Analiza obrazowania i obrazowanie żywych komórek
Obrazowanie i analiza żywych komórek umożliwia naukowcom badanie dynamicznych zdarzeń komórkowych w czasie rzeczywistym w celu uzyskania unikalnego wglądu w biologię. Techniki te kontrastują z PCR, cytometrią przepływową i immunocytochemią oraz barwieniem tkanek przeciwciałami, które analizują zdarzenia komórkowe jako migawki. Obecnie udoskonalenia w zakresie kamer, barwników fluorescencyjnych, białek fluorescencyjnych, kompresji wideo i mikroskopii poklatkowej zwiększyły naszą zdolność do wizualizacji i analizy żywych komórek, ich interakcji międzykomórkowych i procesów subkomórkowych z niezwykłą szczegółowością i wiernością.
Powiązane artykuły techniczne
- Testy komórkowe do proliferacji komórek (BrdU, MTT, WST1), żywotności komórek i eksperymentów cytotoksyczności do zastosowań w badaniach nad rakiem, neuronauką i komórkami macierzystymi.
- Lucyferaza Firefly jest czułym reporterem do badań genów ze względu na jej brak w komórkach lub tkankach ssaków.
- PKH and CellVue® Fluorescent Cell Linker Kits provide fluorescent labeling of live cells over an extended period of time, with no apparent toxic effects.
- Fluorescent calcium indicators and dyes to measure Ca+ flux used in calcium imaging experiments. Calcium ions (Ca2+) play vital cellular physiology roles in signal transduction pathways, in neurotransmitter release, in contraction of all muscle cell types, as enzyme cofactors, and in fertilization.
- Lipophilic cell tracking dyes enable cancer biologists to track tumor and immune cell functions both in vitro and in vivo. Read the article to choose a right membrane dye kit for cell tracking and proliferation monitoring.
- Zobacz wszystkie (10)
Powiązane protokoły
- Barwniki PKH znakują egzosomy do eksperymentów śledzenia in vitro i in vivo, dostarczono szczegółowy protokół.
- Cell staining can be divided into four steps: cell preparation, fixation, application of antibody, and evaluation.
- Immunocytochemistry (ICC) Cell Capture Imaging Reagent and protocol for eliminating wash steps, and is highly effective in applications involving rare cells, low cell count samples, and limited access samples.
- Błękit toluidynowy selektywnie barwi materiał jądrowy i kwaśne składniki tkanek, pomagając w barwieniu histologicznym tkanek bogatych w DNA/RNA.
- This protocol covers 3 modes for the microscopic examination of cell samples.
- Zobacz wszystkie (2)
Znajdź więcej artykułów i protokołów
Systemy obrazowania żywych komórek
Do wizualizacji złożonych struktur i zachowania komórek stosuje się różne techniki. W analizach statycznych komórki są utrwalane i barwione, co wymaga zabicia komórek, a tym samym uchwycenia pojedynczego momentu w czasie komórkowym. Podczas gdy techniki statyczne są odpowiednie do niektórych zastosowań, nie zapewniają one wglądu w aktywność komórkową. Dynamiczne podejścia oparte na żywych komórkach ułatwiają wizualizację struktury, zachowania lub składu w żywych komórkach, bez tradycyjnego barwienia. Techniki te są idealne do zastosowań, które muszą naśladować warunki in vivo, a także do opracowywania testów predykcyjnych do badań przesiewowych leków.
Systemy obrazowania żywych komórek wykorzystują zaawansowaną optykę, kontrolę środowiska i odczynniki, które umożliwiają długoterminowe badania komórek ssaków, bakterii i drożdży. Systemy hodowli i obrazowania, które wykorzystują również mikroprzepływy, umożliwiają precyzyjną kontrolę mikrośrodowiska hodowli, takiego jak przepływ, mieszanina gazów i temperatura, przy jednoczesnym ograniczeniu fizycznego stresu dla komórek. Obrazowanie i analiza żywych komórek nadaje się do szeregu zastosowań, w tym niedotlenienia, migracji komórek, hodowli komórek 3D, dynamiki cytoszkieletu i transportu białek. Zaawansowane systemy automatyzują warunki hodowli, podawanie i wycofywanie leczenia oraz interwały obrazowania w celu tworzenia obrazów, które mogą być prezentowane jako obrazy nieruchome lub dane wideo.
Odczynniki do obrazowania żywych komórek
Podłoża i suplementy do obrazowania żywych komórek zostały zaprojektowane w celu ochrony komórek przed uszkodzeniem komórek wywołanym światłem podczas eksperymentów poklatkowych. Odczynniki te są również opracowane tak, aby miały niską autofluorescencję i fotowybielanie, co znacznie poprawia jakość fluorescencyjnych obrazów żywych komórek.
Do badania dynamicznych procesów żywych komórek dostępne są różne barwniki do barwienia żywych komórek. Fluorescencyjne barwniki organellowe pozwalają na selektywne barwienie określonych organelli, takich jak błona komórkowa, jądro, cytoplazma, mitochondria, lizosomy, retikulum endoplazmatyczne (ER), aparat Golgiego i białka cytoszkieletu, a wszystko to bez zwiększonej cytotoksyczności. Wykorzystanie barwników organelli jako przeciwbarwników w obrazowaniu żywych komórek jest również przydatne w badaniach funkcjonalnych.
Biosensory z GFP i RFP mogą być wykorzystywane do wykrywania określonego białka, jak również subkomórkowej lokalizacji tego białka w żywych komórkach za pomocą mikroskopii fluorescencyjnej lub poklatkowego przechwytywania wideo. Systemy wektorów lentiwirusowych są popularnym narzędziem do wprowadzania genów i produktów genowych do komórek, z wieloma zaletami w porównaniu z transfekcją chemiczną. Oprócz wykrywania organelli, przepuszczalne dla komórek barwniki żywych komórek są wykorzystywane do takich zastosowań, jak wykrywanie apoptozy, żywotność komórek, zdrowie komórek, niedotlenienie, badania reaktywnych form tlenu, obrazowanie wskaźników wapnia oraz eksperymenty z komórkami nerwowymi lub macierzystymi.
Zaloguj się lub utwórz konto, aby kontynuować.
Nie masz konta użytkownika?