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Merck

04719956001

Roche

cOmplete Lysis-M(コンプリートリシス-M)

storage temp.:room temp

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About This Item

UNSPSCコード:
12352204
NACRES:
NA.21

メーカー/製品名

Roche

保管温度

room temp

詳細

cOmplete Lysis-M哺乳類細胞タンパク質抽出物試薬には中性界面活性剤が含まれているため(pH 7.6の25 mMビシン緩衝液中)、哺乳類細胞が効率的に溶解され、スクレーピング、音波処理、凍結-解凍サイクルを用いる必要はありません。これは、培養哺乳類細胞の細胞質と核の両方からタンパク質を静かに抽出するために必要です。このキットで得られるタンパク質収量は、凍結-解凍を3サイクル行う場合に比べ20~25%高く、音波処理(50%パルスで)を2分間行う場合に比べ約20%高くなります。抽出されたタンパク質を下流プロセスでさらに精製または分析できます。哺乳類細胞の効率的な溶解を、室温においてわずか5分で行えます。
このキットに含まれている調製済みcOmpleteMiniプロテアーゼインヒビターカクテル錠は、キットのLysis-M試薬と共に使用すると最適に機能します。′cOmpleteMiniプロテアーゼインヒビターカクテル錠により、広範囲のセリンプロテアーゼ、システインプロテアーゼおよびメタロプロテアーゼのほか、カルパインを阻害できます。cOmplete Lysis-M試薬は、初期抽出段階においてタンパク質抽出に役立つと同時にプロテアーゼ活性を阻害します。cOmpleteMiniプロテアーゼインヒビターカクテル錠には、不可逆的および可逆的プロテアーゼ阻害剤が含まれています。

アプリケーション

Lysis-M試薬は次のような多くの用途に適合します:
  • リポーターアッセイ(β-ガラクトシダーゼ、ルシフェラーゼ、クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼなど)
  • イムノアッセイ(ウエスタンブロット、ELISA、RIAなど)
  • タンパク質アッセイ(タンパク質キナーゼA、タンパク質キナーゼC、チロシンキナーゼなど)
  • タンパク質精製
さらに、細胞ライセートはクーマシー染色のようなタンパク質アッセイおよびBCA(2′-ベンゾイルオキシシンナムアルデヒド)タンパク質アッセイに適合し、試薬は透析によって除去できます。
注:cOmplete Mini錠(キットに含まれます)にはEDTA(エチレンジアミン四酢酸)が含まれています。目的のタンパク質、たとえばポリHis標識組換えタンパク質をIMAC(固定化金属イオンアフィニティークロマトグラフィー)により精製する場合、クロマトグラフィーの前にEDTAを除去(透析などにより)しなければなりません。その代わりに、cOmplete Lysis-M EDTA不含製品を使用できます。

特徴および利点

  • 試薬によってタンパク質が変性または改変されることはないため、タンパク質構造は維持されます。
  • 1つの製品によって、多くのプロテアーゼから保護するため、費用が節約されます。
  • 抽出されたタンパク質を直接多くの下流手順で使用することができるため、工程を省くことができます。

包装

1キットに2つのコンポーネントが含まれます。各錠剤は抽出物10mLに十分対応できます。最大100gまでの哺乳動物細胞の溶解向けです。

調製ノート

使用目的:哺乳動物細胞からの可溶性タンパク質の同時抽出および保護。
サンプル材料:培養液中の哺乳動物細胞(例えば、飽和密度で収獲したCos-7細胞)。
所要時間: 5 分(室温での細胞溶解)。
抽出の回数:20回(それぞれ10mL)。
有効な対象:セリンプロテアーゼ、システインプロテアーゼ、金属プロテアーゼ。
注記:各cOmplete Mini錠は10mLの抽出物中のプロテアーゼを阻害するのに十分な程度に濃縮されています。

その他情報

ライフサイエンス研究用途に限ります。診断に使用しないでください。

法的情報

cOmplete is a trademark of Roche

キットの構成要素のみ

製品番号
詳細

  • Lysis-M Reagent for protein extraction from mammalian cells

  • cOmplete Mini Protease Inhibitor Cocktail Tablets supplied in EASYpacks

ピクトグラム

Exclamation mark

シグナルワード

Warning

危険有害性情報

危険有害性の分類

Eye Irrit. 2 - Skin Irrit. 2

保管分類コード

12 - Non Combustible Liquids

WGK

WGK 2

引火点(°F)

does not flash

引火点(℃)

does not flash


試験成績書(COA)

製品のロット番号・バッチ番号を入力して、試験成績書(COA) を検索できます。ロット番号・バッチ番号は、製品ラベルに「Lot」または「Batch」に続いて記載されています。

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Bryan M Ham et al.
Journal of proteome research, 7(6), 2215-2221 (2008-04-17)
Ongoing optimization of proteomic methodologies seeks to improve both the coverage and confidence of protein identifications. The optimization of sample preparation, inclusion of technical replicates (repeated instrumental analysis of the same sample), and biological replicates (multiple individual samples) are crucial

資料

cOmplete™ Lysis-M Protocol & Troubleshooting

ライフサイエンス、有機合成、材料科学、クロマトグラフィー、分析など、あらゆる分野の研究に経験のあるメンバーがおります。.

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