Kultywuj rzeczywistość
Narzędzia i aplikacje do hodowli komórek 3D
Narzędzia do pracy z kulturami komórkowymi 3D
Co to jest hodowla komórkowa 3D?
Komórki w swoim naturalnym środowisku wchodzą w ciągłe interakcje z macierzą zewnątrzkomórkową (ECM) i innymi komórkami, regulowane przez złożone funkcje biologiczne. Trójwymiarowe (3D) systemy hodowli komórkowej pozwalają komórkom rosnąć i wchodzić w interakcje z otoczeniem we wszystkich trzech wymiarach.
Używając modeli hodowli komórkowej 3D, naukowcy mogą symulować mikrośrodowisko fizjologiczne in vivo. Modele te zapewniają również lepsze przewidywanie modeli komórkowych in vitro do zastosowań obejmujących badania nad rakiem, odkrywanie leków i medycynę regeneracyjną. Przejście na hodowlę komórkową 3D może połączyć biologiczne znaczenie modeli zwierzęcych z dostępnością tradycyjnych modeli 2D.
Rysunek 1. Charakterystyka ludzkich organoidów okrężnicy przy użyciu immunocytochemicznych plam dla mucyny-1, F-aktyny i DAPI.
Modele hodowli 3D
Oferujemy bogate portfolio narzędzi, protokołów i technologii wspierających zastosowania hodowli komórkowych 3D, takie jak przepuszczalność leków, testy ADME/toksyczności, nowotwory i zaburzenia autoimmunologiczne.
Zapoznaj się z naszym Centrum Wiedzy i znajdź odpowiedzi na pytania dotyczące organoidów, hydrożeli i kultur organotypowych. Poproś o więcej informacji tutaj.
Figure 2. Apical-out Human Colon Organoids Generation. The epithelial cell polarity was reversed using the apical-out organoid culture protocol and 3dGRO™ Human Colon Intestinal Organoids. Polarity reversion was determined using DAPI (blue) and ZO-1 (MABT339, Green) immunocytochemical staining.
Organoidy to zbiór typów komórek specyficznych dla narządów, które wykazują in vivo podobną anatomię, funkcjonalność i fenotypy narządów. Mogą one pochodzić z tkanek pacjenta (organoidy pochodzące od pacjenta; PDO) lub indukowanych pluripotencjalnych komórek macierzystych (iPSC).
Organoidy zostały wykorzystane do badania zaburzeń i chorób specyficznych dla narządów, w tym powiązanych nowotworów, nieswoistego zapalenia jelit i mukowiscydozy. Są one również wykorzystywane do badania wirusowych chorób układu oddechowego, transportu leków, przepuszczalności leków, ADME/Tox i organogenezy. Organoidy są zazwyczaj hodowane przy użyciu hydrożeli.
Zapewniamy organoidy pochodzące z tkanek pacjentów, indukowane pluripotencjalne komórki macierzyste oraz odpowiedzi na najczęściej zadawane pytania dotyczące hodowli organoidów:
Organoid Culture Frequently Asked Questions
Hydrożele są narzędziem komórkowym wykorzystywanym przez naukowców do naśladowania naturalnego środowiska komórkowego in vitro. Jako napęczniała wodą sieć polimerów, hydrożele pozostają w stanie ciekłym w temperaturze 4˚C. Pozwala to badaczom na ebbedowanie komórek przed utworzeniem się żelu w temperaturze inkubacji 37˚C. Następnie komórki zostają zamknięte w żelu i mogą być hodowane w środowisku, które jest fizjologicznie istotne.
Potrzebujesz wybrać hydrożel? Dowiedz się więcej o kluczowych kwestiach związanych z wyborem hydrożelu do zastosowań w hodowlach komórkowych 3D, w tym:
- Naturalne vs. syntetyczne hydrożele
- Naturalne vs. syntetyczne hydrożele
- Biologiczne znaczenie
- Reaktywność
- Łatwość użycia
- Powtarzalność
- Powtarzalność
- Dostosowanie
- Formaty, w tym proszki, płyny, zestawy i gotowe mikropłytki
- . syntetyczne hydrożele
Figure 3. MCF-7 breast cancer cell culture. Tumorsphere formation using MCF-7 cell lines after 10 days of serial passage.
Powstałe w wyniku samoagregacji komórek, kultury sferoidalne są doskonałymi modelami zaburzeń i chorób związanych z nowotworami, takich jak rak. Ponieważ sferoidy mają komórki powierzchniowe i komórki zakopane, modele te są powszechnie stosowane do tworzenia guzów, niedotlenienia guzów i penetracji leków.
Sferoidy są łatwo przystosowane zarówno do zastosowań o wysokiej wydajności, jak i do współhodowli. Mogą być hodowane przy użyciu technologii bez rusztowań, takich jak płytki o bardzo niskim poziomie przyczepności (ULA) lub technologii opartych na rusztowaniach, takich jak hydrożele.
Figure 4. In vitro organotypic skin culture model. H&E staining showing epidermal and dermal stratified layers using an in vitro organotypic model.
