おすすめの製品
使用法
sufficient for 2 x 20 assays (stadard transcription)
品質水準
包装
kit of 1 (12 components)
メーカー／製品名
Roche
テクニック
DNA sequencing: suitable
hybridization: suitable
保管温度
−20°C
詳細
転写ベクターpSPT18またはpSPT19に挿入された試料材料
DNA。鋳型DNAは、所定の長さの転写物を得るための転写反応の前に、適切な制限酵素を用いて線形化しなければなりません。転写用鋳型として無傷プラスミドDNAを用いると、数種類の長さをもつプラスミドの異種転写物が得られます。
DNA。鋳型DNAは、所定の長さの転写物を得るための転写反応の前に、適切な制限酵素を用いて線形化しなければなりません。転写用鋳型として無傷プラスミドDNAを用いると、数種類の長さをもつプラスミドの異種転写物が得られます。
特異性
熱失活: 2 μl 0.2 M EDTA (pH 8.0)を添加して、および／または10分間65°Cに加熱して反応を停止します。
アプリケーション
SP6およびT7ポリメラーゼを使用したin vitro転写による、RNAの放射活性または非放射活性標識のための便利なキット。このキットは「冷」転写アッセイに用いることもできます。in vitro転写方法によって既知の長さの一本鎖RNAプローブが作り出され、さまざまなハイブリッド形成手法に用いることができます。SP6またはT7プロモーターの下流をクローニングしたDNA配列の
in vitro転写用。均一に標識されたRNAは、放射活性(例えば、32P、3H、35S)で標識された、または非放射活性(例えば、ジゴキシゲニンまたはビオチン)で標識されたリボヌクレオチドのいずれかを用いて、高効率(60～70%の取り込み率)で合成可能です。標識された転写物は、すべてのDNAおよびRNAハイブリッド形成手法に役立ち、染色体配列決定とS1ヌクレアーゼ研究にも用いられます。大量の高純度RNAがSP6/T7系を用いて合成可能です。これらの転写物はRNAプロセシング系に関する研究に用いられます。合成されたRNAは、卵母細胞に注入してからin vitroまたはin vivoで翻訳できます。所定のmRNAの転写は、「アンチセンス」RNAの導入によって阻害できます。合成されたmRNAのin vivo翻訳の効率は、キャップ構造の導入によって大幅に向上できます。
in vitro転写用。均一に標識されたRNAは、放射活性(例えば、32P、3H、35S)で標識された、または非放射活性(例えば、ジゴキシゲニンまたはビオチン)で標識されたリボヌクレオチドのいずれかを用いて、高効率(60～70%の取り込み率)で合成可能です。標識された転写物は、すべてのDNAおよびRNAハイブリッド形成手法に役立ち、染色体配列決定とS1ヌクレアーゼ研究にも用いられます。大量の高純度RNAがSP6/T7系を用いて合成可能です。これらの転写物はRNAプロセシング系に関する研究に用いられます。合成されたRNAは、卵母細胞に注入してからin vitroまたはin vivoで翻訳できます。所定のmRNAの転写は、「アンチセンス」RNAの導入によって阻害できます。合成されたmRNAのin vivo翻訳の効率は、キャップ構造の導入によって大幅に向上できます。
包装
1キットに12構成要素が含まれています。
原理
転写ベクターpSPT18またはpSPT19のポリリンカー部位にDNAを挿入します。これら2つのベクターは、ポリリンカー領域の配位のみ異なります。SP6およびT7 RNAポリメラーゼのプロモーターは、ポリリンカーのいずれかの側に位置します。SP6およびT7 RNAポリメラーゼは、それぞれSP6またはT7のプロモーター下流にあるDNA配列を特異的に転写します。ポリリンカー領域中のクローニングされた挿入物は、いずれかのプロモーターから転写されます。第1 DNA鎖はSP6 RNAポリメラーゼを用いて転写でき、逆鎖はT7 RNAポリメラーゼを用いて転写できます。同じDNAをpSPT18とpSPT19の両方に逆方向に挿入し、いずれかのRNAポリメラーゼのみで転写しても第1鎖と逆鎖を転写できます。SP6およびT7 RNAポリメラーゼは、クローニングされたDNAを鋳型として用い、Mg2+とリボヌクレオシド三りん酸の存在下で相補的RNAを合成します。スペルミジンは酵素活性を刺激します。特異的に標識された転写物は、放射活性(例えば、32P、3H、35S)または非放射活性(例えば、ジゴキシゲニンまたはビオチン)で標識されたリボヌクレオチド三りん酸を用いて得られます。
調製ノート
標準溶液: 標準標識アッセイ
ATP、GTP、UTP混合物
溶液4、溶液6および溶液7の1:1:1混合物を作ってATP、GTP、UTP混合物を調製します。
ジゴキシゲニン-11-UTPを用いた転写アッセイ
ATP、GTP、CTP混合物1
ATP(バイアル4)、CTP(バイアル5)およびGTP(バイアル6)を1:1:1で混合します。
UTP/DIG-11-UTP混合物
ジゴキシゲニン-11-UTP (6 mM)とUTP(バイアル7)を1:1で混合し、混合物1に一部として加えます。
「冷」転写
ATP、GTP、CTP、UTP混合物
溶液をバイアル4、5、6および7に1:1:1:1の比で混ぜ合わせて、この混合物を調製します。
ATP、GTP、UTP混合物
溶液4、溶液6および溶液7の1:1:1混合物を作ってATP、GTP、UTP混合物を調製します。
ジゴキシゲニン-11-UTPを用いた転写アッセイ
ATP、GTP、CTP混合物1
ATP(バイアル4)、CTP(バイアル5)およびGTP(バイアル6)を1:1:1で混合します。
UTP/DIG-11-UTP混合物
ジゴキシゲニン-11-UTP (6 mM)とUTP(バイアル7)を1:1で混合し、混合物1に一部として加えます。
「冷」転写
ATP、GTP、CTP、UTP混合物
溶液をバイアル4、5、6および7に1:1:1:1の比で混ぜ合わせて、この混合物を調製します。
その他情報
生命科学研究用途に限ります。診断措置において使用しないでください。
キットの構成要素のみ
製品番号
