Fluorescencyjne barwniki i barwniki organelli żywych komórek

Komórki eukariotyczne zawierają struktury subkomórkowe odpowiedzialne za wykonywanie funkcji niezbędnych do przetrwania komórki, w tym generowanie energii (ATP), syntezę i transport białek oraz usuwanie odpadów komórkowych. Ze względu na ich wyspecjalizowane funkcje i dobrze zdefiniowany charakter, w badaniach biologii komórki często przydatne jest oznaczanie kluczowych organelli, takich jak błona komórkowa, jądro, cytoplazma, mitochondria, lizosomy, retikulum endoplazmatyczne (ER), aparat Golgiego i białka cytoszkieletu (np. aktyna). W szczególności, wykorzystanie barwników organelli jako przeciwbarwników w technikach obrazowania żywych komórek okazało się nieocenione w badaniu funkcji komórkowych. Oferujemy wiele barwników fluorescencyjnych i markerów wysoce specyficznych dla różnych organelli, które mogą być wykorzystywane do monitorowania zdrowia komórek, śmierci komórek, aktywności metabolicznej, autofagii, śledzenia komórek oraz migracji i inwazji komórek.

Barwniki do mitochondriów

Mitochondria to organelle o podwójnych błonach, odpowiedzialne za oddychanie komórkowe i produkcję energii w postaci adenozynotrójfosforanu (ATP). Mitochondria są również zaangażowane w inne zadania, takie jak sygnalizacja komórkowa, różnicowanie komórkowe i śmierć komórki - a także utrzymywanie kontroli nad cyklem komórkowym i wzrostem. W zależności od potencjału błonowego, fluorescencyjne barwniki żywych komórek dla mitochondriów mogą być wykorzystywane do analizy ogólnego stanu zdrowia i witalności komórek, oprócz aktywności mitochondriów.

Rysunek 1. Obrazowanie mitochondriów komórkowych na żywo. A) Żywe komórki HeLa wybarwione jednocześnie barwnikiem lizosomów BioTracker NIR650 (SCT139) i zielonym barwnikiem mitochondriów BioTracker 488 (SCT136). B) Żywe komórki HeLa wybarwione barwnikiem BioTracker ATP-Red (SCT045), Hoechst (94403) i zielonym barwnikiem specyficznym dla mitochondriów pokazującym lokalizację w mitochondriach. C) Żywe komórki HeLa wybarwione barwnikiem BioTracker 633 Red Mitochondria (SCT137).

Opis produktu	Wzbudzenie (nm)	Emisja (nm)	Nr produktu.
BioTracker 405 Blue Mitochondria Dye	398	440	SCT135
BioTracker 488 Green Mitochondria Dye	490	523	SCT136.
BioTracker 633 Red Mitochondria Dye	622	648	SCT137
BioTracker ATP-Red Live Cell Dye	510	570	SCT045
JC-1 Barwnik mitochondrialny	485	527/590	T4069

Barwniki lizosomów

Lizosomy są organellami związanymi z błoną, które działają jako system usuwania odpadów z komórki. Jako wysoce kwaśne (pH 4-5) organelle, lizosomy zawierają różnorodne enzymy zdolne do rozkładania różnych biomolekuł, w tym peptydów, kwasów nukleinowych, węglowodanów i lipidów. Oprócz rozpuszczania biomolekuł, lizosomy są również zaangażowane w autofagię i apoptozę. W zależności od wewnętrznego środowiska kwaśnego, barwniki fluorescencyjne do lizosomów mogą być wykorzystywane do analizy aktywności lizosomalnej, zdarzeń autofagii, transportu pęcherzyków i ogólnego stanu komórek.

Rysunek 2. Obrazowanie lizosomów komórkowych na żywo. A) Komórki HeLa wyrażające Mitochondria-GFP wybarwiono barwnikiem BioTracker 560 Orange Lysosome Dye (SCT019) i barwnikiem Hoechst DNA (niebieski). B) Żywe komórki HeLa wybarwione barwnikiem Live Cell Microtubule Stain (niebieski) i BioTracker 540 Red Lysosome Dye (SCT141). C) Żywe komórki Hela wybarwione barwnikiem BioTracker 540 Red Lysosome Dye (SCT141).

