mPAGE^® Lux Casting System dla żeli SDS-PAGE

Odkryj system odlewania mPAGE^® Lux Casting System dla gotowych do użycia żeli SDS-PAGE w 3 minuty. Świeże żele SDS-PAGE, które są gotowe, gdy ich potrzebujesz. Jeśli masz pytania i chcesz dowiedzieć się więcej na temat szybszego odlewania, kliknij tutaj, aby wypełnić formularz, a nasz zespół skontaktuje się z Tobą.

mPAGE^® Lux System odlewania żeli SDS-PAGE

Jak odlewać żel do SDS-PAGE? Odlewanie żeli zazwyczaj polega na wylewaniu żeli rozdzielczych i układaniu ich w stosy w czasochłonnym, stopniowym procesie. Naukowcy tradycyjnie mają niewiele opcji, aby zaspokoić swoje potrzeby w zakresie odlewania żeli i elektroforezy. Nasz innowacyjny system odlewania żeli mPAGE^® Lux SDS-PAGE został zaprojektowany w celu zapewnienia elastyczności żeli odlewanych ręcznie i niezawodności żeli prefabrykowanych, bez utraty jakości, czasu lub znacznie wyższych kosztów, które towarzyszą alternatywnym opcjom. Żele w mniej niż trzy minuty dzięki naszemu systemowi mPAGE^® Lux Casting System. Możesz pożegnać się z konwencjonalnymi metodami i ich czasochłonnymi, ręcznymi etapami tworzenia żelu. To jest świeże.

Czytaj więcej

• mPAGE^®&Lux Casting System Features and Benefits
• Jakie są etapy odlewania żelowego?
• mPAGE^® Lux Casting System and Bis-Tris Reagent Kit
• mPAGE^® Lux SDS-PAGE Gel Cast Protocol
• Sustainable gel casting with mPAGE^® Lux Casting System
• Zamów mPAGE^® Lux Casting System i powiązane odczynniki

mPAGE^® Lux Cechy i zalety systemu odlewniczego

mPAGE^® Lux Casting System zastępuje proces odlewania żelowego szybszymi, prostszymi i bezpieczniejszymi metodami z bardziej powtarzalnymi wynikami. System odlewania mPAGE^® Lux umożliwia utwardzenie mini żelu w 90 sekund w porównaniu z konwencjonalnymi metodami trwającymi ponad 90 minut. Nasz szybki proces odlewania z naświetlaniem UV przyspiesza utwardzanie odczynników mPAGE^® Lux Bis-Tris, podczas gdy chemia żelu Bis-Tris pozwala na krótsze czasy pracy w porównaniu z konwencjonalnymi metodami.

Jednoetapowa fotopolimeryzacja z wykorzystaniem precyzyjnej kontroli systemu wraz z mniejszą liczbą etapów przygotowania oznacza mniejsze ryzyko błędu. Nasz system mPAGE^® Caster zapobiega wyciekom, a zastosowanie żeli Bis-Tris zapewnia lepszą jakość pasm w porównaniu do ręcznie odlewanych żeli Tris-Glycine. Dodatkowo, zestawy odczynników mPAGE^® Lux Reagent Kit, mPAGE^® TurboMix Reagent Kit i prefabrykowane żele mPAGE^® wykorzystują chemię Bis-Tris i mają te same bufory robocze i barwniki do żeli. Nasz system mPAGE^® Lux Casting System nie wykorzystuje APS ani TEMED i oferuje bezpieczniejszą opcję przy użyciu mniejszej ilości toksycznych chemikaliów.

