Ekspresja i wyciszanie genów
Modulowanie ekspresji genów jest jedną z najpotężniejszych technik stosowanych przez naukowców badających złożone sieci genetyczne regulujące procesy biologiczne. W szczególności, eksperymenty modulacji genów są szeroko stosowane w celu identyfikacji środków terapeutycznych skutecznych w zwalczaniu chorób, od raka po zaburzenia rozwojowe i neurodegeneracyjne.
Istnieją liczne technologie skutecznej regulacji ekspresji genów w komórkach i tkankach. RNAi (interferencja RNA) to naturalny mechanizm biologiczny, w którym dupleksy siRNA (krótkie interferujące RNA) indukują silne, ukierunkowane hamowanie ekspresji genów. SigmaAldrich® Advanced Genomics jest liderem w opracowywaniu komercyjnych Produkty RNAi dla badaczy.
Ostatnio, rozwój inhibicji CRISPR (CRISPRi) i aktywacji CRISPR (CRISPRa) daje badaczom nowy, potężny zestaw narzędzi, który pozwala na niemal nieograniczone możliwości regulacji genów. Wykorzystując niezrównane portfolio ProduktyCRISPR od SigmaAldrich® Advanced Genomics, naukowcy są w stanie dokładnie i skutecznie znokautować, znokautować, aktywować lub nadeksprymować praktycznie każdy gen.
Powiązane artykuły techniczne
- Algorytm Rosetta siRNA Design Algorithm optymalizuje sekwencje siRNA w celu zmniejszenia efektów off-target i zwiększenia wydajności RNAi.
- Wyzwania w analizie ekspresji genów obejmują stabilność mRNA, czasowe wzorce transkrypcji i korelację mRNA-białko, co wpływa na dokładność.
- Seria wektorów umożliwiających pomyślną realizację eksperymentów RNAi.
- Indeks aplikacji produktu Enzyme Explorer dla dysmutazy ponadtlenkowej oferowany przez nas online. Dysmutaza ponadtlenkowa (SOD) katalizuje redukcję anionów ponadtlenkowych do nadtlenku wodoru.
- Lucyferaza Firefly jest czułym reporterem do badań genów ze względu na jej brak w komórkach lub tkankach ssaków.
- Zobacz wszystkie (95)
Powiązane protokoły
- Protokół transdukcji lentiwirusowej komórek zawiesiny przy użyciu cząsteczek lentiwirusowych MISSION TRC shRNA do długotrwałego wyciszania.
- FACS (Fluorescence-Activated Cell Sorting) provides a method for sorting a mixed population of cells into two or more groups, one cell at a time, based on the specific light scattering and fluorescence of each cell. This method provides fast, objective, and quantitative recording of fluorescent signals from individual cells.
- Method for purification, reverse transcription and quantitative PCR for MicroRNAs using Mysticq reagents
- Experimentally determine the appropriate antibiotic concentration for selecting stable cell lines. This titration protocol can determine the lowest concentration of puromycin needed to efficiently select transduced cells.
- Preparation of the Lentiviral Transduction Particles Using Packaging Plasmid Mix
- Zobacz wszystkie (31)
Znajdź więcej artykułów i protokołów
Schemat przedstawiający mechanikę wyciszania genów w komórkach za pośrednictwem shRNA i siRNA.
RNAi - Modulacja genów w celu naświetlenia ścieżek genetycznych
Skriningi genomiki funkcjonalnej są integralną częścią badań nad odkryciami, pozwalając na odkrycie mechanizmów leżących u podstaw systemów biologicznych, ścieżek i chorób. Skuteczne badanie tych złożonych sieci interakcji molekularnych można przeprowadzić przy użyciu bibliotek shRNA, aby zapewnić niezawodne, wydajne i długotrwałe eliminacje.
Sigma-Aldrich® Advanced Genomics jest wyłącznym dostawcą kolekcji TRC1.5 i TRC2 od The RNAi Consortium (TRC). Te oparte na lentiwirusach biblioteki shRNA zapewniają niezrównane pokrycie i są dostępne w wielu formatach, które obejmują cały genom, indywidualne klony/wektory RNAi i zestawy rodzin genów.
CRISPRi i CRISPRa - potężne hamowanie i aktywacja genów
CRISPRi (interferencja CRISPR) i CRISPRa (aktywacja CRISPR) zapewniają odpowiednio wysoce skuteczne wyciszanie i aktywację genów bez zmiany sekwencji DNA. Stosując je w badaniach przesiewowych LOF (loss-of-function) i GOF (gain-of-function) na dużą skalę, naukowcy są w stanie zidentyfikować unikalne, ale funkcjonalnie powiązane szlaki genowe, które często są pomijane w innych metodach.
Schematy CRISPRa z kompleksem Synergystic Activation Mediator (SAM) i CRISPRi wykorzystującym domenę KRAB.
Sigma-Aldrich® Advanced Genomics oferuje kompletny zestaw zoptymalizowanych CRISPRi i biblioteki CRISPRa do eksperymentów knockdown i nadekspresji genów. Połączone biblioteki lentiwirusowe CRISPRi i SAM CRISPRa są dostępne od ręki lub dostosowane do konkretnych potrzeb.
Zastanawiasz się, czy CRISPR jest odpowiedni dla Twojego projektu? Połącz się z ekspertem Sigma-Aldrich® Advanced Genomics.
Powiązane zasoby
Białka fuzyjne Cas9-GFP
Broszura RNAi
mapy wektorowe TRC
shRNA FAQs
Zaloguj się lub utwórz konto, aby kontynuować.
Nie masz konta użytkownika?