Testy na obecność pirogenów
Testowanie na obecność pirogenów jest krytycznym krokiem w zapewnianiu bezpieczeństwa pozajelitowych produktów farmaceutycznych i urządzeń medycznych. Jest to część obowiązkowych testów uwalniania w celu uniknięcia zagrażających życiu reakcji gorączkowych wywołanych przez substancje pirogenne. Test aktywacji monocytów (MAT) może wykrywać zarówno pirogeny endotoksynowe, jak i nieendotoksynowe w jednym in vitro teście.
Czytaj więcej o
Test aktywacji monocytów (MAT)
Używany do wykrywania zarówno endotoksyn, jak i pirogenów niebędących endotoksynami w produktach pozajelitowych, takich jak farmaceutyki i wyroby medyczne, MAT stanowi in vitro alternatywę dla konwencjonalnych testów na zwierzętach zgodnie z wytycznymi regulacyjnymi.nbsp;in vitro alternatywę dla konwencjonalnych testów na zwierzętach zgodnie z wytycznymi regulacyjnymi.
Test na obecność pirogenów u królików i test LAL (Limulus Amebocyte Lysate) są szeroko stosowane do wykrywania pirogenów. Obie metody wykorzystują zwierzęta i wykazują pewne ograniczenia. Króliczy test na obecność pirogenów wykazuje brak odporności, ponieważ reakcja zwierzęcia może znacznie różnić się od reakcji człowieka. W teście LAL wykrywane są tylko endotoksyny, co powoduje zagrożenie bezpieczeństwa poprzez ignorowanie pirogenów innych niż endotoksyny, które mogą być obecne w badanej próbce.
Aby przezwyciężyć te ograniczenia, test aktywacji monocytów (MAT) został wprowadzony do Farmakopei Europejskiej w 2010 r. jako metoda kompendialna w celu zastąpienia testu na obecność pirogenów króliczych (EP Rozdział 2.6.30) i wspomniany w wytycznych FDA dla przemysłu.
Uwaga: Komisja Farmakopei Europejskiej podjęła decyzję o zaprzestaniu stosowania króliczego testu pirogenowego zgodnie z zasadą 3R, uznając, że MAT jest najlepszą opcją alternatywną.
Przeczytaj artykuł i rozmawiaj dalej z naszymi ekspertami, aby rozpocząć działania.
PyroMAT® in vitro test do wykrywania pirogenów endotoksycznych i nieendotoksycznych
System PyroMAT® oparty jest na linii komórkowej Mono-Mac-6 i odczycie IL-6. Oferuje wszystkie zalety testu aktywacji monocytów w połączeniu z korzyściami płynącymi z zastosowania linii komórkowej.
- Wykrywanie szerokiego zakresu pirogenów: bezpieczeństwo pacjenta jest zapewnione, jeśli testowany jest pełny zakres pirogenów. Podobnie jak króliczy test pirogenowy (RPT), MAT jest skuteczny zarówno w wykrywaniu pirogenów endotoksynowych, jak i nieendotoksynowych.
- Rozszerzenie zakresu produktów, które mogą być testowane: najczęściej stosowane metody, RPT, bakteryjny test endotoksynowy (BET) lub LAL, są ograniczone pod względem rodzajów produktów, które mogą testować. MAT oferuje większą elastyczność w zakresie zastosowań.
- Test in vitro, który naśladuje ludzką reakcję immunologiczną: dla solidnego modelu predykcyjnego, który zmniejsza konsumpcję zwierząt.
- Zgodność z międzynarodowymi przepisami i wytycznymi: zgodnie z etycznymi trendami przemysłu i organów regulacyjnych w celu zmniejszenia wykorzystania testów na zwierzętach.
- Standaryzowana reaktywność i wysoka czułość (LOD 0,05 EU/mL).
- Kwalifikowane komórki: oprócz tego, że są cytowane w międzynarodowej walidacji MAT, komórki Mono-Mac-6 są kwalifikowane do ekspresji wszystkich powierzchniowych receptorów Toll-Like (TLR), aby zapewnić wykrywanie szerokiego zakresu pirogenów.
Czytaj więcej o Nieendotoksycznych kontrolach dodatnich pirogenów.
Kontrole dodatnie nieendotoksycznych pirogenów
Farmakopea Europejska, rozdział 2.6.30 (Test aktywacji monocytów) wymaga, aby testy przygotowawcze obejmowały "co najmniej 2 nieendotoksyczne ligandy dla receptorów toll-podobnych [...]. Wybór stosowanych pirogenów nieendotoksycznych powinien odzwierciedlać najbardziej prawdopodobne zanieczyszczenia badanego preparatu."
