Wykrywanie i różnicowanie Staphylococcus Aureus na podłożu Baird Parker Agar

Jvo Siegrist

Product Manager Microbiology,

AnalytiX Volume 10 Article 4

Baird Parker Agar jest stosowany do izolacji i różnicowania gronkowców koagulazo-dodatnich w żywności i farmaceutykach zgodnie z metodą Bairda Parkera.

Jako źródło azotu dla organizmu do pożywki dodaje się pepton kazeinowy i ekstrakt mięsny. Ekstrakt drożdżowy dostarcza azotu, a także innych ważnych składników odżywczych, takich jak kompleks witaminy B12. Pożywka zawiera lit i telluryt, które hamują większość zanieczyszczającej mikroflory, podczas gdy glicyna i pirogronian zwiększają wzrost gronkowców. Gronkowce mogą redukować telluryt do tellurku, co powoduje szare lub czarne zabarwienie kolonii. Po dodaniu żółtka pożywka staje się żółta i lekko nieprzezroczysta. Wokół kolonii koagulazododatnich Staphylococcus aureus tworzy się wyraźna aureola, a po dalszej inkubacji może powstać nieprzezroczysta strefa spowodowana reakcją żółtka jaja z lecytynazą (aktywność lipolityczna). Przypuszcza się, że szaro-czarne kolonie i aureola na tym podłożu wskazują na gronkowce koagulazododatnie, ponieważ stwierdzono wysoką korelację między testem koagulazy a aktywnością lipofilową. Staphylococcus aureus i niektóre szczepy Staphylococcus saprophyticus (Shaw i wsp.[5]) mogą wykazywać obie te cechy, ale można je łatwo odróżnić od siebie dzięki różnym czasom, w których rozwija się halo.

Baird Parker Agar Base

Baird Parker Agar with Rabbit Plasma Fibrinogen może być stosowany do wykrywania aktywności koagulazy. Organizmy koagulazododatnie pojawiają się jako szare lub czarne kolonie z powodu redukcji tellurytu i jako nieprzezroczysta aureola, z powodu konwersji fibrynogenu w fibrynę przez koagulazę. Należy liczyć tylko płytki z mniej niż 100 charakterystycznymi koloniami. Zastosowanie tej pożywki eliminuje potrzebę dodatkowego testu koagulazy.

Podłoża:

• 1.05406
• 79893
• 41712

Suplementy:

• Emulsja tellurytowa z żółtka jaja (Nr kat. Nr kat. 75208)
• Suplement RPF (Suplement fibrynogenu z osocza królika; Nr kat. 05939)
• Emulsja tellurynowa z żółtek jaj Sterylna, 20% 1.03785.0001

Mikroorganizmy do testowania wydajności:

Nr materiału	Gatunek produkcyjny (wszystkie stężenia)	Nr WDCM	CFU
< href=.	CFU
CRM06571L-10EA	Staphylococcus aureus	00035	30-120
CRM06571M-10EA	Staphylococcus aureus	00035	500-50,000
VT000357-10EA	Staphylococcus aureus	00035	50,000-150,000
VT000322-10EA	Staphylococcus aureus subsp. aureus	00032	15-80
VT000323-10EA	Staphylococcus aureus subsp. aureus	00032	80-130
VT000324-10EA	Staphylococcus aureus subsp. aureus	00032	130-300
VT000326-10EA	Staphylococcus aureus subsp. aureus	00032	1,000-10,000
VT000327-10EA	Staphylococcus aureus subsp. aureus	00032	50,000-150,000
VT000342-10EA	Staphylococcus aureus subsp. aureus	00034	15-80
VT000343-10EA	Staphylococcus aureus subsp. aureus	00034	80-130
VT000346-10EA	Staphylococcus aureus subsp. aureus	00034	1,000-10,000
VT000347-10EA	Staphylococcus aureus subsp. aureus	00034	50,000-150,000

Nr materiału	Gatunek selektywności	Nr WDCM	CFU
< href=.	CFU
VT000127-10EA	Escherichia coli	00012	50,000-150,000
VT000137-10EA	Escherichia coli	.Escherichia coli	00013	50,000-150,000

Nr materiału	Gatunek charakterystyczny	Nr WDCM
< href=.	CFU
VT001596-10EA	Staphylococcus saprophyticus	00159	1,000-10,000

Referencje

1. BAIRD-PARKER AC. 1962. AN IMPROVED DIAGNOSTIC AND SELECTIVE MEDIUM FOR ISOLATING COAGULASE POSITIVE STAPHYLOCOCCI. 25(1):12-19. https://doi.org/10.1111/j.1365-2672.1962.tb01113.x

2. Köhler W. 1975. E. H. Lennette, E. H. Spaulding and J. P. Truant (Editors), Manual of Clinical Microbiology (2nd Edition). 970 S., 241 Abb., 189 Tab., 1 Tafel. Washington 1974: American Society for Microbiology. $ 15.00. Z Allg Mikrobiol. 15(4):303-303. https://doi.org/10.1002/jobm.19750150418

3. Schau H. 1986. J. F. MacFaddin, Media for Isolation - Cultivation - Identification - Maintenance of Medical Bacteria, Volume I. XI + 929 S., 163 Abb., 94 Tab. Baltimore, London 1985. Williams and Wilkins. $ 90.00. ISBN: 0-683-05316-7. J Basic Microbiol. 26(4):240-240. https://doi.org/10.1002/jobm.3620260414

4. Niskanen A, Aalto M. 1978. Comparison of selective media for coagulase-positive enterotoxigenic Staphylococcus aureus.. 35(6):1233-1236. https://doi.org/10.1128/aem.35.6.1233-1236.1978

5. Shaw C, Stitt JM, Cowan ST. 1951. Staphylococci and their Classification. Journal of General Microbiology. 5(5):1010-1023. https://doi.org/10.1099/00221287-5-5-1010

6. ISO 6888-1:1999; Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal method for the enumeration of coagulasepositive staphylococci (Staphylococcus aureus and other species) – Part 1: Technique using Baird-Parker agar medium.. [Internet]. Available from: https://www.iso.org/standard/23036

7. ISO 6888-2:1999; Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal method for the enumeration of coagulase-positive staphylococci (Staphylococcus aureus and other species) – Part 2: Technique using rabbit plasma fibrinogen agar medium.. [Internet]. Available from: https://www.iso.org/standard/25571.html

8. ISO 6888-3:2003; Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal method for the enumeration of coagulasepositive staphylococci (Staphylococcus aureus and other species) – Part 3: Detection and MPN technique for low numbers.. [Internet]. Available from: https://www.iso.org/standard/33147.html