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Merck

A novel coagulation inhibitor from Schistosoma japonicum.

Parasitology (2015-10-16)
Shiwanthi L Ranasinghe, Katja Fischer, Geoffrey N Gobert, Donald P McManus
RESUMO

Little is known about the molecular mechanisms whereby the human blood fluke Schistosoma japonicum is able to survive in the host venous blood system. Protease inhibitors are likely released by the parasite enabling it to avoid attack by host proteolytic enzymes and coagulation factors. Interrogation of the S. japonicum genomic sequence identified a gene, SjKI-1, homologous to that encoding a single domain Kunitz protein (Sjp_0020270) which we expressed in recombinant form in Escherichia coli and purified. SjKI-1 is highly transcribed in adult worms and eggs but its expression was very low in cercariae and schistosomula. In situ immunolocalization with anti-SjKI-1 rabbit antibodies showed the protein was present in eggs trapped in the infected mouse intestinal wall. In functional assays, SjKI-1 inhibited trypsin in the picomolar range and chymotrypsin, neutrophil elastase, FXa and plasma kallikrein in the nanomolar range. Furthermore, SjKI-1, at a concentration of 7·5 µ m, prolonged 2-fold activated partial thromboplastin time of human blood coagulation. We also demonstrate that SjKI-1 has the ability to bind Ca(++). We present, therefore, characterization of the first Kunitz protein from S. japonicum which we show has an anti-coagulant properties. In addition, its inhibition of neutrophil elastase indicates SjKI-1 have an anti-inflammatory role. Having anti-thrombotic properties, SjKI-1 may point the way towards novel treatment for hemostatic disorders.

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Sigma-Aldrich
Álcool etílico, puro, 200 proof, for molecular biology
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Ácido clorídrico, ACS reagent, 37%
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Álcool etílico, puro, 200 proof, ACS reagent, ≥99.5%
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Álcool etílico, puro, 200 proof, HPLC/spectrophotometric grade
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Ácido clorídrico, ACS reagent, 37%
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Cloreto de hidrogênio, 4.0 M in dioxane
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Álcool etílico, puro, 200 proof, meets USP testing specifications
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Álcool etílico, puro, for molecular biology
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Ácido clorídrico, 1.0 N, BioReagent, suitable for cell culture
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Ácido clorídrico, meets analytical specification of Ph. Eur., BP, NF, fuming, 36.5-38%
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Ácido clorídrico, 37 wt. % in H2O, 99.999% trace metals basis
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Sigma-Aldrich
Ácido clorídrico, 36.5-38.0%, BioReagent, for molecular biology
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Cloreto de hidrogênio, 2.0 M in diethyl ether
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Ácido clorídrico, puriss. p.a., ACS reagent, reag. ISO, reag. Ph. Eur., fuming, ≥37%, APHA: ≤10
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Etanol, ACS reagent, prima fine spirit, without additive, F15 o1
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Etanol, purum, absolute ethanol, denaturated with 4.8% isopropanol, A15 IPA1, ≥99.8% (based on denaturant-free substance)
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Supelco
Ácido clorídrico, volumetric, 0.1 M HCl (0.1N), endotoxin free
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Cloreto de hidrogênio, 1.0 M in diethyl ether
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Ácido clorídrico, puriss., 24.5-26.0%
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Ácido clorídrico, ~6 M in H2O, for amino acid analysis
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Álcool etílico, puro, 190 proof, ACS spectrophotometric grade, 95.0%
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Cloreto de hidrogênio, 3 M in cyclopentyl methyl ether (CPME)
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Etanol, purum, fine spirit, denaturated with 4.8% methanol, F25 METHYL1, ~96% (based on denaturant-free substance)
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Sigma-Aldrich
Ácido clorídrico, 32 wt. % in H2O, FCC
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Álcool etílico, puro, 200 proof, anhydrous, ≥99.5%
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Supelco
Ethanol solution, certified reference material, 2000 μg/mL in methanol
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Sigma-Aldrich
Etanol, purum, absolute ethanol, denaturated with 2% 2-butanone, A15 MEK1, ≥99.8% (based on denaturant-free substance)
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Sigma-Aldrich
Cloreto de hidrogênio, 1.0 M in acetic acid
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