System szybkich testów mikrobiologicznych HybriScan^®

Rutynowa kontrola zanieczyszczenia mikrobiologicznego w produkcji żywności, od surowców po gotowe produkty, konwencjonalne standardowe metody oparte na hodowli są czasochłonne i często wymagają od 2 do 15 dni na uzyskanie wyników. Nasze testy HybriScan^® zapewniają szybkie i dokładne wykrywanie molekularne organizmów powodujących psucie się żywności i patogenów, bez konieczności stosowania drogich metod PCR. Molekularny system przesiewowy HybriScan^® jest odpowiedni do kontroli bezpieczeństwa i jakości napojów, wody i żywności.

• Szybka metoda mikrobiologiczna: Hybrydyzacja kanapkowa
• Czułość, specyficzność i elastyczność hybrydyzacji kanapkowej
• Zalety technologii HybriScan^® w porównaniu z innymi technikami wykrywania drobnoustrojów
• Kalkulator liczby bakterii w ściekach HybriScan^®
• HybriScan^®D (Detection) Kits
• HybriScan^®I (Identification) Kits

Szybka metoda mikrobiologiczna: Hybrydyzacja kanapkowa

System HybriScan^® opiera się na wykrywaniu specyficznego dla mikroorganizmów rRNA przy użyciu hybrydyzacji kanapkowej. Metoda ta wymaga jedynie wirówki, mieszalnika termicznego i opcjonalnego czytnika mikropłytek. Pełną analizę można przeprowadzić w ciągu 2 godzin w przypadku zestawu HybriScan^®D (zestawy ilościowe) i około 1 godziny w przypadku zestawu HybriScan^®I (zestawy identyfikacyjne). Wyniki jakościowe można określić naocznie lub, w przypadku pomiarów ilościowych, użyć czytnika mikropłytek.

Rysunek 1. System przesiewowy HybriScan^® z czasem analizy wynoszącym około 2-2,5 godziny.

Czułość, specyficzność i elastyczność hybrydyzacji kanapkowej

Hybrydyzacja kanapkowa jest bardzo czuła i może wykryć attomole docelowych cząsteczek rRNA w drożdżach lub bakteriach.^1-3 Te typy komórek zawierają dużą liczbę rybosomów zawierających rRNA; pojedyncza komórka zawiera zatem kilka tysięcy kopii rRNA, ale tylko jedną kopię DNA. Hybrydyzacja kanapkowa zapewnia czułość w surowych próbkach biologicznych, ponieważ nie jest podatna na zakłócenia matrycy. Dzięki zastosowaniu specyficznych sond, system HybriScan^® umożliwia wykrywanie zarówno rodzaju, jak i gatunku, a zatem ma zastosowanie w wielu dziedzinach analitycznych, w tym w monitorowaniu zawartości drobnoustrojów w piwie, winie, napojach bezalkoholowych, wodzie pitnej, szerokiej gamie produktów spożywczych i ściekach.

Rysunek 2. Technologia HybriScan^®

• Wykrywa tylko żywe mikroorganizmy - minimalizuje fałszywie dodatnie wyniki z martwych bakterii
• Nie jest wrażliwy na matrycę próbki
• Wykrywanie specyficzne dla rodzaju i gatunku
• Wyniki w zaledwie 2 godziny po wzbogaceniu
• Szeroki zakres zastosowań: piwo, wino, napoje bezalkoholowe, woda pitna, żywność i ścieki
• Może być stosowany do wykrywania drobnoustrojów niekulturowalnych

Zalety technologii HybriScan^® w porównaniu z innymi technikami wykrywania drobnoustrojów

Technologia wykrywania	Zaleta	Wada
System HybriScan®	Wykrywa tylko żywe komórki Minimalne zakłócenia przez matrycę próbki Wysoka specyficzność Niska reaktywność krzyżowa Łatwa obsługa Oszczędny odczyt Ilościowy i jakościowy Wysoka przepustowość próbek (płytki 96-mikrostudzienkowe) Wykrywanie drobnoustrojów, których nie można hodować	Brak rozróżniania serotypów lub podgatunków Ograniczony projekt sondy (cel rRNA)
PCR	Wysoka przepustowość próbki Czułość ilościowy	Bez różnicowania żywe/martwe komórki Wrażliwy na zakłócenia matrycy (wysoki wysiłek ekstrakcji) Podatny na inhibicję polimerazy
ELISA	Różnicowanie serotypów lub podgatunków Wysoka przepustowość próbek (96-dołkowe płytki) Ilościowe i jakościowe	Niska czułość Niska specyficzność, wyższa reaktywność krzyżowa Wolne i kosztowne opracowywanie testów<
Konwencjonalne metody oparte na hodowli	Stosunkowo niedrogie Proste Specyficzne Powszechnie akceptowana metoda	Czasochłonna (do 10 dni) Brak wykrywania drobnoustrojów niekulturowalnych Niska przepustowość próbki Pracochłonne

HybriScan^® Kalkulator liczby bakterii w ściekach

Dla naszych zestawów do ścieków - (HybriScan^®D Ścieki Microthrix parvicella i  HybriScan^®D Całkowita liczba bakterii w ściekach), udostępniamy arkusz Excela (poniżej) do obliczania całkowitej liczby bakterii, liczby Microthrix i stosunku Microthrix: Całkowita liczba bakterii.

Referencje

1. Huhtamella S, Leinonen M, Nieminen T, Fahnert B, Myllykoski L, Breitenstein A, Neubauer P. 2007. RNA-based sandwich hybridisation method for detection of lactic acid bacteria in brewery samples. Journal of Microbiological Methods. 68(3):543-553. https://doi.org/10.1016/j.mimet.2006.10.009

2. Leskelä T, Tilsala-Timisjärvi A, Kusnetsov J, Neubauer P, Breitenstein A. 2005. Sensitive genus-specific detection of Legionella by a 16S rRNA based sandwich hybridization assay. Journal of Microbiological Methods. 62(2):167-179. https://doi.org/10.1016/j.mimet.2005.02.008

3. Rautio J, Barken K, Lahdenperä J, Breitenstein A, Molin S, Neubauer P. 2003. Microb Cell Fact. 2(1):4. https://doi.org/10.1186/1475-2859-2-4