Tradycyjny przepływ pracy odlewania ręcznego

Rysunek 1. Infografika przedstawiająca tradycyjny proces ręcznego odlewania żeli SDS-PAGE z wydłużonymi etapami i czasem polimeryzacji wynoszącym 90 minut lub więcej.

mPAGE^®Lux Workflow

Rysunek 2. Tradycyjne odlewanie żeli a przepływ pracy mPAGE^® Lux. System mPAGE^® Lux Casting charakteryzuje się mniejszą liczbą etapów, krótszym czasem polimeryzacji i mniejszą ilością toksycznych odpadów w porównaniu z tradycyjną technologią odlewania żeli. Żele utworzone za pomocą systemu mPAGE^® Lux Casting System są kompatybilne z urządzeniem mPAGE^® Mini-gel Tank i kuwetami Bio-Rad Mini-PROTEAN Cells. Aby uzyskać wyjątkową rozdzielczość i skrócić czas pracy, użyj naszych buforów mPAGE^®. Żele Lux są kompatybilne z buforami Bis-Tris i odczynnikami do barwienia.

Jakie są etapy odlewania żelu?

Odlewanie żelu SDS-PAGE często obejmuje ważenie, wstępne mieszanie roztworów żelowych, odlewanie i czas oczekiwania na polimeryzację. Konwencjonalne metody ręcznego odlewania żeli, choć często wymieniane jako bardziej ekonomiczne rozwiązanie, są czasochłonne i wymagają wielu praktycznych czynności, które mogą skutkować niespójnymi formułami żeli. Jakość ręcznie odlewanych żeli i dane, które mogą pomóc wygenerować, zależą od spójności formuły, dzięki czemu cenne odczynniki i czas nie są ostatecznie marnowane z powodu awarii żelu.

Rysunek 3. Porównanie jakości danych z żelu mPAGE^® Lux Bis-Tris i ręcznie odlewanego żelu tris-glicynowego. Jakość pasm w żelu mPAGE^® Lux Bis-Tris (po lewej) w porównaniu z ręcznie odlewanym żelem tris-glicynowym (po prawej). Oba żele zawierają 10% akrylamidu i są obciążone miareczkowaniem lizatu ludzkich komórek A431. Czas trwania elektroforezy wynosi 42 minuty przy 200 V (żel Lux) i 119 minut przy 120 V (żel tris-glicyny). Żele są barwione barwnikiem ReadyBlue™ Coomassie.

System odlewania żelowego mPAGE^® Lux oferuje innowacyjne rozwiązanie dla procesu odlewania żelowego. Nie musisz już wybierać między oszczędnością czasu i zasobów. Nasz nowatorski system odlewania żeli pozwala badaczom na łatwe odlewanie żeli szybko, kiedy ich potrzebują, za ułamek kosztów prefabrykowanych technologii żelowych. Zwiększ wydajność swojego laboratorium i usprawnij proces elektroforezy żelowej dzięki systemowi odlewania żeli mPAGE^® Lux.

Rysunek 4. Western blotting w celu porównania mokrych, szybkich i półsuchych metod transferu. Porównania przeprowadzono przy użyciu 12% żeli mPAGE^® Lux Bis-Tris, które zostały poddane miareczkowaniu lizatu ludzkich komórek A431 oraz różnym metodom transferu na membrany Immobilon^®-P. Membrany poddano blottingowi z przeciwciałami anty-EGFR i anty-ErK1/2, a następnie wykryto za pomocą substratu Immobilon^® ECL Ultra Western HRP. Metoda Turbo = transfer przy użyciu Bio-Rad Trans-Blot^® Turbo™ Transfer System i Trans-Blot^® Turbo™ Transfer Packs.

Rysunek 5: Odtwarzalność żeli mPAGE^® Lux Bis-Tris. A.B. Względna odległość migracji (Rf) dla niewybarwionego markera masy cząsteczkowej została obliczona dla każdego żelu. Odchylenie standardowe jest pokazane dla każdego pasma białka.

