PF037

MMP-2, proenzym, ludzki, rekombinowany, komórki myszy

• Synonim(y): Żelatynaza A, żelatynaza 72 kDa, metaloproteinaza macierzy 2
• Numer EC enzymu: 3.4.24.24 (BRENDA, IUBMB)
• Kod UNSPSC: 12352202
• NACRES: NA.77

Właściwości

• rekombinowane: expressed in mouse cell line
• Poziom jakości: 100
• Próba: ≥90% (SDS-PAGE)
• Formularz: liquid
• nie zawiera: preservative
• producent / nazwa handlowa: Calbiochem^®
• warunki przechowywania: OK to freeze; avoid repeated freeze/thaw cycles
• Warunki transportu: wet ice
• temp. przechowywania: −70°C

Opis

Opis ogólny

Rekombinowany ludzki pro-MMP-2 wyrażany w komórkach myszy. Przydatny do immunoblottingu, rozszczepiania substratu i zymografii testowej. Oczyszczony proenzym MMP-2 o masie ~72 kDa może być stosowany jako kontrola pozytywna lub wzorzec do analizy zymograficznej, immunoblottingu lub testów rozszczepiania substratu. Wymaga aktywacji przed użyciem. Metaloproteinazy macierzy są członkami unikalnej rodziny enzymów proteolitycznych, które mają jon cynku w swoich miejscach aktywnych i mogą rozkładać kolageny, elastynę i inne składniki macierzy zewnątrzkomórkowej (ECM). Enzymy te są obecne u zdrowych osób i wykazano, że odgrywają ważną rolę w procesach takich jak gojenie się ran, ciąża i resorpcja kości. Jednak nadekspresja i aktywacja MMP została powiązana z szeregiem procesów patologicznych i stanów chorobowych związanych z rozpadem i przebudową ECM. Choroby te obejmują inwazję i przerzuty nowotworowe, reumatoidalne zapalenie stawów, choroby przyzębia i procesy naczyniowe, takie jak angiogeneza, hiperplazja błony wewnętrznej, miażdżyca i tętniaki. Ostatnio MMP zostały powiązane z chorobami neurodegeneracyjnymi, takimi jak choroba Alzheimera i stwardnienie zanikowe boczne (ALS). Istnieją naturalne inhibitory MMP, tkankowe inhibitory metaloproteinaz macierzy (TIMP), a także opracowano syntetyczne inhibitory, które dają nadzieję na nowe możliwości leczenia tych chorób.



Regulacja aktywności MMP może zachodzić na poziomie ekspresji genów, w tym transkrypcji i translacji, na poziomie aktywacji lub na poziomie hamowania przez TIMP. Zatem zaburzenia w każdym z tych punktów mogą teoretycznie prowadzić do zmian w obrocie ECM. Ekspresja jest ściśle kontrolowana przez cytokiny pro- i przeciwzapalne i/lub czynniki wzrostu, a po wyprodukowaniu enzymy są zwykle wydzielane jako nieaktywne zymogramy. Po aktywacji (usunięciu hamującego regionu propeptydowego cząsteczek) MMP podlegają kontroli przez lokalnie wytwarzane TIMP1. Wszystkie MMP mogą być aktywowane in vitro związkami organomerkurialnymi (np. octanem 4-aminofenylomocznika), ale czynniki odpowiedzialne za fizjologiczną aktywację wszystkich MMP nie zostały jasno zdefiniowane. Liczne badania wskazują, że członkowie rodziny MMP mają zdolność do wzajemnej aktywacji13. Aktywacja MMP in vivo jest prawdopodobnie krytycznym krokiem w zakresie ich biologicznego zachowania, ponieważ to właśnie ta aktywacja przechyli równowagę na korzyść degradacji ECM. Cechą charakterystyczną chorób z udziałem MMP wydaje się być brak równowagi stechiometrycznej między aktywnymi MMP i TIMP, co prowadzi do nadmiernego rozerwania tkanki i często jej degradacji. Określenie mechanizmów, które kontrolują tę nierównowagę, może otworzyć kilka ważnych opcji terapeutycznych specyficznych inhibitorów enzymów.

Opakowanie

Należy zapoznać się z etykietą fiolki, aby uzyskać informacje o stężeniu specyficznym dla partii.

Ostrzeżenie

Toksyczność: Standardowa obsługa (A)

Postać fizyczna

W 150 mM NaCl, 20 mM Tris-HCl, 5 mM CaCl₂, 0,05% detergentu BRIJ^®-35, pH 7,4.

Rekonstytucja

Po wstępnym rozmrożeniu, podzielić i zamrozić (-70°C).

Komentarz do analizy

Aktywność właściwa: Mierzona zdolnością do degradacji żelatyny przy użyciu zymografii. 1 ng enzymu wystarcza do wizualizacji zdegradowanej żelatyny za pomocą niebieskiego barwnika coomassie w zymografii. Aktywowany rhMMP-2 degraduje kolagen typu IV, wizualizowany przez SDS-PAGE i rozszczepia substrat peptydu kumarynowego, (7-metoksy-kumaryno-4-ylo) Acetylo-Pro-Leu-Gly-Leu-(3-[2, 4-dinitrofenylo-L-2, 3-diaminopropionylo)-Ala-Arg-NH2 (nr kat. 03-32-5032), mierzony fluorescencją (wzbudzenie przy 320 nm i emisja przy 405 nm).

Inne uwagi

Buisson-Leqendre, N., et al. 2004. Arth. Rheumat.50, 2151.
Parsons, S.L., et al. 1997. Br. J. Surg.84, 160.
Backstrom, J.R., et al. 1996. J. Neuro.16, 7910.
Lim, G.P., et al. 1996. J. Neurochem.67, 251.
Xia, T., et al. 1996. Biochim. Biophys. Acta1293, 259.
Chandler, S. et al. 1995. Neurosci. Lett.201, 223.
Sang, Q.X., et al. 1995. Biochim. Biophys. Acta1251, 99.
Kenagy, R.D. i Clowes, A.W., 1994. Inhibicja metaloproteinaz macierzy: Therapeutic Potential. Greenwald, R.A. and Golub L.M., Eds. 462.
Kleiner, D.E. and Stetler-Stevenson W.G., 1994. Anal. Biochem.218, 325.
Zempo, N., et al. 1994. J. Vasc. Surg.20, 209.
Birkedal-Hansen, H. 1993. J. Periodontol.64 474.
Stetler-Stevenson, W.G., et al. 1993. FASEB J.7, 1434.
Delaisse, J-M. i Vaes, G. 1992. W Biologia i fizjologia osteoklastów. B.R. Rifkin & C.V. Gay, Eds. 290.
Jeffrey, J.J. 1992. In Wound Healing: Biochemical and Clinical Aspects. R.F. Diegelmann and W.J. Lindblad, Eds. 177.
Jeffrey, J.J. 1991. Semin. Perinatol.15, 118.
Liotta, L.A., et al. 1991. Cell64, 327.
Harris, E. 1990. N. Engl. J. Med.322, 1277.
Heussen, C. and Dowdle, E.B., 1980. Anal. Biochem.102, 196.

Informacje prawne

Brij is a registered trademark of Croda International PLC

CALBIOCHEM is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Informacja o środkach bezpieczeństwa

• Kod klasy składowania: 10 - Combustible liquids
• Klasa zagrożenia wodnego (WGK): WGK 1
• Temperatura zapłonu (°F): Not applicable
• Temperatura zapłonu (°C): Not applicable