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T8802

Sigma-Aldrich

Tripsina

TPCK Treated, essentially salt-free, lyophilized powder, ≥10,000 BAEE units/mg protein

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About This Item

Número CAS:
Número da licença da enzima:
Número CE:
Número MDL:
Código UNSPSC:
12352204
NACRES:
NA.54

fonte biológica

bovine pancreas

Nível de qualidade

esterilidade

aseptically filled

Formulário

essentially salt-free, lyophilized powder

atividade específica

≥10,000 BAEE units/mg protein

peso molecular

23.8 kDa

composição

protein, ≥95%

solubilidade

hydrochloric acid: soluble 1 mM, clear

atividade externa

Chymotrypsin ≤0.1 BTEE units/mg protein

temperatura de armazenamento

−20°C

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Descrição geral

The trypsin molecule has two domains: one is related to the enzyme active site and the tryptophan residues; the other is related to the 8-anilinonaphthalene-1-sulfonate binding.

Aplicação

Para digestão de peptídeos por tripsina, use uma proporção de cerca de 1:100 a 1:20 de tripsina:peptídeo. O uso típico deste produto é na remoção de células aderentes de uma superfície de cultura. A concentração de tripsina necessária para desalojar as células do substrato depende principalmente do tipo de célula e da idade da cultura. As tripsinas também foram usadas para ressuspender células durante a cultura celular, para pesquisa em proteômica para digerir proteínas e em diversas digestões em gel. Outras aplicações incluem a avaliação da cristalização por técnicas baseadas em membranas e em um estudo para determinar que as taxas de dobramento de proteínas e a produção de proteínas podem ser limitadas pela presença de armadilhas cinéticas.
Trypsin can be used to release adherent cells from tissue culture plates for passaging. Trypsin has been used in a study to assess the effects of macromolecular crowding on the structural stability of human α-lactalbumin. Trypsin has also been used in a study to investigate BN-PAGE analysis of Trichoderma harzianum secretome.

Ações bioquímicas/fisiológicas

A tripsina cliva peptídeos no lado C-terminal dos resíduos de lisina e arginina. A taxa de hidrólise dessa reação é diminuída se houver um resíduo ácido em qualquer lado do sítio de clivagem, e a hidrólise é interrompida se houver um resíduo de prolina no lado carboxila do sítio de clivagem. O pH ótimo para a atividade de tripsina é 7-9. A tripsina também pode clivar ligações de éster e amida de derivados sintéticos de aminoácidos. O EDTA é adicionado a soluções de tripsina como um quelante que neutraliza íons de cálcio e magnésio que obscurecem as ligações peptídicas nas quais a tripsina age. A remoção desses íons aumenta a atividade enzimática.

Os inibidores de protease de serina, inclusive o DFP, TLCK, APMSF, AEBSEF e a aprotinina, dentre outros, inibem a tripsina.

Definição da unidade

Uma unidade de BAEE produz A253 de 0,001 por minuto em pH 7,6 a 25 °C usando BAEE como substrato.
One BAEE unit will produce a ΔA253 of 0.001 per min at pH 7.6 at 25 °C using BAEE as substrate. Reaction volume = 3.2 ml (1 cm light path).

Nota de preparo

TPCK treated

Nota de análise

Protein determined by E1%/280

Outras notas

View more information on trypsin at www.sigma-aldrich.com/enzymeexplorer

Pictogramas

Health hazardExclamation mark

Palavra indicadora

Danger

Frases de perigo

Classificações de perigo

Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3

Órgãos-alvo

Respiratory system

Código de classe de armazenamento

11 - Combustible Solids

Classe de risco de água (WGK)

WGK 1

Equipamento de proteção individual

dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves


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