Testowanie Mycoplasma w branży farmaceutycznej

Slide 1 of 2

Gotowe do użycia płynne pożywki do badania Mycoplasma

Gotowe do użycia stałe pożywki do badania Mycoplasma

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest powszechnym i powtarzającym się problemem w wielu systemach hodowli komórkowych w badaniach nauk przyrodniczych i przemyśle farmaceutycznym. Mykoplazmy mogą osiągać wysokie miana w pożywkach hodowlanych bez wykazywania typowych objawów skażenia bakteryjnego, takich jak zmętnienie. Ich wpływ na hodowane komórki obejmuje zmieniony metabolizm, spowolnioną proliferację i aberracje chromosomalne. Krótko mówiąc, zanieczyszczenie Mycoplasma zagraża wiarygodności danych dotyczących dotkniętych linii komórkowych i wyników badań w dziedzinie nauk przyrodniczych. To sprawia, że testowanie na obecność Mycoplasma , a tym samym utrzymanie wolnych od zanieczyszczeń kultur komórkowych, ma fundamentalne znaczenie dla badań opartych na komórkach i produkcji towarów, w przypadku których zdrowie konsumentów jest głównym przedmiotem zainteresowania.

• Usługi testowania bezpieczeństwa biologicznego
  
• O bakteriach Mycoplasma
  
• Źródła zanieczyszczenia Mycoplasma
• Dlaczego Mycoplasma w przemyśle farmaceutycznym?
• Mycoplasma Testing Methods
• Workflow to Detect Mycoplasmas acc. EP 2.6.7 & USP 63
• Nośniki gotowe do użycia do wykrywania Mycoplasma

Powiązane artykuły techniczne

• Protokół hodowli komórkowej 10: Badanie komórek pod kątem zanieczyszczenia mykoplazmą za pomocą barwienia DNA metodą Hoechsta
  Protokół hodowli komórkowej do testowania linii komórkowych pod kątem zanieczyszczenia mykoplazmą przy użyciu pośredniego barwienia DNA przy użyciu Hoechst 33342.
• Mycoplasma Detection acc. to Pharmacopoeias — Ready-to-Use
  Mycoplasma testing and detection is preformed because contamination with these bacteria can pose a significant challenge for biopharmaceutical manufacturing.
• Testing Cells for Mycoplasma Contamination by Culture Isolation
  Cell culture protocol for testing cell lines for mycoplasma contamination using isolation techniques. Free ECACC handbook download.
• Zobacz wszystkie (4)

Znajdź więcej artykułów

Wprowadź słowa kluczowe

USŁUGI TESTOWANIA BEZPIECZEŃSTWA BIOLOGICZNEGO

.Usługi testowania bezpieczeństwa biologicznego w celu zbadania mAbs oraz materiałów do terapii komórkowej i genowej oraz szczepionek w celu zapewnienia, że są one wolne od czynników przypadkowych lub nieoczekiwanych wyników, które mogą spowodować katastrofalne awarie w dalszym przetwarzaniu, w tym: Badanie na obecność mykoplazmy.

O Mycoplasma Bacteria

Mycoplasma są jednymi z najmniejszych znanych bakterii, zdolnymi do przejścia przez filtry o wielkości porów 0,2 µm. Mikroorganizmy te rosną tlenowo lub w fakultatywnych warunkach beztlenowych.

Mikoplazmy są pasożytnicze lub saprofityczne. Kilka gatunków, na przykład M. pneumoniae, jest patogennych, powodując zapalenie płuc i inne choroby układu oddechowego u ludzi. M. genitalium jest prawdopodobnie zaangażowany w choroby zapalne miednicy. Jako bakterie pozbawione ściany komórkowej, mykoplazmy nie są podatne na penicyliny lub inne antybiotyki, które działają na tę strukturę. Aby ustabilizować swoje błony cytoplazmatyczne, większość mykoplazm wymaga steroli, które pobierają ze swojego środowiska, zwykle w postaci cholesterolu od swoich zwierzęcych żywicieli. Wiele szczepów Mycoplasma jest również tolerancyjnych na wiele innych antybiotyków.

Źródła zanieczyszczenia Mycoplasma

Źródła zanieczyszczenia Mycoplasma w laboratorium i w produkcji są bardzo trudne do kontrolowania. Niektóre gatunki występują na ludzkiej skórze i mogą zostać wprowadzone do hodowli poprzez niewłaściwe praktyki aseptyczne. Dodatkowo, mykoplazmy mogą zostać wprowadzone poprzez zanieczyszczone suplementy, takie jak płodowa surowica bydlęca lub, najczęściej, poprzez przeniesienie z innych zanieczyszczonych hodowli komórkowych. Gdy hodowla komórkowa zawiera mykoplazmy, drobnoustroje te mogą szybko rozprzestrzenić się i zanieczyścić inne obszary laboratorium poprzez aerozole i cząstki stałe generowane podczas obsługi hodowli. Ścisłe przestrzeganie dobrych aseptycznych praktyk laboratoryjnych jest kluczowe, a rutynowe testowanie kultur jest wysoce zalecane dla skutecznej kontroli zanieczyszczenia mykoplazmą w obszarach produkcyjnych.

