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MILLIPLEX®マルチプレックスアッセイとは?
Luminex®マルチプレックスアッセイテクノロジーの概要

研究によって多くのバイオマーカーの重要な役割が明らかになるにつれて、高品質のアッセイと安定した性能を得るために、信頼できるパートナーが必要とされています。MILLIPLEX®マルチプレックスイムノアッセイは、Luminex® xMAP®マルチプレックスアッセイテクノロジーに基づくマルチプレックスバイオマーカーアッセイの最大のポートフォリオです。一貫した高品質の結果を提供することで、研究者が時間、労力、コストを削減しながら最善の仕事ができるようサポートします。これらのアッセイの利点と免疫学、がん、獣医学、代謝/内分泌学などの研究の発展にどのように活用されているかをご覧ください。

マルチプレックスアッセイとは?

マルチプレックスアッセイは、複数のアナライトの測定を1つのパネルにまとめたアッセイです。これらのアッセイは、ELISA(酵素結合免疫吸着検査法)などの1種類のアナライトを測定する分析法と比較して、ワークフローを改善することでサンプルの量と時間を節約できることから、人気が高まりました。 

MILLIPLEX®マルチプレックスアッセイとその原理

MILLIPLEX®マルチプレックスアッセイは、独自のLuminex® xMAP®ビーズを用いたマルチプレックスアッセイプラットフォームを使用します。これらのマルチプレックスアッセイの原理は以下のとおりです。

  • 各MagPlex磁性ビーズは、2つの蛍光色素の500種類の比率の1つで蛍光によりコードされています。スペクトルが異なる各セットは、ビーズ領域と呼ばれ、励起波長635 nmで蛍光を発します。
  • アナライト特異的キャプチャ抗体を特定のビーズ領域のビーズに結合させます。次に、ビーズの未結合部位をブロックします。
  • ビーズをサンプルとインキュベートし、洗浄した後、ビオチン化二次抗体とインキュベートします。
  • 未結合の二次抗体を洗浄し、ストレプトアビジン-フィコエリスリンを添加して、ビオチンに結合させ、「サンドイッチ」イムノアッセイを形成します。
  • Luminex®システムは、個々のビーズをビーズ領域で検出するとともに、アナライトが存在することを示すストレプトアビジン-フィコエリスリン(SAPE)シグナル(励起波長525 nm)を検出します。

図1に、これらのアッセイの原理の図を示します。

Luminex<sup>®</sup>磁気ビーズとフィコエリスリン標識検出抗体を用いたLuminex<sup>®</sup>テクノロジーに基づくMILLIPLEX<sup>®</sup>マルチプレックスアッセイフォーマットの図。

図1.Luminex®テクノロジーに基づくMILLIPPLEX®マルチプレックスアッセイフォーマット

Luminex®検出システムの原理

Luminex®マルチプレックスプラットフォームには、xMAP®INTELLIFLEX、Luminex® 200™、FLEXMAP3Dなど、さまざまな検出システムがあります。これらのLuminex®システムは、ビーズがシース液中を流れてセルを通過する際に、ビーズ領域を同定する赤色レーザー(635 nm)と、結合したアナライトの「サンドウィッチ」を定量する緑色レーザー(525 nm)を用いる、フローサイトメトリーベースのシステムを使用しています。システムには、レーザー、光学系、流体工学、高速デジタルシグナル処理など、xMAP®の主要な検出コンポーネントが統合されています。

個々のマイクロビーズは「ビーズ領域」によって識別され、そのバイオアッセイの結果は蛍光レポーターシグナルに基づいて定量されます。Luminex®のデータ取得ソフトウェアとBelysa® Immunoassay Curve Fitting softwareの高度な解析機能を組み合わせ、すべてのLuminex®システムでデータの取得と解析をシームレスに統合します。Belysa® Immunoassay Curve Fitting softwareは、ほとんどのデータ取得パッケージにはない高度な機能を備えています。自動カーブフィッティング機能、データハイジーン規則、容易なデータ可視化およびスタンダードカーブの比較ツールが例として挙げられ、すべてのデータをさまざまなファイル形式でエクスポートできます。

マルチプレックスビーズをサンプルに添加することにより、各サンプルから複数のアッセイ結果を得ることができます。オープンアーキテクチャーのxMAP®テクノロジーにより、多くの種類のバイオアッセイをマルチプレックス測定できるため、従来の方法に比べて時間、労力、コストを削減できます。

Luminex®マルチプレックスプラットフォームの比較のページをご覧いただき、お客様の研究に適したプラットフォームをお探しください。

MILLIPLEX®マルチプレックスアッセイを選択する理由

MILLIPLEX®マルチプレックスアッセイには、複数のアナライトを同時に検出するために必要なすべての構成品と試薬が含まれており、多くの研究分野において、広範なキット、アナライト、動物種の製品を取り揃えています。以下のようなものがあります。