Rysunek 6. Analiza okresu trwałości odczynników mPAGE^® Lux Bis-Tris. Żele mPAGE^® Lux Bis-Tris odlewane przy użyciu odczynników (A) 0 miesięcy, (B) 6 miesięcy lub (C) 12 miesięcy. Nie zaobserwowano różnicy we wzorze pracy lub czasie pracy.

mPAGE^® Lux Casting System i zestawy odczynników Bis-Tris

Dodaj mPAGE^® Lux Casting System do swojego laboratorium i uzyskaj gotowe do użycia żele w mniej niż 3 minuty. Odetchnij i przyzwyczaj się do szybkiego procesu odlewania żeli z mniejszą ilością odpadów i bez obawy o niepowodzenie. To jest świeże. Nasze zestawy mPAGE^® Lux Casting System składają się ze stacji do utwardzania mPAGE^® Lux, rurki do mieszania mPAGE^® Lux, pojemnika na żele mPAGE^® Lux. Gel Caster, mPAGE^® Comb z 10 dołkami i 15 dołkami, mPAGE^® Mini Spacer Plate, mPAGE^® Lux Masked Short Plates z 10 dołkami i 15 dołkami. W przypadku systemu mPAGE^® Lux Casting o grubości 0,75 mm, grzebień z 15 dołkami i maskowane krótkie płytki nie są dołączone. Opisy i konfiguracje zestawów są następujące:

*Dostępne z wtyczką NEMA 5-15P (YP12), CEE 7/7 (YP22), typu G (YP61), YP18 lub typu I (YP03).

Opis zestawu	Przedmioty/ilości	Zawarte nr części	Nr katalogowy zestawu.
mPAGE® Lux Casting System, 1 mm*	mPAGE® Lux Curing Station (1)® Lux Mixing Tube (5) mPAGE® Gel Caster (2) mPAGE® Comb 1.0 mm, 10 dołków (5) mPAGE® Grzebień 1,0 mm, 15 dołków (5) mPAGE® Płytka dystansowa 1.0 mm (5) mPAGE® Lux Masked Short Plates 10-combs (5) mPAGE® Lux Masked Short Plates 15-combs (5)	.LUXGCS LUXMIXTB GCR2 C1M10W C1M15W MSPA10 LUXSHRTP10W LUXSHRTP15W	LUXCSYS-1M
mPAGE® Lux Casting System, 0.75 mm*	mPAGE® Lux Curing Station (1) mPAGE® Lux Mixing Tube (5) mPAGE® Gel Caster (2) mPAGE® Comb 0.75 mm, 10 dołków (5) mPAGE® Płytka dystansowa 0.75 mm (5) mPAGE® Lux Masked Short Plates 10-combs (5)	LUXGCS LUXMIXTB GCR2 C75M10W MSPA75 LUXSHRTP10W	LUXCSYS-75M
mPAGE® Lux Casting System, 1.5 mm*	mPAGE® Lux Curing Station (1) mPAGE® Lux Mixing Tube (5) mPAGE® Gel Caster (2) mPAGE® Comb 1. 5 mm, 10 dołków (5) mPAGE® Grzebień 1,5 mm, 15 dołków (5) mPAGE® Płytka dystansowa 1.5 mm (5) mPAGE® Lux Masked Short Plates 10-combs (5) mPAGE® Lux Masked Short Plates 15-combs (5)	LUXGCS LUXMIXTB GCR2 C15M10W C15M15W MSPA15 LUXSHRTP10W LUXSHRTP15W	LUXCSYS-15M

Rysunek 7. Stacja utwardzania mPAGE^® Lux

Zestaw odczynników mPAGE^® Lux Bis-Tris Reagent Kit to dedykowany zestaw odczynników do systemu mPAGE^® Lux Casting System. Zestaw odczynników mPAGE^® Lux Bis-Tris Reagent Kit składa się z 3 składników: roztworu rozpuszczającego, rozcieńczalnika i roztworu do układania. Zestaw obsługuje różne żele akrylamidowe w zakresie 8,0-13,5%. mPAGE^® Lux Reagent Kit opis i konfiguracja są następujące:

Opis zestawu	Pozycje/ilości	Numer katalogowy zestawu
mPAGE® Lux Bis-Tris Reagent Kit
mPAGE® Lux Bis-Tris Reagent Kit	mPAGE® Lux Bis-Tris Resolving Solution (1)® Lux Bis-Tris Stacking Solution (1) mPAGE® Lux Bis-Tris Diluent (1)	LUXRGTRES LUXRGTSTK LUXRGTDIL	LUXRGTKIT

 mPAGE^® Lux SDS-PAGE Gel Cast Protocol

Wszystkie roztwory muszą być chronione przed światłem słonecznym, aby zapobiec polimeryzacji. Przed odlewaniem żeli należy doprowadzić wszystkie roztwory do temperatury pokojowej.

