Kultura komórek drobnoustrojów
Kultury komórek drobnoustrojów są wykorzystywane w biologii molekularnej do klonowania i ekspresji białek rekombinowanych. Są one również wykorzystywane w zastosowaniach klinicznych do izolowania, wykrywania i identyfikowania drobnoustrojów wywołujących choroby. Hodowla drobnoustrojów umożliwia wzrost i podział komórek w kontrolowanych warunkach laboratoryjnych. Bakterie i inne drobnoustroje mogą być hodowane w płynnym bulionie lub stałych pożywkach agarowych z użyciem technik aseptycznych, aby zapobiec zanieczyszczeniu.
Klonowanie i ekspresja białek rekombinowanych
Kultury bakteryjne są wykorzystywane do ekspresji białek rekombinowanych, klonowania i amplifikacji plazmidów oraz klonowania sztucznych chromosomów bakteryjnych (BAC) i kosmidów. Komórki bakteryjne mogą być modyfikowane w celu pobrania i włączenia egzogennych genów i plazmidów poprzez transformację. Transformacja komórek kompetentnych zwykle odbywa się poprzez elektroporację lub szok termiczny poddanych obróbce chemicznej komórek kompetentnych.
Transformowane bakterie są następnie identyfikowane i selekcjonowane w oparciu o nabytą oporność na antybiotyki nadawaną przez rekombinowane plazmidowe DNA lub przy użyciu "niebiesko-białych" badań przesiewowych w celu identyfikacji rekombinowanych bakterii wyrażających β-galaktozydazę jako marker. Drożdże mogą być również transformowane przy użyciu elektroporacji i innych metod do testów dwuhybrydowych drożdży i genów reporterowych w celu badania ekspresji białek i interakcji białek.
Hodowla do izolacji i identyfikacji drobnoustrojów
Kultury drobnoustrojów są medycznie ważne dla izolacji, wykrywania i różnicowania bakterii i innych drobnoustrojów wywołujących choroby zakaźne. Charakterystyka i identyfikacja przy użyciu metod hodowli opiera się zarówno na fenotypie, jak i genotypie drobnoustrojów. Komórki mogą być izolowane poprzez inokulację płytki zaciekowej w celu uzyskania czystych kolonii. Pożywki selektywne są używane do hamowania wzrostu niektórych grup drobnoustrojów, umożliwiając wzrost innym. Podłoża różnicujące zawierają związki, które umożliwiają wizualne rozróżnienie drobnoustrojów na podstawie wyglądu kolonii lub zmian w otaczającym podłożu wynikających z różnic w aktywności metabolicznej lub hemolitycznej. Pożywki te pomagają w identyfikacji bakterii i innych drobnoustrojów poprzez ich różnicowanie i eliminację.
Powiązane artykuły techniczne
- Wprowadzenie do rodzajów podłoży mikrobiologicznych, ich zastosowań i aplikacji. Zawiera receptury i przewodnik wyboru produktów.
- Środki przeciwpieniące są dostarczane jako dwa podstawowe rodzaje kompozycji lub ich mieszaniny. Organiczne środki przeciwpieniące są pochodzenia syntetycznego. Antifoamy na bazie silikonu są ogólnie uważane za polimery siloksanowe i są również syntetyczne.
- Streptococci- Overview of Detection, Identification, Differentiation and Cultivation Techniques
- Linie komórkowe do produkcji szczepionek i hodowli wirusa SARS CoV-2 i innych wirusów. Pierwotne, ludzkie diploidalne i ciągłe linie komórkowe do namnażania wirusów i szczepionek opartych na wirusach.
- Yeast is one of the most important microorganisms known and utilised by mankind. Ancient Middle Eastern civilisations used the organism to bake bread and to produce mead, beer and wine.
- Zobacz wszystkie (26)
Powiązane protokoły
- Artykuł techniczny na temat komórek kompetentnych. Transformacja to proces, w którym niektóre bakterie pobierają obcy materiał genetyczny (nagie DNA) ze środowiska.
- Inicjowanie kultury starterowej
- Hodowla bakterii E. coli w skali od małych kultur do fermentacji. Uwzględniono protokoły inicjowania kultury starterowej, komórek zawiesinowych, monokultury i posiewu bakteriofaga M13.
- Listeria stanowi zagrożenie dla zdrowia publicznego, dotykając osoby starsze, ciężarne, noworodki i osoby z obniżoną odpornością.
- Nowa norma EN ISO 22964:2017 określa horyzontalną metodę wykrywania bakterii Cronobacter spp. w żywności, paszy dla zwierząt i próbkach środowiskowych.
- Zobacz wszystkie (12)
Znajdź więcej artykułów i protokołów
Zaloguj się lub utwórz konto, aby kontynuować.
Nie masz konta użytkownika?