Dlaczego Testy na obecność mikoplazmy w przemyśle farmaceutycznym?

Instalacje biofarmaceutyczne, które wykorzystują komórki eukariotyczne do produkcji szczepionek, muszą testować swoje banki komórek i partie nasion wirusów, a także szczepionki luzem pod kątem zanieczyszczenia Mycoplasma. Gatunki z tego rodzaju bakterii infekują komórki eukariotyczne, zakłócając ich wzrost i metabolizm. Gdy mykoplazmy zakłócają produkcję szczepionek, może to wpływać na jakość białka i wydajność, a co ważniejsze powodować skutki uboczne u pacjentów, którym podano końcowy produkt szczepionki.

Zanieczyszczenie bioreaktora mykoplazmami może prowadzić do znacznych strat czasu, materiałów i przychodów, chyba że zostanie zidentyfikowane na wczesnym etapie procesu produkcyjnego. Bez rygorystycznych procedur testowania, Mycoplasma zanieczyszczenie biofarmaceutycznych partii produkcyjnych jest niezwykle trudne do wykrycia, ponieważ obecność mykoplazm zazwyczaj nie prowadzi do zmian pH lub wizualnego zmętnienia pożywki. Kompendialna Mycoplasma metoda testowa obejmuje zarówno testy hodowlane, jak i testy komórek wskaźnikowych w celu wykrycia. Jeśli do analizy używane są tylko dwie pożywki, zaleca się stosowanie pożywek FREY i FRIIS w połączeniu.

Mycoplasma Testing Methods

Ważne jest testowanie biofarmaceutyków, szczepionek, kultur komórkowych i kultur wirusów pod kątem obecności mykoplazm na różnych etapach kontroli jakości. Trzy najczęściej stosowane metody testowe to:

• Mycoplasma culture, gdzie pożywka bakteryjna zoptymalizowana pod kątem mykoplazm jest zaszczepiana badanymi próbkami
• Metody barwienia DNA, w których jądra mykoplazm są barwione Hoechstem lub DAPI i obrazowane za pomocą mikroskopii fluorescencyjnej
• PCR (reakcja łańcuchowa polimerazy) w celu amplifikacji bakteryjnego DNA, jeśli mykoplazmy są obecne w próbce

Workflow do wykrywania mykoplazm zgodnie z EP 2.6.7 & USP 63

* W kolejnych dniach po inokulacji, podhodować każdą pożywkę płynną poprzez inokulację 0,2 ml na co najmniej 1 płytce każdej pożywki stałej. Powtórzyć procedurę między 6^tym a 8^tym dniem, ponownie między 13^tym a 15^tym dniem i jeszcze raz między 19^tym dniem a 15^tym dniem i ponownie między 19^tym a 21^tym dniem testu. Obserwować płynne pożywki co 2 lub 3 dni i jeśli wystąpi zmiana koloru, podhodować. Uwaga: Ponadto wymagana jest jedna kontrola pozytywna i jedna kontrola negatywna na pożywkę stałą i płynną, z czasem inkubacji wynoszącym 14 dni.

Podłoża gotowe do użycia do wykrywania Mycoplasma Detection

Zapewniamy kompletne portfolio gotowych do użycia płynnych i stałych podłoży hodowlanych wymaganych do wykrywania mykoplazm zgodnie z Farmakopeą Europejską 6.1 (2.6.7.) i USP 35 (63). Bez żadnych dalszych etapów przygotowania, nasze gotowe do użycia pożywki do hodowli Mycoplasma zapewniają stałą jakość produktu i pełną identyfikowalność dzięki certyfikatom analiz poszczególnych partii.

Ze względu na ich składniki, pożywki do hodowli Mycoplasma mają zazwyczaj znacznie krótszy okres przydatności do użycia niż większość innych pożywek do kontroli jakości mikrobiologicznej. Okres trwałości naszych gotowych do użycia płynnych i stałych pożywek Friis, Frey i Hayflick został wydłużony do 4 miesięcy dla płytek agarowych i 6 miesięcy dla bulionów. Poznaj naszą pełną gamę gotowych do użycia podłoży hodowlanych o dłuższym okresie trwałości, aby ułatwić Mycoplasma testowanie.

Najważniejsze wydarzenia

Poster: Testowanie bezpieczeństwa biologicznego wirusów onkolitycznych; pokonywanie wyzwań związanych z testowaniem czynników ubocznych i usuwaniem wirusów