Organotypowe systemy hodowlane (OCS) hodują organy in vitro, które zostały pobrane z organizmu. Modele te zachowują normalną architekturę narządów i interakcje, jednocześnie wspierając tworzenie prawie normalnych komórek warstwowych naskórka. Mogą być wykorzystywane do naśladowania złożonych patologii ludzkiej skóry, dróg oddechowych, jelit, wątroby, serca i tkanek neurologicznych.
Modele organotypowe są powszechnie stosowane do badania różnych powiązanych nowotworów, starzenia się, zaburzeń autoimmunologicznych, infekcji, mikrośrodowiska tkankowego i rozwoju tkanek. Systemy te są zwykle hodowane przy użyciu technologii opartych na rusztowaniach, takich jak wkładki do hodowli komórkowych oparte na membranach porowatych.
- Generating Organotypic 3D Skin Cultures as an In Vitro Model of the Human Epidermis
- Użycie unieśmiertelnionych linii komórkowych nabłonka oskrzeli 16HBE14o- Human Bronchial Epithelial Cell Lines do modelowania chorób układu oddechowego płuc
- Wytyczne dotyczące testu migracji komórek przy użyciu wkładów Millicell® Hanging Cell Culture Inserts
Rysunek 5. Film poklatkowy z testu obrzęku wywołanego przez forskolinę na organoidach ludzkiego jelita grubego 3dGRO® przy stężeniu 20 µM forskoliny po 4,3 godzinach.
Hodowla organoidów, sferoidów i innych modeli 3D często wymaga specjalnych narzędzi wspierających tworzenie kultur. Badacze mogą używać oddzielnych rusztowań do swoich kultur lub mogą hodować komórki bezpośrednio na płytkach do hodowli komórek 3D. Płytki z powłokami o bardzo niskim poziomie przyczepności (ULA) lub zawierające dodatkowe mikrokomórki sprzyjają tworzeniu organoidów, guzów i sferoidów w kontrolowanym środowisku 3D.
Płytki Millicell® Ultra-low Attachment (ULA) Plates
Płytki Millicell®ULA promują samoorganizację sferoidów bez rusztowań przy użyciu stabilnego, niewiążącego polimeru. Płytki zawierają ultra-hydrofilowy polimer, który ułatwia spontaniczne i naturalne tworzenie sferoid. Płytki Millicell®ULA mają wysoką przejrzystość optyczną, dzięki czemu nadają się zarówno do obrazowania jasnego pola, jak i mikroskopii konfokalnej.
Hodowaliśmy wiele komórek tworzących sferoidy przy użyciu płytek Millicell® ULA. Korzystając z płytek, opracowaliśmy ilościowe pomiary tworzenia sferoid poprzez obliczanie kolistości i okrągłości sferoidów.
Millicell® Microwell Plates
Płytki Millicell® Microwell zawierają szereg ultragęstych mikrostudzienek w kształcie litery U (W) i hydrożel. Dodanie mikrostudzienek promuje powtarzalną hodowlę organoidów do zastosowań o wysokiej przepustowości i badań przesiewowych. Mikrostudzienki pozwalają również badaczom na generowanie do setek jednorodnych organoidów w jednej studzience. Ponieważ organoidy tworzą się w jednej płaszczyźnie ogniskowej, płytki Millicell® Microwell obsługują wysiew organoidów, obrazowanie i analizę na płytce.
Płytki Millicell® Microwell są idealne do wielu zastosowań, w tym badania penetracji bariery krew-mózg oraz badania zabijania komórek T.
Kiedy naukowcy poszukują bardziej biologicznie istotnych metod niż hodowla komórek 2D, często sięgają po metody hodowli 2,5D. W hodowli komórkowej 2.5D naukowcy hodują komórki na powlekanych powierzchniach, takich jak powłoka biologiczna lub syntetyczny polimer, zwiększając wzrost, przyłączanie i różnicowanie komórek. Naukowcy mogą przejść od hodowli 2D do 2,5D dzięki naszej kolekcji narzędzi, w tym wkładkom Millicell® i woltomierzowi cyfrowemu Millicell® ERS 3.0.
Millicell® ERS 3.0 Digital Voltohmmeter
The Millicell® ERS 3.0 Digital Voltohmmeter wykonuje wysoce stabilne pomiary TEER, automatycznie zapisuje dane i zawiera łatwy w użyciu interfejs z ekranem dotykowym, sondę stojącą w studzience, źródło zasilania wtyczkowe lub akumulatorowe oraz regulowaną elektrodę, która jest kompatybilna z szeroką gamą wkładek do hodowli komórkowych, w tym z wkładkami do hodowli komórkowych Millicell®.
Dane TEER z woltomierza cyfrowego Millicell® ERS 3.0 można łatwo wyeksportować za pomocą napędu USB, sieci Ethernet lub przesłać do chmury. Nasz Millicell® Cloud oferuje kompleksowy widok pomiarów, umożliwiający wizualizację i analizę danych w różnych formatach.
