Rodzaje pożywek w mikrobiologii
Wiele bakterii, drożdży i pleśni występujących w naturze można również hodować w laboratorium. Oprócz wody, pożywki stosowane w tym celu muszą zawierać składniki odżywcze potrzebne mikroorganizmom do wzrostu, w szczególności
- Źródło energii (zazwyczaj cukry)
- Użyteczne źródła pierwiastków potrzebnych do biosyntezy i metabolizmu (zwłaszcza azot, siarka i fosfor)
Niniejszy artykuł wyjaśnia, w jaki sposób różne rodzaje podłoży hodowlanych w mikrobiologii są klasyfikowane na podstawie kryteriów takich jak:
Consistency: Płynne, półstałe i stałe pożywki
Najczęściej stosowanymi pożywkami do wzrostu mikroorganizmów są pożywki płynne lub buliony odżywcze zawierające składniki odżywcze. W takich bulionach mikroorganizmy zwykle rosną wykładniczo, dopóki wzrost nie zostanie ograniczony przez niewystarczającą dostępność składników odżywczych lub nagromadzenie substancji hamujących wzrost.
Z drugiej strony, pożywki stałe umożliwiają wzrost i izolację pojedynczych kolonii drobnoustrojów na ich powierzchni. Każda kolonia pochodzi od pojedynczej jednostki tworzącej kolonię (CFU), zwykle pojedynczej bakterii. Dlatego zakłada się, że wszystkie komórki w kolonii należą do tego samego szczepu i gatunku. Stałe podłoża hodowlane są przygotowywane przez dodanie od 1 do 2% agaru, mieszaniny agarozy i agaropektyny pochodzenia algowego, którą bardzo niewiele bakterii może rozłożyć (upłynnić). Podłoże to jest autoklawowane, schładzane do około 45°C, a następnie wlewane do szalek Petriego, gdzie stygnie i krzepnie. Galaretowata masa dostarcza wodę i składniki odżywcze mikroorganizmom, które są zaszczepiane na powierzchni agaru.
Podłoża półstałe są przygotowywane z niższymi stężeniami agaru od 0,2 do 0,5%. Mają miękką, kremową konsystencję i są używane do hodowli bakterii mikroaerofilnych lub określania ruchliwości bakterii poprzez hodowlę w probówkach i muszą być obsługiwane w pozycji pionowej. Podłoża półstałe mogą być używane do rozróżniania pałeczek duru brzusznego i pałeczek okrężnicy.
Wygoda: Gotowe do użycia i odwodnione pożywki
Gotowe do użycia pożywki są wygodną opcją dla laboratoriów mikrobiologicznych. Podłoża płynne są łatwo sterylizowane i dostarczane w plastikowych torebkach, probówkach i butelkach o różnych rozmiarach, podczas gdy podłoża stałe są łatwo wlewane do szalek Petriego i probówek skośnych lub w większych butelkach. W przypadku pożywek agarowych w butelkach konieczne jest ich ponowne stopienie i schłodzenie do temperatury 44-47°C przed rozlaniem na płytki agarowe.
Z drugiej strony, zhydratyzowane pożywki hodowlane są dostępne w handlu w postaci stabilnej przez długi czas (do 5 lat), w postaci proszków lub granulek, które zawierają wszystkie składniki pożywek wzrostowych, z wyjątkiem wody. W laboratorium mikrobiologicznym te odwodnione pożywki muszą być rozpuszczone w wodzie i autoklawowane przed użyciem.
Podłoża hodowlane na żądanie - Dzięki naszemu innowacyjnemu systemowi ReadyStream®, który na nowo wymyślił przygotowywanie i dozowanie pożywek, możesz przygotować i dozować do 100 litrów wstępnie podgrzanych pożywek na żądanie. System rozcieńcza skoncentrowane pożywki sterylną wodą do odpowiedniego stężenia i dozuje pożywkę do woreczka na próbki bez dodatkowych czynności.
Nasza oferta obejmuje szeroką gamę odwodnionych pożywek hodowlanych w proszku lub granulkach. Oferujemy gotowe do użycia 90 - oraz 55-mm płytki agarowe, butelki z płynnymi pożywkami, probówki lub ampułki 2 mL, buliony i płyny do płukania na potrzeby aplikacji.
Selektywność: Pożywki selektywne, wzbogacone i wzbogacające
Podłoża selektywne pozwalają na wzrost tylko określonego spektrum organizmów, na przykład wszystkich bakterii z rodziny Enterobacteriaceae lub wszystkich bakterii z rodzaju Salmonella. Selektywność uzyskuje się poprzez skomponowanie pożywki tak, aby była optymalna dla wzrostu pożądanych mikroorganizmów i/lub niekorzystna dla innych organizmów. Może to obejmować dodanie antybiotyków, wysokich stężeń soli, niskiego pH lub inhibitorów, takich jak na przykład sole żółciowe. Pożywki selektywne w mikrobiologii są szczególnie przydatne, gdy pożądany organizm jest tylko jednym z wielu w inokulum. Przykładem podłoża selektywnego jest agar z solą mannitolu. Zawiera on wysokie stężenie chlorku sodu, który hamuje wzrost większości organizmów, ale pozwala na wzrost gronkowców.