Resolving Gel

1. Przygotować roztwór Resolving Gel mieszając Resolving Solution i Diluent. Objętości mieszania podano w poniższej tabeli. Roztwór żelu rozpuszczającego można przygotować w dużej partii, aby wykonać kilka żeli sekwencyjnie.
2. Używając czystej pipety, dodaj roztwór rozpuszczający do czarnej probówki mieszającej lub innego nieprzezroczystego pojemnika.
3. Używając czystej pipety, dodaj rozcieńczalnik do tej samej probówki mieszającej.
4. Mieszaj delikatnie obracając pojemnik od końca do końca. Nie worteksuj.

Objętości roztworu żelu rozpuszczającego

Użyj poniższych objętości do wykonania pojedynczego żelu 1,0 mm. Objętości roztworów 0,75 mm i 1,5 mm można znaleźć w pełnej instrukcji obsługi dostępnej na stronie produktu w witrynie SigmaAldrich.com.

.

Procent żelu	Roztwór rozpuszczający		Diluent		Total Volume
8%	2 mL<	+	3 mL	=	5 mL
10%	2.5 ml	+	2.5 ml	=	5 mL
12%	3 mL	+	2 mL	=	5 mL
13.5%	3.3 ml	+	1.7 ml	=	5 mL

Żel do układania

Roztwór do układania jest gotowy do użycia bezpośrednio z butelki. Użyj 1,5 ml Stacking Solution dla żelu 1,0 mm. Ważne: Nie rozcieńczać Stacking Solution.

Gel Casting

1. Wyczyść szklane płytki łagodnym detergentem i spłucz wodą DI. Przed użyciem przetrzeć 70% etanolem.
2. Złożyć mPAGE^® Gel Caster używając mPAGE^® Spacer Plate i mPAGE^® Lux Masked Short Plate, aby utworzyć szklaną kasetę. Krótka płytka maskująca powinna być zorientowana z tekstem po lewej stronie kasety. Upewnij się, że obie szklane płytki są wyrównane na dole ramy kółka przed zamknięciem zacisków kółka. Uwaga: Krótka płytka maskująca mPAGE^® Lux musi być używana ze stacją utwardzania mPAGE^®.
3. Włącz zasilanie stacji utwardzania mPAGE^® Lux, naciskając przycisk zasilania. Stacja utwardzania rozpocznie autotest. Po zakończeniu autotestu pojawi się ekran gotowości.
4. Otwórz drzwiczki i umieść kółko z żelem w stacji utwardzania, wyrównując kółko za zderzakami.
5. Używając czystej pipety 5 ml, dodaj przygotowany roztwór żelu rozpuszczającego do wskazanej linii napełniania na ramie kółka z żelem mPAGE^®.
6. Używając czystej pipety 5 ml, powoli dodaj Stacking Solution do górnej części krótkiej płytki.
7. Powoli włóż grzebień mPAGE^® pod kątem, aby zapobiec tworzeniu się pęcherzyków powietrza pod zębami. Ważne: Mieszanie różnych formatów dołków może spowodować ich nieprawidłowe uformowanie. Użyj:
   • 10-dołkowe grzebienie z 10-dołkowymi płytkami mPAGE^® Lux Masked Short Plates
   • 15-dołkowe grzebienie z 15-dołkowymi płytkami mPAGE^® Lux Masked Short Plates
8. Zetrzyj rozlany roztwór z przodu krótkiej płytki, aby zapobiec niepełnemu utwardzeniu w miejscu rozlania.
9. Zamknij drzwi stacji utwardzania i wybierz grubość żelu.
10. Naciśnij Start, aby rozpocząć utwardzanie żelu. Wskazówka: Jeśli odlewasz wiele żeli, rozpocznij proces odlewania żelu za pomocą drugiego Gel Caster, podczas gdy pierwszy żel jest utwardzany.
11. Po zakończeniu utwardzania otwórz drzwiczki i wyjmij Gel Caster. Wyjmij kasetę z kółka na żel, opuszczając zacisk napinający, aby zwolnić ramę kółka. Następnie otwórz boki ramy i wysuń kasetę z góry.
12. Użyj żelu natychmiast lub zawiń kasetę w mokry ręcznik papierowy i przechowuj leżącą płasko w torbie z zamkiem błyskawicznym lub innym hermetycznym pojemniku w temperaturze 2-8 ° C przez okres do 2 tygodni. Nie pozostawiaj kaset bez opakowania, ponieważ żel wyschnie.

