wspiera wzrost ludzkich komórek diploidalnych, białych krwinek i pierwotnych eksplantów tkanek szczura, królika i kurczaka.
- Ham's F-12 został użyty do wzrostu pierwotnych szczurzych hepatocytów i szczurzych komórek nabłonka prostaty. Test toksyczności klonalnej przy użyciu komórek CHO został zgłoszony przy użyciu Ham's F-12, dostępnego również z 25 mM HEPES, który zapewnia bardziej efektywne buforowanie w optymalnym zakresie pH 7,2 - 7,4
- Modyfikacja Coona Ham's F-12 została opracowana do hodowli komórek hybrydowych wytwarzanych przez fuzję wirusową. Modyfikacja ta polega na 2-krotnym zwiększeniu standardowego stężenia aminokwasów i pirogronianu oraz dodaniu kwasu askorbinowego i dostosowanych stężeń soli. Formuła Coona zawiera 0,863 mg/L siarczanu cynku, co może czynić ją nieodpowiednią do hodowli mysich komórek L.
- Modyfikacja Ham's F-12 (zwana również Ham's F-12K) ma zwiększone stężenie wybranych aminokwasów i pirogronianu, a także zmodyfikowanych soli (formuła Konigsberga). Pożywka ta została zaprojektowana w celu wspierania wzrostu zróżnicowanych komórek szczura i kurczaka, a także pierwotnych ludzkich hepatocytów.
Medium 199 (M199)
Wczesne pożywki do hodowli tkankowych były głównie formułowane z produktów zwierzęcych i/lub ekstraktów tkankowych. W 1950 roku Morgan i jego współpracownicy poinformowali o swoich wysiłkach zmierzających do stworzenia ściśle określonego źródła składników odżywczych dla hodowli komórkowych. Ich eksperymenty, przeprowadzone z różnymi kombinacjami witamin, aminokwasów i innych czynników wykazały, że wzrost eksplantowanej tkanki może być mierzony w sposób, który stał się znany jako Medium 199 (M199), obecnie szeroko stosowanym w wirusologii, produkcji szczepionek, pierwotnej hodowli eksplantów tkankowych oraz hodowli in vitro nabłonka trzustki myszy i tkanek soczewki szczura.
Badacze ostatecznie odkryli, że długotrwała hodowla komórek wymaga dodania suplementu surowicy do płynu hodowlanego. Po odpowiednim uzupełnieniu, Medium 199 ma szerokie zastosowanie gatunkowe, szczególnie do hodowli nietransformowanych komórek.
Sole podstawowe do hodowli komórek
D-PBS, Hanks', Earle's, Tyrode's - znajdziesz właściwą formułę dla swojego zastosowania w hodowli w najbardziej kompletnej kolekcji zrównoważonych soli dostępnych gdziekolwiek.
Inne klasyczne pożywki do hodowli komórkowych
Znajdź specjalistyczne preparaty, w tym modyfikacje Amesa i Iscove's oraz modyfikacje Click.s, modyfikacje Click's, L-15, McCoy's, NCTC, i więcej.
Zaloguj się lub utwórz konto, aby kontynuować.
Nie masz konta użytkownika?