Opis produktu	Wzbudzenie (nm)	Emisja (nm)	Nr produktu.
BioTracker 555 UV-Excitation Red Lysosome Dye	554	583	SCT140
BioTracker 560 Orange Lysosome Dye	535	560	SCT019
BioTracker 540 Czerwony barwnik lizosomowy	541	634	SCT141
Barwnik lizosomowy BioTracker NIR633	634	659	SCT138
BioTracker LYSO-TP Live Cell Dye	375	500	SCT044

Barwniki jądrowe

Zawierające prawie cały materiał genetyczny komórki, jądro komórkowe jest zorganizowane w chromosomy, utworzone z kompleksowania długiego liniowego DNA z białkami. Barwniki jądrowe żywych komórek mogą być używane do śledzenia komórek lub jako przeciwbarwniki z innymi barwnikami fluorescencyjnymi lub reporterami komórkowymi. Oferujemy barwniki z kilkoma opcjami kolorystycznymi, w tym barwniki jądrowe o dużej długości fali i dalekiej czerwieni. W porównaniu do tradycyjnych barwników DNA wzbudzanych promieniowaniem UV (np. Hoechst 33342), barwniki jądrowe o długiej długości fali wykazują zmniejszoną toksyczność komórkową podczas eksperymentów obrazowania żywych komórek.

Rysunek 3. Obrazowanie jądra komórkowego na żywo. A) Żywe komórki HeLa wybarwione przy użyciu zielonego barwnika jądrowego BioTracker 488 (SCT120). B) Barwienie żywych komórek HeLa przy użyciu barwnika jądrowego BioTracker NIR694 (na bazie wody) i falloidyny FITC. C) Utrwalone barwienie komórek HeLa przy użyciu barwnika jądrowego BioTracker NIR694 (w DMSO), zielonego barwnika mitochondriów BioTracker 488 i falloidyny CF405.

Opis produktu	Wzbudzenie (nm)	Emisja (nm)	Nr produktu.
Hoechst DNA Stain Solution	350	461	94403
BioTracker 488 Green Nuclear Dye	500	515	SCT120
BioTracker 650 czerwony barwnik jądrowy	650	675	SCT119
BioTracker NIR694 Barwnik jądrowy (na bazie wody)	662	694	SCT117
BioTracker NIR694 Barwnik jądrowy (w DMSO)	662	694	SCT118

Barwniki błon komórkowych

Błona komórkowa, chroniąca i sekwestrująca wnętrze komórki, składa się głównie z lipidów i białek. Oprócz kontrolowania ruchu w dwuwarstwie, błony komórkowe biorą udział w różnych procesach komórkowych, takich jak adhezja komórek, przewodnictwo jonowe, sygnalizacja komórkowa i przyłączanie struktur zewnątrzkomórkowych. Barwniki do błon cytoplazmatycznych BioTracker to lipofilowe karbocyjaniny zdolne do znakowania błon komórkowych w stabilny i nietoksyczny sposób. Ze względu na niską cytotoksyczność, barwniki te nadają się do długoterminowego śledzenia i obrazowania komórek. W przeciwieństwie do barwniki PKH, barwniki BioTracker do błon cytoplazmatycznych są gotowe do użycia i nie wymagają skomplikowanego protokołu znakowania hipoosmotycznego. Barwniki BioTracker mogą być dodawane bezpośrednio do normalnego podłoża hodowlanego w celu znakowania komórek zawieszonych lub przylegających.

Rysunek 4. Obrazowanie błon komórkowych na żywo. A) Żywe komórki HeLa wybarwione przy użyciu BioTracker 400 Blue Cytoplasmic Membrane Dye (SCT109). B) Żywe komórki Hela wybarwione przy użyciu BioTracker 490 Green Cytoplasmic Membrane Dye (SCT106). C) Barwienie na żywo komórek Hela przy użyciu barwnika błony cytoplazmatycznej BioTracker NIR750 (SCT113).

Opis produktu	Wzbudzenie (nm)	Emisja (nm)	Nr produktu.
BioTracker 400 Blue Cytoplasmic Membrane Dye	366	441	SCT109
BioTracker 490 Green Cytoplasmic Membrane Dye	484	501	SCT106
BioTracker 555 Orange Cytoplasmic Membrane Dye	549	565	SCT107
BioTracker 655 Red Cytoplasmic Membrane Dye	644	665	SCT108
BioTracker NIR680 Cytoplasmic Membrane Dye	683	724	SCT112
BioTracker NIR750 Cytoplasmic Membrane Dye	748	780	SCT113
BioTracker NIR770 Barwnik błony cytoplazmatycznej	767	806	SCT114
Barwnik do błon cytoplazmatycznych BioTracker NIR790	786	820	SCT115

Barwniki cytoplazmy

.

