Albuminy i białka transportowe
Wiele cząsteczek jest niestabilnych lub nierozpuszczalnych, gdy występują w postaci niezłożonej. In vitro, albuminy i inne białka nośnikowe są często wykorzystywane do wiązania, sekwestracji i stabilizacji szeregu ważnych małych cząsteczek i białek. Albuminy są prostymi, rozpuszczalnymi w wodzie białkami występującymi w płynach i tkankach zwierzęcych oraz w mniejszym stopniu w roślinach. Albuminy są wykorzystywane w biomanufakturowaniu terapeutycznych przeciwciał monoklonalnych i rekombinowanych białek.
Dostarczamy albuminy do wszechstronnych zastosowań, w tym hodowli komórkowych, kwantyfikacji białek, stabilizacji enzymów, ELISA i procesów związanych z przeciwciałami. Wraz z albuminami pochodzącymi z różnych źródeł, oferujemy te niezbędne białka w różnych formatach i formułach.
Czytaj więcej o
Albuminy w hodowli komórkowej
Albuminy, w szczególności pochodzące z surowicy bydlęcej (BSA), są ważnym składnikiem wielu systemów hodowli komórkowej bez surowicy, w szczególności tych, które wykorzystują komórki hybrydoma lub komórki jajnika chomika chińskiego (CHO). W pożywkach do hodowli komórkowych albumina działa poprzez wiązanie i dostarczanie innych niezbędnych cząsteczek do komórek w hodowli. Ponieważ wszystkie albuminy nie mają identycznej skuteczności w pożywkach hodowlanych, zaleca się wybieranie tych, które zostały przetestowane pod kątem zastosowań w hodowlach komórkowych.
Albumina surowicy bydlęcej (BSA) jest białkiem kulistym (~66 kDa MW), które jest wykorzystywane w wielu zastosowaniach biochemicznych ze względu na jego stabilność i brak zakłóceń w reakcjach biologicznych. Struktura BSA to pojedynczy łańcuch polipeptydowy składający się z około 583 reszt aminokwasowych i nie zawierający węglowodanów. Dowiedz się więcej o strukturze białka BSA, masie cząsteczkowej BSA, właściwościach i zastosowaniach w naszym przewodniku po właściwościach fizycznych i zastosowaniach BSA.
BSA to klasyczny koń pociągowy wśród produktów albuminowych wykorzystywanych w wielu zastosowaniach. Nasze zróżnicowane formaty albuminy z surowicy bydlęcej obejmują czystość w zakresie 95-99%. Produkujemy i dystrybuujemy BSA oczyszczone różnymi podstawowymi metodami, w tym prawdziwą metodą frakcjonowania Cohna, zmodyfikowanymi metodami frakcjonowania etanolu, szokiem termicznym i chromatografią. Dodatkowe etapy oczyszczania mogą obejmować krystalizację lub filtrację węglową. Dla wygody nasze BSA są zdefiniowane według metody przygotowania:
- Chromatograficzne oczyszczanie albuminy zwykle daje bardziej konserwatywną natywną konformację białka niż metody frakcjonowania etanolu i szoku cieplnego.
- Metoda etanolu i szoku cieplnego łączy oba procesy, wykorzystując frakcjonowanie Cohna do przeprowadzenia wstępnego oczyszczania, a następnie etap ogrzewania w celu dalszego oczyszczenia albuminy do ≥ 99% za pomocą elektroforezy agarozowej.
- Frakcjonowanie etanolu jest metodą frakcjonowania, która obejmuje regulację stężenia etanolu, pH i temperatury. W przeciwieństwie do metody szoku termicznego, proces ten jest utrzymywany w niskiej temperaturze, zapewniając warunki niedenaturujące dla białek i zachowuje natywną strukturę i funkcję albuminy.
- Proces frakcjonowania szoku termicznego polegający na regulacji ciepła i pH polega na dodaniu stabilizatora białka. Dodatek ten pozwala albuminie tolerować podwyższoną temperaturę 65 °C. Większość innych białek osocza denaturuje i wytrąca się podczas tego procesu, dając albuminę o zwiększonej czystości.
Albumina surowicy ludzkiej (HSA)
Albumina surowicy ludzkiej (HSA) jest najobficiej występującym białkiem w ludzkim osoczu o masie cząsteczkowej ~66 kDa (w oparciu o skład aminokwasowy). Albumina surowicy może być określana jako frakcja V Cohna. Ta konwencja nazewnictwa pochodzi od oryginalnej metody Cohna frakcjonowania białek surowicy przy użyciu wytrącania zimnym etanolem, ponieważ albumina surowicy została znaleziona w piątej frakcji etanolu przy użyciu metody Cohna. Od tego czasu termin "Frakcja V Cohna" jest używany przez niektórych do opisania albuminy surowicy niezależnie od metody przygotowania. Produkujemy albuminy surowicy ludzkiej przy użyciu procesu frakcjonowania zimnego alkoholu pochodzącego z tradycyjnej metody Cohna, a także z metody szoku cieplnego i oferujemy zarówno natywne, jak i rekombinowane wersje HSA w postaci proszku i roztworu.
Inne produkty albuminowe
Nasze portfolio obejmuje dodatkowe produkty albuminowe do konkretnych zastosowań wymagających białek ludzkich i innych niż bydlęce. Rekombinowane albuminy ludzkie i albuminy wolne od składników zwierzęcych (ACF) są dostarczane w postaci buforów wodnych lub liofilizowanego proszku. Albuminy dostępne od innych gatunków obejmują te pochodzące z następujących źródeł:
- białko jaja kurzego
- surowica mysia
- surowica szczurza
- surowica wieprzowa
- surowica wołowa
Nasze albuminy mają wysoką czystość i doskonałą rozpuszczalność, aby zapewnić niskie tło w testach kwantyfikacji białek i zminimalizować zakłócenia w bioprocesach.
Transferyny i zamienniki transferyny
Komórki wymagają żelaza do wiązania dostępnego tlenu ze środowiska zewnątrzkomórkowego.Transferyny to jednołańcuchowe glikoproteiny występujące w surowicy, które ułatwiają wychwyt żelaza w pożywce hodowlanej i jego późniejszy transport wewnątrzkomórkowy.Chociaż transferryna jest fizjologicznie optymalną metodą dostarczania żelaza do komórek w hodowli, a zatem jest integralną częścią produkcji biofarmaceutyków, takich jak przeciwciała monoklonalne, systemy wolne od ryzyka dla zwierząt doprowadziły do przyjęcia małocząsteczkowych alternatyw dla transferryny w biomanufacturingu. Wiele z tych alternatywnych transferyn to chelatory żelaza, które muszą być stosowane z odpowiednimi protokołami w systemach hodowlanych, ponieważ wiele z nich nie zarządza cyklem redoks żelaza i dlatego może przyczyniać się do stresu oksydacyjnego. Nasze odczynniki do hodowli komórkowych obejmują pełny wybór transferyn i zamienników transferyn.
Powiązane zasoby
- Albumin in Cell Culture
This page segues to comprehensive insights on how serum albumin and other important cell culture components affect the performance of serum-free cell culture systems used for biomanufacturing heterologous proteins including monoclonal antibodies. The page introduces the in vitro chemistry and biochemistry of albumin. These insights may also be applied to ex vivo and tissue engineering applications.
Zaloguj się lub utwórz konto, aby kontynuować.
Nie masz konta użytkownika?