Millicell® Cell Culture Inserts
Czytniki TEER są często używane do monitorowania i pomiaru tworzenia bariery monowarstwy nabłonkowej w eksperymentach 2.5D. Badacze przeprowadzają testy tworzenia barier na wiszących wkładkach z porowatymi membranami, z komórkami tworzącymi zwarte monowarstwy, gdy występuje wzrost pomiarów oporu. .Millicell® wiszące wkładki do hodowli komórkowych umożliwiają naukowcom badanie powierzchni apikalnej i bazalnej monowarstwy i są idealne do zastosowań w ko-kulturach.
Przejście z 2D do 3D
Hodowla komórek 3D to metoda in vitro dla badaczy, którzy chcą dokładniej modelować warunki fizjologiczne. Jest ona często bardziej odpowiednia niż tradycyjne metody 2D. Metody hodowli komórek 3D promują interakcje z innymi komórkami i środowiskiem fizycznym. Interakcje te mogą regulować wiele funkcji komórkowych, w tym regulację transkrypcji i apoptozę.
Technologie bez rusztowań
Jedną z metod hodowli komórek 3D jest model bez rusztowań. Techniki hodowli komórek 3D bez rusztowań pozwalają komórkom na samoorganizację i tworzenie nieprzylegających agregatów komórek, klastrów, sferoidów lub sfer nowotworowych.
Technologie oparte na rusztowaniach
W metodach hodowli komórek 3D opartych na rusztowaniach, rusztowania 3D zapewniają wsparcie strukturalne dla przyczepiania komórek i rozwoju tkanek. Odtwarza to elementy natywnej macierzy zewnątrzkomórkowej (ECM) lub środowiska komórkowego.
Dla naukowców badających bezpieczeństwo i skuteczność leków, ADME/toksyczność i rozwój bioterapeutyków, modele hodowli komórkowych 3D mogą skrócić czas poświęcany na konfigurowanie i przeprowadzanie testów.
Powiązane treści
- /PL/pl/technical-documents/protocol/cell-culture-and-cell-culture-analysis/3d-cell-culture/tcell-migration-assays-using-millicell-cell-culture-inserts
- Tumor Spheroid Formation Assay
3D cell culture protocol: the tumor spheroid formation assay using a serum-free and xeno-free cancer stem cell culture media.
- 3D Bioprinting: Bioink Selection Guide
Bioinks can be 3D bioprinted into functional tissue constructs for drug screening, disease modeling, and in vitro transplantation. Choose the Bioinks and method for specific tissues engineering applications.
- Webinar: 3D Organ-on-a-Chip Applications Using the AIM Biotech Chip
3D Organ-on-a-Chip Applications Using the AIM Biotech Chip
- Attachment Factors for 3-Dimensional Cell Culture
The extracellular matrix (ECM) and its attachment factor components are discussed in this article in relation to their function in structural biology and their availability for in vitro applications.
- /PL/pl/technical-documents/technical-article/cell-culture-and-cell-culture-analysis/imaging-analysis-and-live-cell-imaging/cellular-fluorescence-imaging
- /deepweb/assets/sigmaaldrich/marketing/global/documents/425/972/3dcc-br6480en-ms.pdf
Powiązane zasoby dotyczące produktów
- Test tworzenia sferoidów guza
Protokół hodowli komórek 3D: test tworzenia sferoidów nowotworowych przy użyciu pożywki do hodowli nowotworowych komórek macierzystych wolnej od surowicy i kseno.
- Wybór biotuszu do biodruku 3D
Biotusze umożliwiają biodrukowanie 3D konstruktów tkankowych do badań przesiewowych leków i przeszczepów; wybór odpowiednich biotuszów do określonej inżynierii tkankowej.
- Instrumenty do obrazowania komórek
Usprawnienie analizy komórek: Wykorzystanie narzędzi obrazowania do oceny i analizy stanu komórek. Przystępne cenowo rozwiązania do obrazowania cyfrowego na żywo, rozszerzające możliwości laboratorium.
- Webinar: 3D Organ-on-a-Chip Applications Using the AIM Biotech Chip
3D Organ-on-a-Chip Applications Using the AIM Biotech Chip
- Rusztowania do hodowli komórek 3D
Zaawansowane rusztowania do hodowli komórkowych 3D naśladują ECM, oferując modele predykcyjne dla procesów fizjologicznych.
- Czynniki przyczepności dla trójwymiarowej hodowli komórek
Macierz zewnątrzkomórkowa (ECM) i jej składniki czynnika wiążącego są omówione w tym artykule w odniesieniu do ich funkcji w biologii strukturalnej i ich dostępności do zastosowań in vitro.
- Hydrożele
Opracowanie zaawansowanych modeli komórkowych: Hydrożele 3D naśladują tkanki fizjologiczne. Wybierz naturalne lub syntetyczne hydrożele, aby uzyskać precyzyjne atrybuty.
- /deepweb/assets/sigmaaldrich/marketing/global/documents/425/972/3dcc-br6480en-ms.pdf
Cultivate reality with state-of-the-art 3D cell technologies including tumor spheroids, stem cell organoids, patient-derived organoids, and tissue engineering via 3D bioprinting.
Zaloguj się lub utwórz konto, aby kontynuować.
Nie masz konta użytkownika?