Aby odpowiedzieć na ten wymóg, zapewniamy rozszerzony zakres kontroli pozytywnych:
- Odbicie kilku rodzajów zanieczyszczeń zwykle występujących w procesach produkcji farmaceutycznej (bakterie Gram-ujemne i Gram-dodatnie, wirusy i mykoplazma).
- Ukierunkowanie na kilka monocytarnych receptorów toll like (TLR)
- Wykrywanie szerokiego spektrum pirogenów: Podobnie jak króliczy test pirogenowy (RPT), MAT wykrywa zarówno endotoksyny, jak i NEP.
- Rozszerzony zakres produktów, które mogą być testowane: najczęściej stosowane metody, RPT, Bacterial Endotoxin Test (BET) i LAL, są ograniczone pod względem typów produktów, z którymi mogą być stosowane. MAT oferuje większą elastyczność w zakresie jego zastosowań.
- Test in vitro, który naśladuje ludzką reakcję immunologiczną: dla solidnego modelu predykcyjnego, który zmniejsza zużycie zwierząt.
- Zgodność z międzynarodowymi przepisami i wytycznymi: zgodnie z etycznymi trendami przemysłu i organów regulacyjnych w celu zmniejszenia wykorzystania testów na zwierzętach.
- Kriokonserwowana krew pobrana od 8 dawców: aby jak najbardziej zbliżyć się do ludzkiej reakcji immunologicznej na pirogeny.
Zoptymalizuj lub uprość swoją metodę testowania pirogenów w celu łatwej walidacji i opłacalnego testowania dzięki naszej ofercie usług:
- Usługi aplikacyjne
- Usługi walidacyjne
- Usługi szkoleniowe
Porównanie testów pirogennych królika, LAL i MAT |
|---|
Brak zasobów do wdrożenia i walidacji MAT. Zrobimy to za Ciebie!
Studium wykonalności, opracowanie metody, walidacja i usługi szkoleniowe wspierające wdrożenie testów pirogenowych, omów z naszymi ekspertami ds. testów pirogenowych.
Powiązane zasoby dotyczące produktów
- Brochure: PyroMAT® and PyroDetect
Used to detect a broad range of pyrogens in parenteral products such as pharmaceuticals, biopharmaceuticals or medical devices, the MAT gives an in vitro alternative to conventional animal testing in accordance with regulatory guidelines.
- Article: Pyrogen Contamination Risk by Dr. Tim Sandle
Unlike the LAL test, the MAT is a powerful in vitro test for the detection of both endotoxin and non-endotoxin pyrogens (NEPs) acting via the toll-like receptors (TLRs) pathway.
- Data Sheet: Validation Method - PyroMAT® System
The Monocyte Activation Test (MAT) was introduced in the European Pharmacopeia (Chapter 2.6.30) in 2010, as a compendial method that can be used to replace the Rabbit Pyrogen Test (RPT).
- Infographic: MAT Implementation Workflow
Implementation of our Monocyte Activation Test (MAT), the PyroMAT® system.
- Poster: Pyrogen Detection in Pharma QC: Moving Away from the RPT
We have demonstrated that the MM6 cells are suitable for the detection of various NEPs targeting different monocytic toll-like receptors, making MM6 cell line-based MAT suitable for RPT replacement.
- Application Note: Detection of NEP by MAT Using the PyroMAT® System
The monocyte activation test (MAT) is the human in vitro alternative to the rabbit pyrogen test, and allows the detection of the full range of pyrogens, including endotoxins and non-endotoxin pyrogens (NEPs).
- Application Note: Detection of Pyrogens in Vaccines with PyroMAT® System
The PyroMAT™ System uses cryo-preserved Mono-Mac-6 (MM6) human monocytic cells as a source of monocytes. The response to pyrogenic substances is determined by measurement of Interleukin-6 (IL-6) produced by the MonoMac 6 cells.
- White Paper: MAT Statistical Analysis
The use of different sources of monocytes (blood vs cell line) leads to a different reactivity profile that requires the use of different regression models for each of these solutions.
- Questions & Answers about MAT. Dr. Tim Sandle Reponds
Risk considerations for the presence of pyrogens and the need for the MAT test in pharmaceutical processing.
- White Paper: Monocyte Activation Test
In this context, the in vitro pyrogen test based on human cells offers a valuable alternative to the rabbit pyrogen test.
- Application Note: Detection of Pyrogens in Hormone-based Drugs
For the quantification of the pyrogenic load of a sample, method A in accordance with the European Pharmacopeia can be conducted.
- Application Note: Detection of Pyrogens in FBS with PyroMAT® System
The response to pyrogenic substances is determined by measurement of Interleukin-6 (IL-6) produced by the Mono-Mac-6 cells. For this purpose, the ELISA-microplate supplied in the kit is coated with an antibody specific to IL-6.
Powiązane materiały wideo
Zaloguj się lub utwórz konto, aby kontynuować.
Nie masz konta użytkownika?