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フォーム
solution
品質水準
使用法
sufficient for 20 reactions
包装
pkg of 40 μL
メーカー／製品名
Roche
不純物
Ribonuclease, none detected (up to 20 µl using MSII-RNA)
色
colorless
溶解性
water: miscible
保管温度
−20°C
詳細
ラベリング効率：約10 μgのジゴキシゲニン標識化完全長RNAが、1 μgの直鎖テンプレートDNAから転写されます。
アッセイ時間：135分
サンプル材料
直鎖プラスミドDNA：
転写されるDNAが、SP6、T7またはT3 RNAポリメラーゼのためのプロモーターをポリリンカー付近に含む、適切な転写ベクターのポリリンカーサイトに複製されます。「ランオフ」転写物の合成のため、プラスミドは制限酵素によって直鎖化されます。5′-オーバーハングを生成する制限酵素を使用してください。3′-オーバーハングは避けてください。直鎖化されたテンプレートDNAは、RNアーゼのコンタミネーションを避けるため、フェノール/クロロホルム抽出およびエタノール沈殿によって精製してください。ランアラウンド用；転写環状プラスミドDNAが使用されます。
PCR生成物：
RNAポリメラーゼプロモーター配列を含むPCR断片は、転写用テンプレートとしても使用できます。転写に先立ち、HighPureカラム精製によってPCR断片を精製することをお勧めします。
アッセイ時間：135分
サンプル材料
直鎖プラスミドDNA：
転写されるDNAが、SP6、T7またはT3 RNAポリメラーゼのためのプロモーターをポリリンカー付近に含む、適切な転写ベクターのポリリンカーサイトに複製されます。「ランオフ」転写物の合成のため、プラスミドは制限酵素によって直鎖化されます。5′-オーバーハングを生成する制限酵素を使用してください。3′-オーバーハングは避けてください。直鎖化されたテンプレートDNAは、RNアーゼのコンタミネーションを避けるため、フェノール/クロロホルム抽出およびエタノール沈殿によって精製してください。ランアラウンド用；転写環状プラスミドDNAが使用されます。
PCR生成物：
RNAポリメラーゼプロモーター配列を含むPCR断片は、転写用テンプレートとしても使用できます。転写に先立ち、HighPureカラム精製によってPCR断片を精製することをお勧めします。
in vitro転写によって、DIG標識された任意の長さの一重鎖RNAプローブが生成されます。DIG-11-UTPは、標準的な条件下、SP6、T7およびT3 RNAポリメラーゼによって、転写物のおよそ20～25 番目の各ヌクレオチドに取り込まれます。DIG RNAラベリングミックスは、最適化された転写バッファーと共に提供されるSP6、T7およびT3 RNAポリメラーゼとの使用に特別にデザインされています。
RNAのジゴキシゲニン-11-UTP標識のための便利なヌクレオチド混合物です。
内容
以下を含む10倍溶液：10 mM ATP、CTP、GTP（それぞれ）、6.5 mM UTP、3.5 mM DIG-11-UTP。
RNAのジゴキシゲニン-11-UTP標識のための便利なヌクレオチド混合物です。
内容
以下を含む10倍溶液：10 mM ATP、CTP、GTP（それぞれ）、6.5 mM UTP、3.5 mM DIG-11-UTP。
特異性
熱失活：2 μLの 0.2 M EDTA（pH 8.0）を添加して反応を停止します。
アプリケーション
SP6、T7およびT3 RNAポリメラーゼでのin vitro転写による、RNAのジゴキシゲニン-11-UTPラベリング。DIG標識化RNAは、以下のような様々なハイブリダイゼーションテクニックで使用されます：
- ノーザンブロット
- サザンブロット
- ドットブロット
- プラークまたはコロニーリフト
- RNアーゼプロテクション実験
- クロモソーム、細胞、および組織切片in situ
特徴および利点
DIG RNAラベリングミックスは、最適化された転写バッファーと共にRocheから提供されるSP6、T7およびT3 RNAポリメラーゼとの使用に特別にデザインされています。
品質
DIG RNAラベリングキットおよびDIG核酸検出キットにおいて機能テスト済みです。
その他情報
ライフサイエンス研究のみに使用できます。診断には使用できません。
シグナルワード
Warning
危険有害性情報
危険有害性の分類
Acute Tox. 4 Oral
保管分類コード
12 - Non Combustible Liquids
WGK
WGK 1
引火点(°F)
does not flash
引火点(℃)
does not flash
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資料
Digoxigenin (DIG) labeling methods and kits for DNA and RNA DIG probes, random primed DNA labeling, nick translation labeling, 5’ and 3’ oligonucleotide end-labeling.
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プロトコル
DIG RNA Labeling Mix Protocol & Troubleshooting
ライフサイエンス、有機合成、材料科学、クロマトグラフィー、分析など、あらゆる分野の研究に経験のあるメンバーがおります。.
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