siRNA Universal Neg. Kontrole

Wszystkie opcje zamawiania znajdują się w tabeli Dostępne uniwersalne kontrole negatywne siRNA.

MISSION^® Uniwersalne kontrole negatywne siRNA są niezbędnym elementem każdego eksperymentu wyciszania genów. Kontrole negatywne zostały zaprojektowane w celu odróżnienia wyciszania specyficznego dla sekwencji od efektów niespecyficznych.

Zalety produktu

• Brak homologii do jakiejkolwiek znanej sekwencji genu
• Dostępne z etykietami fluorescencyjnymi, umożliwiając w ten sposób szybką ocenę wydajności transfekcji<
• Testowane in vitro na komórkach ludzkich, mysich i szczurzych

Cechy produktu

• Opcje: 2 unikalne sekwencje dostępne w wersji niezmodyfikowanej i zmodyfikowanej
• Ilości: 0,2 (1 nmol), 5 x 0,2 (5 x 1 nmol) & 5 (10 nmol) OD
• Oczyszczanie: Desalt
• Forma sekwencji: 21-merowe dupleksy z nawisami dTdT
• Modyfikacje: Cyjanina 3, cyjanina 5 & 6-FAM^™ dostępne
• Kontrola jakości: 100% spektrometria masowa^*
• Format: Dostarczany w postaci suchej w probówkach

^*W zależności od miejsca produkcji, PAGE może być stosowany do oceny dupleksów siRNA.

Dostępne jest dostosowanie powyższych funkcji. Aby zapoznać się z wykonalnością konkretnych potrzeb, prosimy o przesłanie zapytania na adres sirnarequest@sial.com.

Dane walidacyjne

Komórki HeLa wysiano na 24-dołkowe płytki 24 godziny przed transfekcją w gęstości 40 000 komórek na dołek. Następnie komórki transfekowano przy użyciu odczynnika do transfekcji siRNA MISSION i 10 nM różnych fluorescencyjnych uniwersalnych kontroli ujemnych. Fluorescencję oceniano 24 godziny po transfekcji, a obrazy rejestrowano przy 40-krotnym powiększeniu. Rysunek 1 pokazuje przykłady komórek poddanych działaniu preparatu z oczekiwanymi wynikami. Rysunek 2 pokazuje komórki kontrolne bez obecności fluorescencyjnych uniwersalnych kontroli ujemnych.

Rysunek 1. Obrazy mikroskopowe leczonych komórek (A) DIC (różnicowy kontrast interferencyjny) i mikroskopia fluorescencyjna SIC003 Fluorescencyjna uniwersalna kontrola negatywna #1 z cyjaniną 3 (wzbudzenie: 550 nm & emisja: 570 nm; wzbudzenie filtra RFP: 555 nm ±25 & detekcja: 605 nm ±52) B) DIC i mikroskopia fluorescencyjna SIC005 Fluorescencyjna uniwersalna kontrola negatywna #1 z cyjaniną 5 (wzbudzenie: 650 nm i emisja: 670 nm; wzbudzenie filtra cyjaniny 5: 320 nm ±60 & detekcja: 700 nm ±75) i C) Mikroskopia DIC i mikroskopia fluorescencyjna fluorescencyjnej uniwersalnej kontroli negatywnej SIC007 #1 w/6-FAM (wzbudzenie: 495 nm & emisja: 516 nm; wzbudzenie filtra GFP: 490 nm ±20 & detekcja: 525 nm ±36). Strzałki wskazują komórkę, w której widoczna jest fluorescencja.

Rysunek 2. Obrazy mikroskopowe komórek kontrolnych (traktowanych tylko odczynnikiem do transfekcji). A) DIC B) Fluorescencyjny filtr cyjaninowy 5 C) Fluorescencyjny filtr GFP i D) Fluorescencyjny filtr RFP. Widoczna jest pewna autofluorescencja. Jest ona jednak bardzo słaba w porównaniu z fluorescencyjnymi uniwersalnymi kontrolami ujemnymi z cyjaniną 3, cyjaniną 5 i 6-FAM.

Jeśli potrzebna jest dodatkowa pomoc, prosimy o kontakt z naszą grupą usług technicznych pod adresem oligotechserv@sial.com.

MISSION jest znakiem towarowym firmy Merck KGaA, Darmstadt, Niemcy, i/lub jej podmiotów stowarzyszonych. Label License.

.