Jak usunąć żel po elektroforezie

Usuń żel ze szklanej kasety za pomocą skrobaka do żelu. Przeciąć wzdłuż krawędzi żelu (po prawej), aby uniknąć rozerwania żelu. Żele mPAGE^® Lux Bis-Tris powinny być używane WYŁĄCZNIE z buforem roboczym MOPS-SDS lub MES-SDS. Żele Bis-Tris NIE są kompatybilne z buforem roboczym Tris-Glicyna.

Zrównoważone odlewanie żeli z m PAGE^® Lux Gel Casting System

Aby określić ilościowo zrównoważony wpływ naszego systemu mPAGE^® Lux Casting System, przeprowadzono obliczenia w porównaniu z użyciem reprezentatywnego zestawu do szybkiego odlewania do ręcznego odlewania żeli poliakryloamidowych do elektroforezy białek. Oba systemy wymagają użycia zestawów do odlewania wielokrotnego użytku i zestawów odczynników do odlewania ręcznego. System odlewania mPAGE^® Lux wymaga dodatkowo użycia stacji do utwardzania żeli mPAGE^® Lux, podczas gdy system podstawowy wymaga użycia APS & TEMED, które są sprzedawane oddzielnie od zestawu odczynników do odlewania ręcznego.

W niniejszej ocenie uwzględniono wszystkie komponenty wymagane do odlewania żeli do elektroforezy przez minimalny okres użytkowania stacji do utwardzania żeli mPAGE^® Lux, który wynosi 5 lat. Obejmuje to wpływ produkcji, pakowania, dystrybucji, użytkowania i wycofania z eksploatacji zestawu do ręcznego odlewania, niezbędnych odczynników i wszystkich wymaganych materiałów eksploatacyjnych. Obliczenia przeprowadzono przy założeniu produkcji 250, 500 lub 1000 żeli rocznie i określono minimalną różnicę w stosunku do systemu podstawowego.

Atrybuty zrównoważonego rozwoju materiałów i produktów

Chociaż jest to innowacyjne rozwiązanie do ręcznego odlewania żeli poliakryloamidowych, system odlewania mPAGE^® Lux nadal wymaga pewnego zużycia plastikowych materiałów eksploatacyjnych i niebezpiecznych odczynników. Chociaż w tym zastosowaniu nie istnieje odpowiedni zamiennik akrylamidu, wszystkie pozostałe zagrożenia chemiczne zostały wyeliminowane z tego systemu, a ilość wymaganych plastikowych materiałów eksploatacyjnych jest znacznie zmniejszona w porównaniu z systemem podstawowym.

Dodatkowa masa stacji utwardzania żelu wymagana przez system odlewania mPAGE^® Lux jest równoważona przez redukcję produktów wymaganych w procesie odlewania żelu, jak pokazano na wykresie. W całym okresie eksploatacji urządzenia, całkowita masa systemu jest zmniejszona o co najmniej 20% w porównaniu do systemów szybkiego odlewania.

