Przejdź do zawartości
Merck

Analiza zdrowia komórek

Podwójne barwienie żywych/martwych komórek

Odczynniki, zestawy i narzędzia do analizy zdrowia komórek mierzą ogólne i specyficzne wskaźniki żywotności hodowli komórkowej. Testy żywotności mogą być stosowane jako ogólna miara zdrowia komórek lub do oceny skutków leczenia wraz z testami cytotoksyczności. Testy proliferacji często wykorzystują syntezę DNA i podział komórek jako miarę aktywności metabolicznej komórek w wyniku warunków lub leczenia. Zestawy cytotoksyczności mogą wykorzystywać odczyty bioredukcji do oceny aktywności metabolicznej.  

Zanieczyszczenie hodowli jest jedną z najczęstszych barier dla wydajnej, niezawodnej hodowli komórkowej. Chociaż niektóre zanieczyszczenia można wykryć poprzez sumienną kontrolę mikroskopową hodowli, zanieczyszczenia takie jak mykoplazma wymykają się wizualnym metodom wykrywania. Hodowle powinny być zatem rutynowo badane przy użyciu zestawów i odczynników, które niezawodnie wykrywają zanieczyszczenia mikrobiologiczne. Odczynniki, które minimalizują i eliminują zanieczyszczenie, gdy do niego dojdzie, są niezbędne w pomieszczeniu hodowlanym, które uzupełniają sterylną technikę i dobre praktyki w pomieszczeniu hodowlanym.

Nasza kompleksowa oferta w zakresie zdrowia komórek obejmuje

Testy żywotności i proliferacji komórek

Testy do pomiaru proliferacja i żywotność komórek są wykorzystywane do monitorowania odpowiedzi i zdrowia komórek w hodowli po leczeniu różnymi bodźcami. Właściwy wybór metody badania zależy od liczby i rodzaju komórek, które mają być oceniane, a także od oczekiwanego wyniku. Testy proliferacji komórek mogą monitorować liczbę komórek w czasie, liczbę podziałów komórkowych, aktywność metaboliczną lub syntezę DNA. Zliczanie komórek przy użyciu barwników żywotności, takich jak błękit trypanu lub calcein-AM może zapewnić zarówno szybkość proliferacji, jak i procent żywotnych komórek. Ester N-sukcynoimidylowy 5(6)-karboksyfluoresceiny (CFSE)  (21888, SCT110) jest popularnym wyborem do pomiaru liczby podziałów komórkowych, przez które przeszła populacja. Po wejściu do komórki CFSE jest rozszczepiany przez wewnątrzkomórkowe esterazy, tworząc związek fluorescencyjny, a grupa bursztynoimidylowa estrów kowalencyjnie reaguje z pierwszorzędowymi aminami na białkach wewnątrzkomórkowych. Przy każdym podziale intensywność fluorescencji każdej komórki potomnej zmniejsza się o połowę, umożliwiając proste wykrycie liczby podziałów komórkowych za pomocą cytometrii przepływowej.

Metabolizm MTT do soli formazanu przez żywe komórki na płytce 96-dołkowej

Metabolizm MTT do soli formazanu przez żywe komórki na płytce 96-dołkowej

Nasze kompleksowe narzędzia i rozwiązania do pomiaru żywotności i proliferacji komórek wykorzystują różne metody i obejmują:

  • Testy proliferacji syntezy DNA
  • Testy proliferacji metabolicznej
  • Luminescencyjne testy żywotności komórek
  • Testy proliferacji z użyciem barwników fluorescencyjnych
  • Testy proliferacji z użyciem barwnika fluorescencyjnego
  • Potrójne barwienie żywych/umarłych/całkowitych komórek w hodowlach 3D
  • Liczenie żywotności z wykluczeniem barwnika błękit trypanu

Testy cytotoksyczności

Testy mierzące aktywność metaboliczną są odpowiednie do analizy proliferacji, żywotności i cytotoksyczności. Redukcja soli tetrazoliowych, takich jak MTT i XTT do barwnych związków formazanu lub bioredukcja rezazuryny (R7017, TOX8) zachodzi tylko w komórkach aktywnych metabolicznie. Aktywnie proliferujące komórki zwiększają swoją aktywność metaboliczną, podczas gdy komórki w trudnej sytuacji, takie jak te narażone na toksyny, wykazują zmniejszoną aktywność.

Apoptosis Assays

Śmierć komórki jest niezbędna dla wielu normalnych funkcji fizjologicznych zarówno w trakcie rozwoju, jak i homeostazy. Zdolność komórek nowotworowych do unikania zaprogramowanej śmierci komórki, znanej również jako apoptoza, jest cechą charakterystyczną większości rodzajów raka. Szeroka gama białek komórkowych, w tym receptory na powierzchni komórki, adaptory, proteazy i składniki mitochondrialne, regulują równowagę między przeżyciem komórki a śmiercią w wyniku apoptozy. Przemyślany wybór testów może pomóc nie tylko w analizie wpływu warunków hodowli komórkowej i leczenia na zdrowie komórek, ale także mechanizmów, za pomocą których wpływają one na zdrowie komórek. Oferujemy pełną gamę testów do wczesnego, średniego i późnego etapu wykrywania apoptozy.

Wykrywanie i eliminacja zanieczyszczeń komórek

Utrzymanie wolnych od zanieczyszczeń kultur komórkowych ma fundamentalne znaczenie dla badań opartych na komórkach. Jednym z najbardziej rozpowszechnionych problemów w hodowlach komórkowych jest zanieczyszczenie mykoplazmą, rodzajem bakterii, których morfologia charakteryzuje się submikronowym rozmiarem i brakiem ściany komórkowej, co sprawia, że bakterie te są trudne lub niemożliwe do wykrycia pod mikroskopem i odporne na wiele antybiotyków. Chociaż mykoplazmy zwykle nie powodują śmierci komórek, są one odpowiedzialne za różne skutki dla hodowanych komórek, które obejmują rozregulowany metabolizm, zmniejszoną proliferację i aberracje chromosomalne. Krótko mówiąc, skażenie mykoplazmą zagraża ważności dotkniętych nią linii komórkowych w dostarczaniu znaczących danych do badań w dziedzinie nauk przyrodniczych.

Powszechnie stosowane środki do wykrywania DNA, takie jak DAPI lub Hoechst, ujawniają obecność mykoplazmy w zakażonych hodowlach za pomocą mikroskopii fluorescencyjnej.

Nasze narzędzia do wykrywanie i eliminacja mykoplazmy obejmują:

  • LookOut® Mycoplasma PCR Detection Kit i inne zestawy PCR i qPCR do niezawodnego, czułego demaskowania mykoplazmy w hodowlach komórkowych
  • Broth z fosforanem tryptozy i inne odczynniki do wykrywania przez hodowlę mykoplazmy<
  • Barwniki DNA do wykrywania mykoplazmy metodą fluorescencyjnego barwienia DNA
  • LookOut® Mycoplasma Erase spray i odczynniki do dekontaminacji mykoplazmy


Zasoby dotyczące powiązanych produktów



Zaloguj się, aby kontynuować

Zaloguj się lub utwórz konto, aby kontynuować.

Nie masz konta użytkownika?