  • 130種類を超える血中可溶性タンパク質キット
  • 500種類を超える血中アナライト(異なる動物種は数えない)
  • 25種類を超える細胞シグナル伝達タンパク質のプレミックスマルチプレックスキットおよびシングルプレックスキット
  • 120種類を超える細胞シグナル伝達アナライト
  • ヒト、実験動物、コンパニオンアニマル、農業用動物を含む多数の動物種
  • 96および384ウェルフォーマット

マルチプレックスアッセイの利点は、時間、コスト、試薬、サンプルの節約など、無限です。この幅広いポートフォリオによって、次のことが可能になります。

  • 必要なアナライトに対するアッセイを見つける
  • 1つのベンダーからアッセイを購入することで、より一貫性を高める
  • 現在と将来のニーズを満たす柔軟性を維持する
  • 動物モデルを用いた前臨床試験およびヒトサンプルを用いたトランスレーショナル研究において、1つのテクノロジーでバイオマーカーを定量する
  • 1つのテクノロジーを複数の研究分野で使用する

さらに詳しいMILLIPLEX®マルチプレックスイムノアッセイの利点については、こちらの動画をご覧ください。 

すべてのキットにおける品質

何よりもMILLIPLE®アッセイはその品質が際立っています。キットの開発・検証から製造・品質管理に至るまで徹底追及したキットの品質によって、研究者は一貫した信頼性の高い結果を得ることができます。プロトコルに記載されたアッセイの仕様に加えて、私たちはキットの開発・検証プロセスにおいて、他の性能基準(交差反応性、希釈直線性、キット安定性、サンプル検出性およびサンプル安定性など)も評価しています。アッセイ性能とワークフローを念頭に置いてプロトコルを作成し、必要な情報を容易に見つけられるようにしています。これらのキットが備える品質に関する詳細については、高い品質を備えたMILLIPLEX®マルチプレックスキットのページをご覧ください。

マルチプレックスアッセイカスタムサービス

市販のマルチプレックスキットの中には、お客様の研究に必要なものがすべて揃っていないものもあるかと思います。これに対応するため、私たちはMILLIPLEX®マルチプレックスアッセイのカスタムサービスも提供しています。

私たちのカスタムアッセイ開発サービスは以下をサポートします。

  • 新規アナライトの開発
  • 新規アナライトと既存アナライトを組み合わせてマルチプレックス
  • 2つ以上のパネルのアナライトを1つのカスタムパネルにまとめる
  • お客様のサンプルでアッセイをデザイン・検証
  • ロット間の再現性を確保するためのキットのブリッジング

MILLIPLEX®マルチプレックスワークフロー

MILLIPPLEX®アッセイは、Luminex®マルチプレックスアッセイプラットフォームとシームレスに連携するため、測定と解析が容易にできます。また、Biotekプレートウォッシャーなど、マルチプレックスワークフローを強化するための周辺機器も提供しています。

MILLIPPLEX®キットには、Luminex®システムで測定するために必要なすべての試薬が含まれています。サンプルと水を用意するだけで測定できます。

  • 選択可能なキャプチャ抗体磁性ビーズ溶液
  • 簡単に溶解して連続希釈液を調製できる、プレミックスのスタンダードカクテル
  • アッセイ性能を評価するための2種類のプレミックスのクオリティーコントロールカクテル(QC)
  • パネル内で一貫したアナライトプロファイルが得られるようにデザインされたプレミックスの検出抗体カクテル
  • 最適濃度に希釈済みのストレプトアビジン-フィコエリスリン(SAPE)
  • 血清または血漿サンプルで検証済みのキットには、本来のサンプル環境を模倣するために、最適化されたSerum Matrixが含まれています。
  • アッセイにおいて抗体への非特異的結合を軽減させるための独自のブロッキング試薬を含むBead diluent
  • キットに最適化された10X Wash BufferおよびAssay Buffer
  • 96ウェルまたは384ウェルプレート(アッセイフォーマットによる)と2枚のプレートシーラー

注記:MILLIPLEX®細胞シグナル伝達キットは、細胞ライセートサンプルの使用に対応するための別のフォーマットがあります。

注記:MILLIPLEX®抗体検出キットには、血清および血漿サンプル中の抗体を測定するための別のフォーマットがあります。

研究分野

マルチプレックスイムノアッセイは、疾患のメカニズムやプロセスについてより全体像を示すことができるため、さまざまな研究分野において非常に有用です。MILLIPLEX®マルチプレックスアッセイは以下の研究分野において使用されています。

研究目的での使用に限定されます。診断目的では使用しないでください。

MILLIPLEX®アッセイのヒントとコツ

MILLIPLEX®アッセイの実施についてご質問がある場合は、こちらの資料をご確認ください。

関連ウェビナー

MILLIPLEX®アッセイを使用した文献

毎年、何千人もの研究者がMILLPLEX®キットの恩恵を受け、世界中の科学雑誌にその成果を発表しています。研究分野別に注目の高い最近の発表を以下に示します。研究者たちがMILLPLEX®アッセイをどのように使用しているのか、ご覧ください。

研究目的での使用に限定されます。診断目的では使用しないでください。

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