Barwniki do elektroforezy białek w żelu

Roztwory utrwalające

Po elektroforezie żelowej, białka są zazwyczaj "utrwalane" w żelu, aby zapobiec rozproszeniu białek przed barwieniem. Niektóre barwniki żelowe zawierają substancje chemiczne, które eliminują potrzebę utrwalania żeli przed barwieniem.

Colorimetric Protein Gel Stains

• Błękit brylantowy Coomassie jest używany do barwienia białek na żelach poliakrylamidowych poprzez elektrostatyczne interakcje z grupami aminowymi i karboksylowymi białek.
• ReadyBlue™ Protein Gel Stain to szybki i czuły koloidalny barwnik Coomassie do żeli poliakrylamidowych dostarczany jako gotowy do użycia roztwór, pozwalający na szybsze i uproszczone procedury. ReadyBlue™ może być obrazowany za pomocą metod kolorymetrycznych lub fluorescencji w podczerwieni.  Ten bezpieczny preparat nie zawiera rozpuszczalników organicznych ani kwasu fosforowego i może być ponownie użyty do 3 razy. Czułość do 2 ng na pasmo została wykazana za pomocą ReadyBlue™.
• EZBlue™ Gel Staining Reagent to wygodny, czuły i bezpieczny koloidalny barwnik białkowy Coomassie Brilliant Blue G-250, który poprawia wyniki elektroforezy białek, jednocześnie znacznie skracając czas barwienia. Jako barwnik koloidalny reaguje tylko z białkami, a nie z samym żelem. Barwienie tła jest zredukowane, więc pasma białek mogą być wizualizowane niemal natychmiast na żelach poliakrylamidowych i membranach PVDF. Nie jest wymagany etap odbarwiania, chociaż płukanie wodą może zintensyfikować pasma i wyjaśnić tło. Odczynnik EZBlue™ jest niezwykle czuły, wykrywa zaledwie 5 ng białka.
• Zestaw do odwracalnego wykrywania białek to unikalny system detekcji przeznaczony do barwienia białek na nylonowych, nitrocelulozowych i PVDF membranach lub żelach PAGE z czułością wykrywania podobną do czułości barwników Coomassie. Większość innych barwników wytwarza wysokie tło na membranach nylonowych z powodu silnych interakcji ładunku z membraną. Barwienie jest łatwo odwracalne za pomocą roztworu EDTA, dzięki czemu blot może być ponownie użyty do Western blotting lub do analizy sekwencji aminokwasów.
• Błękitno-czarny barwnik Naphthol może być stosowany do barwienia białek na żelach poliakrylamidowych, żelach agarozowych i membranach nitrocelulozowych. Po elektroforezie zaleca się utrwalenie białek w żelu. Żel jest następnie barwiony 0,1% błękitem naftolem w 7% (v/v) kwasie octowym przez co najmniej 2 godziny i odbarwiany roztworem 7% (v/v) kwasu octowego. Czułość wykrywania wynosi około 20% czułości Coomassie Blue
• Zapewniając najwyższą czułość, ProteoSilver™ Silver Stain Kit ma czułość ≥0,1 ng białka na pasmo z czasem inkubacji 3-12 minut. Barwnik ten jest zalecany dla białek o bardzo niskiej obfitości i jest kompatybilny z aplikacjami MALDI-TOF.

Barwniki fluorescencyjne do żelu białkowego

• EZFluor™ 1-step Fluorescent Protein Gel Stain to gotowy do użycia fluorescencyjny barwnik białkowy do żelu, wymagający tylko jednego etapu barwienia trwającego od 5 do 30 minut bez utrwalania i umożliwiający wykrycie zaledwie około 1-10 ng białka na pasmo. Barwienie jest w pełni kompatybilne ze spektrometrią mas i sekwencjonowaniem opartym na metodzie Edmana.
• EZFluor™ UV 1-step Fluorescent Protein Gel Stain jest gotowym do użycia barwnikiem białkowym przeznaczonym do obrazowania przy użyciu transiluminatora UV i filtra bromku etydyny kompatybilnego ze spektrometrią mas.
• SYPRO^® Ruby protein gel stain to gotowy do użycia, ultraczuły, fluorescencyjny barwnik do wykrywania białek rozdzielonych za pomocą elektroforezy w żelu poliakrylamidowym (PAGE). Barwnik ten, zaprojektowany specjalnie do stosowania w 2-D PAGE, okazał się również doskonałym wyborem dla 1-D PAGE i izoelektrycznego ogniskowania (IEF) żeli. Barwnik białkowy SYPRO^® Ruby osiąga czułość porównywalną z wieloma technikami barwienia srebrem.
• SYPRO^® Orange jest podobny do SYPRO^® Red, chociaż jest nieco jaśniejszy i daje nieco wyższą fluorescencję tła. Barwnik jest skutecznie wzbudzany przez promieniowanie UV lub oświetlenie szerokopasmowe. Nie nadaje się do barwienia białek na blotach lub w żelach IEF i wykazuje zmniejszoną czułość podczas barwienia białek na żelach 2-D.

Odczynniki do odbarwiania

• CoZap jest używany do szybkiego usuwania niebieskiego barwnika Coomasie. Unikalna wkładka CoZap jest umieszczana bezpośrednio w tacce odbarwiającej i pochłania cały wolny barwnik w roztworze, eliminując potrzebę zmiany roztworu odbarwiającego.