Opis produktu	Wzbudzenie (nm)	Emisja (nm)	Nr produktu.
CFSE, BioReagent, odpowiedni do fluorescencji	492	517	21888
Calcein-AM, BioReagent, odpowiedni do fluorescencji	496	516	17783

Barwniki cytoszkieletu

Cytoszkielet, jako złożona sieć wzajemnie powiązanych filamentów i mikrotubul rozciągających się w całej cytoplazmie, zapewnia komórce wsparcie strukturalne i kontroluje wiele procesów, w tym endocytozę, cytokinezę, migrację komórek, inwazję i ruch. W przeciwieństwie do tradycyjnych, utrwalonych barwników F-aktyny (np. sprzężonych barwników falloidyny), barwniki cytoszkieletu mikrotubul BioTracker są przepuszczalnymi dla komórek sondami paklitakselu, które mogą być obrazowane bez etapu płukania. Oferowane w zielonym i czerwonym kolorze fluorescencyjnym, te proste, szybkie i czułe barwniki mogą być wykorzystywane do monitorowania dynamiki cytoszkieletu w czasie rzeczywistym.

Rysunek 5. Obrazowanie cytoszkieletu na żywo w komórce. A) Żywe komórki HeLa wybarwione barwnikiem BioTracker 488 Green Microtubule Cytoskeleton Dye (SCT142) i barwnikiem BioTracker NIR650 Lysosome Dye (SCT139). B) Wrzeciono mitotyczne wybarwione barwnikiem BioTracker 488 Green Microtubule Cytoskeleton Dye (SCT142). DNA jest wybarwione barwnikiem jądrowym BioTracker NIR694 (na bazie wody) (SCT117).

Opis produktu	Wzbudzenie (nm)	Emisja (nm)	Nr produktu.
BioTracker 488 Green Microtubule Cytoskeleton Dye	500	515	SCT142

Barwniki lipidowe

Jako podstawowy budulec komórki, lipidy pełnią wiele ważnych funkcji komórkowych, ale są również powiązane z różnymi chorobami, w tym zaburzeniami sercowo-naczyniowymi i neurologicznymi. Wewnątrzkomórkowe kropelki lipidów są organellami cytoplazmatycznymi zaangażowanymi w przechowywanie i regulację triglicerydów i estrów cholesterolu. Barwnik lipidowy BioTracker szybko wybarwia kropelki lipidów w żywych lub utrwalonych komórkach bez żadnych etapów płukania i przy minimalnym zabarwieniu tła błon komórkowych lub innych organelli. Żywe komórki mogą być następnie utrwalone i permeabilizowane po wybarwieniu barwnikiem BioTracker lipid droplet.

Rysunek 6. Obrazowanie lipidów komórkowych na żywo. A) Żywe komórki HeLa wybarwione za pomocą BioTracker 488 Green Lipid Dye (SCT144), Hoechst (94403) i BioTracker 655 Red Cytoplasmic Membrane Dye (SCT108). B) Komórki HeLa wybarwione barwnikiem BioTracker 610 Red Lipid Droplet Dye (magenta) i BioTracker 488 Green Nuclear Dye (SCT120). C) Komórki HeLa wybarwione barwnikiem BioTracker 488 Green Lipid Dye (SCT144).

Opis produktu	Wzbudzenie (nm)	Emisja (nm)	Nr produktu.
BioTracker 488 Green Lipid Droplet Dye	427	585	SCT144

Wnioski

Ograniczenie technik obrazowania hodowli komórkowych do utrwalonych tkanek i komórek ogranicza informacje, które badacz może uzyskać na temat interesującego go systemu, ponieważ obserwator jest w stanie uchwycić tylko moment w czasie komórkowym. Nasze fluorescencyjne barwniki organelli w żywych komórkach pozwalają na selektywne barwienie określonych organelli bez zwiększonej cytotoksyczności. Barwienie organelli w żywych komórkach może pomóc naukowcom potwierdzić tożsamość określonych białek lub celów w komórkach i zapewnić lepsze zrozumienie procesów komórkowych. Nasze szerokie portfolio gwarantuje, że mamy barwnik specyficzny dla organelli w kolorze potrzebnym do eksperymentów obrazowania żywych komórek.