Masa systemu w całym okresie eksploatacji (kg) przy odlewaniu 500 żeli/rok:

Rysunek 5. Porównanie masy systemu w całym okresie eksploatacji (kg) przy odlewaniu 500 żeli/rok dla systemu mPAGE^® Lux Casting i systemu produktu referencyjnego. Ciemnoniebieski = system produktu referencyjnego. Jasnoniebieski = system odlewania mPAGE^® Lux.

Dodatkowo produkt ten jest zgodny z zasadami SMASH Packaging, naszej strategii, która napędza poprawę zrównoważonego rozwoju opakowań poprzez mniejszą liczbę opakowań, bardziej zrównoważone materiały i łatwiejszy recykling.

• Opakowania produktów i dodatkowych elementów wymaganych dla jednostki funkcjonalnej są zmniejszone o 30% w stosunku do systemu podstawowego.
• 100% opakowań systemowych na bazie włókien posiada certyfikat zrównoważonego leśnictwa.
• Wszystkie piankowe wkładki ochronne wykonane są w 100% z polietylenu pochodzącego z recyklingu.
• Opakowania nie zawierają żadnych materiałów, które utrudniałyby recykling zgodnie z naszymi wytycznymi SMASH.

mPAGE^® Lux Casting System Dystrybucja i wykorzystanie produktu

Redukcja wymaganych materiałów eksploatacyjnych i eliminacja niektórych odczynników skutkuje znacznym zmniejszeniem wpływu związanego z wysyłką. Redukcja masy regularnie wysyłanych komponentów i związanych z nimi opakowań wynosi co najmniej 24% w minimalnym okresie eksploatacji urządzenia.

Tabela 1. Całkowite oszczędności masy w ciągu 5 lat dla systemu mPAGE^® Lux.

Masa oszczędności w ciągu 5 lat
Żele/rok	Odczynniki	Oprzyrządowanie laboratoryjne
250	4.7 kg	12.8 kg
500	8.4 kg	12.8 kg
1000	16.1 kg	22.1 kg

Chociaż dodatkowe urządzenie wymaga energii podczas pracy, mPAGE^® Lux Casting Station została zaprojektowana z myślą o efektywności energetycznej. Dzięki zastosowaniu oświetlenia LED i prostego, ale intuicyjnego interfejsu użytkownika, ogólne zużycie energii pozostaje niezwykle niskie. Łączne zużycie energii wymagane do utwardzenia 1000 żeli wynosi zaledwie 1,65 kWh, co odpowiada około 33 godzinom korzystania z laptopa. Ilość jednorazowych odpadów z tworzyw sztucznych generowanych podczas procesu odlewania żeli jest zmniejszona o co najmniej 25%. Ponadto odczynniki mPAGE^® Lux ulegają samopolimeryzacji pod wpływem oświetlenia otoczenia, eliminując niespolimeryzowane pozostałości akryloamidu w strumieniach odpadów.

Odlewając świeże, gotowe do użycia żele w razie potrzeby, eliminuje się ryzyko wstępnego przygotowania żeli, które pozostaną niewykorzystane. System mPAGE^® Lux eliminuje potrzebę przechowywania zestawów odczynników lub wstępnie odlanych żeli w różnych procentach, co zmniejsza ilość odpadów generowanych z powodu wygaśnięcia składników. Stacja utwardzania mPAGE^® Lux jest urządzeniem elektronicznym i jako takie musi być utylizowane zgodnie z obowiązującymi przepisami. Aby uzyskać więcej informacji na temat utylizacji odpadów elektronicznych, odwiedź naszą stronę Zgodność zEEE.

Ten produkt wykazał znaczące ulepszenia w stosunku do systemu bazowego w całym cyklu życia produktu i został oznaczony jako bardziej ekologiczny produkt alternatywny. Aby uzyskać więcej informacji, odwiedź naszą stronę na temat naszych ram projektowania dla zrównoważonego rozwoju i naszych bardziej ekologicznych produktów alternatywnych.