Ekspresja i wyciszanie genów

Modulowanie ekspresji genów jest jedną z najpotężniejszych technik stosowanych przez naukowców badających złożone sieci genetyczne regulujące procesy biologiczne. W szczególności, eksperymenty modulacji genów są szeroko stosowane w celu identyfikacji środków terapeutycznych skutecznych w zwalczaniu chorób, od raka po zaburzenia rozwojowe i neurodegeneracyjne.  

Istnieją liczne technologie skutecznej regulacji ekspresji genów w komórkach i tkankach. RNAi (interferencja RNA) to naturalny mechanizm biologiczny, w którym dupleksy siRNA (krótkie interferujące RNA) indukują silne, ukierunkowane hamowanie ekspresji genów. SigmaAldrich® Advanced Genomics jest liderem w opracowywaniu komercyjnych Produkty RNAi dla badaczy. 

Ostatnio, rozwój inhibicji CRISPR (CRISPRi) i aktywacji CRISPR (CRISPRa) daje badaczom nowy, potężny zestaw narzędzi, który pozwala na niemal nieograniczone możliwości regulacji genów. Wykorzystując niezrównane portfolio ProduktyCRISPR od SigmaAldrich® Advanced Genomics, naukowcy są w stanie dokładnie i skutecznie znokautować, znokautować, aktywować lub nadeksprymować praktycznie każdy gen.

• RNAi - Gene Modulation to Illuminate Genetic Pathways
• CRISPRi i CRISPRa - Potężne hamowanie i aktywacja genów

Powiązane artykuły techniczne

• Zaprojektowane siRNA
  Algorytm Rosetta siRNA Design Algorithm optymalizuje sekwencje siRNA w celu zmniejszenia efektów off-target i zwiększenia wydajności RNAi.
• Odwrotna transkrypcja
  Wyzwania w analizie ekspresji genów obejmują stabilność mRNA, czasowe wzorce transkrypcji i korelację mRNA-białko, co wpływa na dokładność.
• Mapy wektorowe
  Seria wektorów umożliwiających pomyślną realizację eksperymentów RNAi.
• Dysmutaza ponadtlenkowa
  Indeks aplikacji produktu Enzyme Explorer dla dysmutazy ponadtlenkowej oferowany przez nas online. Dysmutaza ponadtlenkowa (SOD) katalizuje redukcję anionów ponadtlenkowych do nadtlenku wodoru.
• Bioluminescencyjne testy lucyferazy Firefly
  Lucyferaza Firefly jest czułym reporterem do badań genów ze względu na jej brak w komórkach lub tkankach ssaków.
• Zobacz wszystkie (95)

Powiązane protokoły

• Protokół spinokulacji
  Protokół transdukcji lentiwirusowej komórek zawiesiny przy użyciu cząsteczek lentiwirusowych MISSION TRC shRNA do długotrwałego wyciszania.
• FACS Titration of Lentivirus Protocol
  FACS (Fluorescence-Activated Cell Sorting) provides a method for sorting a mixed population of cells into two or more groups, one cell at a time, based on the specific light scattering and fluorescence of each cell. This method provides fast, objective, and quantitative recording of fluorescent signals from individual cells.
• MystiCq® MicroRNA® Quantitation System
  Method for purification, reverse transcription and quantitative PCR for MicroRNAs using Mysticq reagents
• Antibiotic Optimization for Cell Transduction Using a Cytotoxicity Profile
  Experimentally determine the appropriate antibiotic concentration for selecting stable cell lines. This titration protocol can determine the lowest concentration of puromycin needed to efficiently select transduced cells.
• Preparation of the Lentiviral Transduction Particles Using Packaging Plasmid Mix
  Preparation of the Lentiviral Transduction Particles Using Packaging Plasmid Mix
• Zobacz wszystkie (31)

Znajdź więcej artykułów i protokołów

Wprowadź słowa kluczowe

Schemat przedstawiający mechanikę wyciszania genów w komórkach za pośrednictwem shRNA i siRNA.

RNAi - Modulacja genów w celu naświetlenia ścieżek genetycznych

Skriningi genomiki funkcjonalnej są integralną częścią badań nad odkryciami, pozwalając na odkrycie mechanizmów leżących u podstaw systemów biologicznych, ścieżek i chorób. Skuteczne badanie tych złożonych sieci interakcji molekularnych można przeprowadzić przy użyciu bibliotek shRNA, aby zapewnić niezawodne, wydajne i długotrwałe eliminacje.

Sigma-Aldrich^® Advanced Genomics jest wyłącznym dostawcą kolekcji TRC1.5 i TRC2 od The RNAi Consortium (TRC). Te oparte na lentiwirusach biblioteki shRNA zapewniają niezrównane pokrycie i są dostępne w wielu formatach, które obejmują cały genom, indywidualne klony/wektory RNAi i zestawy rodzin genów.

• Explore shRNA CLONES & LIBRARIES

CRISPRi i CRISPRa - potężne hamowanie i aktywacja genów

CRISPRi (interferencja CRISPR) i CRISPRa (aktywacja CRISPR) zapewniają odpowiednio wysoce skuteczne wyciszanie i aktywację genów bez zmiany sekwencji DNA. Stosując je w badaniach przesiewowych LOF (loss-of-function) i GOF (gain-of-function) na dużą skalę, naukowcy są w stanie zidentyfikować unikalne, ale funkcjonalnie powiązane szlaki genowe, które często są pomijane w innych metodach.

Schematy CRISPRa z kompleksem Synergystic Activation Mediator (SAM) i CRISPRi wykorzystującym domenę KRAB.

Sigma-Aldrich^® Advanced Genomics oferuje kompletny zestaw zoptymalizowanych CRISPRi i biblioteki CRISPRa do eksperymentów knockdown i nadekspresji genów. Połączone biblioteki lentiwirusowe CRISPRi i SAM CRISPRa są dostępne od ręki lub dostosowane do konkretnych potrzeb.

• CRISPRi Whole Genome and Non-Coding Libraries
• CRISPRa Whole Genome SAM Libraries

Zastanawiasz się, czy CRISPR jest odpowiedni dla Twojego projektu? Połącz się z ekspertem Sigma-Aldrich^® Advanced Genomics.

Powiązane zasoby

Białka fuzyjne Cas9-GFP
Broszura RNAi
mapy wektorowe TRC
shRNA FAQs