詳細
- pSPT18 DNA 0.25 mg/ml
- pSPT19 DNA 0.25 mg/ml
- Control DNA, (pSPT18- and pSPT19-neo-DNA, cleaved with Eco RI) 0.5 mg/ml
- ATP, in Tris buffer 10 mM
- CTP, in Tris buffer 10 mM
- GTP, in Tris buffer 10 mM
- UTP, in Tris buffer 10 mM
- Transcription Buffer 10x concentrated
- DNase I, RNase free, in buffer with 50% glycerol
- RNase Inhibitor, in buffer with 50% glycerol
- SP6 RNA Polymerase, in buffer with 50% glycerol
- T7 RNA Polymerase, in buffer with 50% glycerol
すべて表示 (12)
シグナルワード
Warning
危険有害性情報
危険有害性の分類
Eye Irrit. 2 - Skin Sens. 1
保管分類コード
12 - Non Combustible Liquids
WGK
WGK 2
引火点(°F)
does not flash
引火点(℃)
does not flash
試験成績書（COA）
製品のロット番号・バッチ番号を入力して、試験成績書（COA） を検索できます。ロット番号・バッチ番号は、製品ラベルに「Lot」または「Batch」に続いて記載されています。
この製品を見ている人はこちらもチェック
Le Tran Phuc Khoa et al.
PloS one, 11(7), e0159246-e0159246 (2016-07-15)
Fibroblast growth factor 5 (Fgf5) has been widely used as a marker for the epiblast in the postimplantation embryo and epiblast stem cells (mEpiSCs) in the mouse, making it valuable for study of differentiation of various tissues and epiblast cells
Ying-Juan Zheng et al.
FASEB journal : official publication of the Federation of American Societies for Experimental Biology, 33(11), 12915-12928 (2019-09-27)
Nasopharyngeal carcinoma (NPC) is a malignant epithelial cancer of the head and neck with high prevalence in southern China, which is accompanied by notable invasiveness and metastasis. Long noncoding RNAs (lncRNAs) participate in the progression of various cancers including NPC.
Madeline Bucher et al.
Scientific reports, 6, 19867-19867 (2016-01-26)
Symbiosis between photosynthetic algae and heterotrophic organisms is widespread. One prominent example of high ecological relevance is the endosymbiosis between dinoflagellate algae of the genus Symbiodinium and reef-building corals, which typically acquire symbionts anew each generation during larval stages. The
Maxime Gasnier et al.
Nature protocols, 8(12), 2538-2547 (2013-11-23)
RNA in situ hybridization (ISH) has been widely used in cell and developmental biology research to study gene expression. Classical ISH protocols use colorimetric staining approaches, such as the assay with nitro blue tetrazolium/5-bromo-4-chloro-3-indolyl-phosphate (NBT/BCIP), which do not allow the
Yanqiu Hu et al.
BMC developmental biology, 11, 58-58 (2011-10-01)
TG-interacting factors (TGIFs) belong to a family of TALE-homeodomain proteins including TGIF1, TGIF2 and TGIFLX/Y in human. Both TGIF1 and TGIF2 act as transcription factors repressing TGF-β signalling. Human TGIFLX and its orthologue, Tex1 in the mouse, are X-linked genes
ライフサイエンス、有機合成、材料科学、クロマトグラフィー、分析など、あらゆる分野の研究に経験のあるメンバーがおります。.
製品に関するお問い合わせはこちら（テクニカルサービス）