Z drugiej strony, pożywki wzbogacone są półselektywne: zawierają suplementy, takie jak krew, surowica i żółtko jaja, aby zwiększyć wzrost szybko rosnących bakterii wśród tych mało wymagających. Podczas gdy pożywki wzbogacone są zwykle dostarczane w płytkach agarowych, pożywki wzbogacające są przeznaczone do uprawy w płynie. Pożywki te również sprzyjają wzrostowi określonego mikroorganizmu w stosunku do innych w próbce. Wzbogacanie jest często wykonywane w celu uzyskania wystarczającej ilości materiału organizmu dostępnego do późniejszego wykrywania, izolacji i/lub identyfikacji.
Composition: Pożywki ogólnego przeznaczenia i syntetyczne
Pożywki ogólnego przeznaczenia (znane również jako pożywki podstawowe lub złożone) to rutynowe pożywki, których laboratoria mikrobiologiczne używają do hodowli szerokiego spektrum mikroorganizmów. Zawierają złożone składniki organiczne, takie jak drożdże, materiał zwierzęcy lub roślinny, które nie są precyzyjnie określone chemicznie, więc różnią się nieznacznie składem w zależności od partii. Pożywki te są wykorzystywane do hodowli mikroorganizmów, które nie wymagają dodatkowych składników odżywczych. Powszechnie stosowane pożywki ogólnego przeznaczenia w laboratorium mikrobiologicznym obejmują agar i bulion odżywczy, wodę peptonową, a także tryptyczny bulion sojowy i agar.
Podłoża syntetyczne, z drugiej strony, składają się w całości z substancji, które są znane chemicznie. Pożywki te są wykorzystywane do badania fizjologii, metabolizmu i wymagań żywieniowych niektórych mikroorganizmów.
Właściwości wskaźnikowe: Pożywki różnicujące
Pożywki różnicujące (lub pożywki wskaźnikowe) zawierają substancje, które sprawiają, że kolonie niektórych organizmów przybierają charakterystyczny wygląd. Pożywki te umożliwiają mikrobiologowi rozróżnienie różnych rodzajów mikroorganizmów na tej samej płytce agarowej. Przykładem podłoża różnicującego jest agar z krwią. Jeśli agar z krwią zostanie zaszczepiony mieszaną kulturą bakterii, niektóre z nich mogą wytwarzać enzymy, które hemolizują zawarte w nich czerwone krwinki, tworząc strefę hemolityczną wokół kolonii. Pomaga to odróżnić bakterie hemolityczne od niehemolitycznych. Istnieją również podłoża różnicujące, które zawierają wskaźniki pH, które zmieniają kolor, jeśli na przykład gatunek bakterii wytwarza kwas podczas wzrostu, który obniża pH pożywki.
Zawartość tlenu: Pożywki do hodowli beztlenowych
Bakterie beztlenowe tolerują niewielką ilość tlenu lub nie tolerują go wcale, więc ich pożywki mogą wymagać redukcji za pomocą środków fizycznych lub chemicznych. Gotowanie pożywki i dodanie środków redukujących, takich jak tioglikolan sodu, pomaga pozbyć się rozpuszczonego tlenu z pożywki. Typowym sposobem na zatrzymanie tlenu podczas inkubacji jest uszczelnienie pożywki sterylną ciekłą parafiną. Pożywki beztlenowe mogą być również wykorzystywane do badania metabolizmu beztlenowego fakultatywnych beztlenowców, tj, mikroorganizmów, które rosną tlenowo, jeśli obecny jest tlen, ale przechodzą na fermentację przy braku tlenu.
Safekeeping: Podłoża do transportu i przechowywania
Próbki zawierające mikroorganizmy często muszą być transportowane między laboratoriami mikrobiologicznymi lub przechowywane w celu ponownego wykorzystania po tygodniach, miesiącach, a nawet latach. Dlatego też wybrane podłoże musi utrzymywać żywotność mikroorganizmów. Podczas transportu próbek drobnoustrojów ich stężenie nie może ulec zmianie, co osiąga się poprzez zapobieganie ich namnażaniu. Dlatego większość podłoży transportowych nie zawiera typowych składników pożywek i zawiera tylko substancje, które nie sprzyjają wzrostowi drobnoustrojów, na przykład bufory i sole. Podczas dłuższych okresów przechowywania bakterie są okresowo hodowane na świeżo przygotowanych pożywkach. W celu długotrwałego przechowywania możliwe jest liofilizowanie (liofilizowanie) większości drobnoustrojów.
Zaloguj się lub utwórz konto, aby kontynuować.
Nie masz konta użytkownika?