MAB377

Anticorpo anti-NeuN, clone A60

clone A60, Chemicon^®, from mouse

• Sinônimo(s): Neuron-Specific Nuclear Protein, Neuna60, A60
• Código UNSPSC: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.41

Propriedades

• fonte biológica: mouse
• Nível de qualidade: 100
• forma do anticorpo: purified immunoglobulin
• tipo de produto de anticorpo: primary antibodies
• clone: A60, monoclonal
• reatividade de espécies: avian, pig, chicken, human, rat, salamander, ferret, mouse
• fabricante/nome comercial: Chemicon^®
• técnica(s): flow cytometry: suitable; immunocytochemistry: suitable; immunofluorescence: suitable; immunohistochemistry (formalin-fixed, paraffin-embedded sections): suitable; immunoprecipitation (IP): suitable; western blot: suitable
• Isotipo: IgG1
• Condições de expedição: wet ice
• modificação pós-traducional do alvo: unmodified
• Informações sobre genes: human ... RBFOX3(146713) ; mouse ... Rbfox3(52897) ; rat ... Rbfox3(287847)

Descrição

Descrição geral

O anticorpo NeuN (núcleos NEUronais; clone A60) reconhece especificamente a proteína NeuN que se liga ao DNA, específica para neurônios, que está presente na maioria dos tipos celulares neuronais do SNC e SNP de todos os vertebrados testados. As distribuições da proteína NeuN estão aparentemente restritas aos núcleos neuronais, pericários e alguns processos neuronais proximais no cérebro de fetos e adultos, embora alguns neurônios não sejam reconhecidos pela NeuN em todas as idades: alguns exemplos incluem as células retinianas da camada nuclear interna da retina, células de Cajal-Retzius, células de Purkinje, neurônios do núcleo olivário inferior e dentado e células ganglionares simpáticas (Mullen et al., 1992; Wolf et al., 1996). A proteína NeuN, detectada de forma imuno-histoquímica, aparece pela primeira vez nos momentos do desenvolvimento que correspondem à retirada do neurônio do ciclo celular e/ou com o início da diferenciação terminal do neurônio (Mullen et al., 1992). A imunorreatividade surge por volta de E9.5 no tubo neuronal de camundongos e é ampla em todo o sistema nervoso em desenvolvimento até E12.5. A coloração nuclear forte indica uma função de proteína reguladora nuclear. Contudo, não há evidência atualmente sobre se o antígeno da proteína NeuN tem uma função no citoplasma distal ou se é simplesmente sintetizada lá antes de ser transportada de volta para o núcleo. Não foi encontrada diferença entre proteínas isoladas dos núcleos purificados e de extrato de cérebro total em imunoblots (Mullen et al., 1992).

Especificidade

O anticorpo monoclonal exclusivo da MILLIPORE para a proteína nuclear de vertebrados chamada NeuN (ou núcleos neuronais) reage com a maioria dos tipos celulares neuronais em todo o sistema nervoso de camundongos, inclusive cerebelo, córtex cerebral, hipocampo, tálamo, coluna vertebral e neurônios do sistema nervoso periférico, incluindo gânglios da raiz dorsal, gânglios da cadeia simpática e gânglios entéricos. Do ponto de vista de desenvolvimento, a imunorreatividade é observada pela primeira vez logo depois de os neurônios terem se tornado pós-mitóticos. Não foi observada coloração em zonas proliferativas. A coloração imunohistoquímica está localizada principalmente no núcleo dos neurônios com coloração mais clara no citoplasma. Os poucos tipos celulares que não reagem com MAB377 incluem células de Purkinje, mitrais e fotorreceptoras. O anticorpo é um excelente marcador para neurônios em culturas primárias e em células P19 estimuladas com ácido retinoico. É útil também para identificar neurônios em transplantes.

Imunogênio

Núcleos de células purificados de cérebro de camundongo

Aplicação

Anticorpo anti-NeuN, o clone A60 detecta o nível de NeuN e foi publicado e validado para uso em FC, IC, IF, IH, IH(P), IP e WB.

Análise de Western blot:
um lote anterior deste anticorpo reconheceu 2-3 bandas no intervalo de 46-48 kDa e, possivelmente, outra banda em cerca de 66 kDa.

Imunocitoquímica:
Usou-se diluição de 1:10-1:100 de um lote anterior. Neurônios em cultura devem ser permeabilizados com 0,1% de triton X-100. Todas as diluições de anticorpo primário devem ser realizadas com soluções simples contendo apenas tampão e anticorpo primário sem bloqueadores proteicos ou detergentes em excesso.

Imunohistoquímica:
1:100-1:1.000. O anticorpo funciona melhora em tecido embebido em cera de poliéster, mas funciona também em tecido embebido em parafina em uma diluição de trabalho menor. O anticorpo funciona bem com fixadores à base de formaldeído. Usou-se tratamento com ácido cítrico e micro-ondas com sucesso (Sarnat, 1998).

Análise imunohistoquímica (parafina): Um lote anterior foi usado para IH(P).

As diluições de trabalho ideais devem ser determinadas pelo usuário final.

Categoria de pesquisa
Neurociência

Subcategoria de pesquisa
Marcadores neuronais e gliais

Qualidade

Avaliado rotineiramente por imunohistoquímica de tecido cerebral.

Análise imunohistoquímica (parafina):
padrão de coloração/morfologia NeuN (cat. N.º MAB377) em cerebelo de rato. Tecido pré-tratado com citrato, pH 6,0. Este lote de anticorpos foi diluído na proporção 1:100, usando Detecção IHC-Select com HRP-DAB. A imunorreatividade é observada como coloração nuclear nos neurônios na camada granular. Observe que não há sinal detectado no núcleo das células de Purkinje.
Coloração ideal com tampão citrato, pH 6,0, Recuperação de epítopos: cerebelo de rato

Descrição-alvo

46/48 kDa

forma física

Formato: Purificada

Imuniglobulina IgG1 de camundongo purificada líquida, em tampão contendo 0,02 M de tampão fosfato, 0,25 M de NaCl, pH 7,6 com 0,1% de azida sódica.

Proteína A purificada

Armazenamento e estabilidade

Estável por 6 meses a 2-8 ºC a partir da data de recebimento.

Nota de análise

Controle
Controle positivo - Tecido cerebral. Controle negativo - qualquer tecido neuronal, p. ex., fibroblastos

Outras notas

Vencedor do Prêmio CiteAb 2024 para Fornecedor de Sucesso em Pesquisa sobre Parkinson′

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