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Merck

A4700

Sigma-Aldrich

モノクローナル抗アクチン マウス宿主抗体

clone AC-40, ascites fluid

別名:

モノクロナール抗アクチン

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About This Item

UNSPSCコード:
12352203
NACRES:
NA.41

由来生物

mouse

品質水準

結合体

unconjugated

抗体製品の状態

ascites fluid

抗体製品タイプ

primary antibodies

クローン

AC-40, monoclonal

分子量

antigen 42 kDa

含みます

15 mM sodium azide

化学種の反応性

human, Xenopus, hamster, mouse, guinea pig, rat, rabbit, snail, sheep, canine, carp, chicken, pig, bovine, viper, goat

テクニック

immunohistochemistry (frozen sections): suitable using methanol-fixed, frozen sections
indirect ELISA: suitable
indirect immunofluorescence: 1:200 using cultured human or chicken fibroblasts
western blot: 1:500 using cultured human or chicken fibroblast extract

アイソタイプ

IgG2a

輸送温度

dry ice

保管温度

−20°C

ターゲットの翻訳後修飾

unmodified

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詳細

アクチンとミオシンは、主要な細胞骨格タンパク質です。アクチンは主に6つのアイソフォームとして発現されます。ヒト γ-アクチン遺伝子は、ヒト染色体17にマッピングされます。
抗体は、全てのアクチンアイソフォームで保存されている、アクチンのC末端に位置するエピトープを認識します。様々な組織及び種のアクチンを特異的に標識します。本抗体によって認識されるエピトープは、ホルマリン固定やパラフィン包埋に抵抗性です。亜鉛-ホルマリン、B5、エタノール、methacarn、BrunnelまたはBouin液も、固定液として使用される可能性があります。′′

モノクローナル抗アクチン(マウスIgG2aアイソタイプ)は、免疫化マウスのマウス骨髄腫細胞と脾細胞の融合によって作成されるAC-40ハイブリドーマに由来します。多抗原ペプチド(MAP)骨格に付着した合成アクチンC末端ペプチドが、免疫原として使用されました。アイソタイプは、マウスモノクローナル抗体アイソタイピング試薬(カタログ番号ISO2)を用いて決定されます。
抗体は、全てのアクチンアイソフォームで保存されている、アクチンのC末端に位置するエピトープを認識します。様々な組織及び種のアクチンを特異的に標識します。 抗体によって認識されるエピトープは、ホルマリン固定とパラフィン包埋に抵抗性を示します。亜鉛-ホルマリン、B5、エタノール、methacarn、Brunnel′又はBouin′液も、固定液として使用されます。
細胞運動に関与する2つの主要細胞骨格タンパク質が、アクチンとミオシンです。アクチンとミオシンは多数の細胞種の構成要素であり、自発運動、分泌、細胞質流動、貪食、細胞質分裂などの細胞過程に関与します。アクチンは、最も保存された真核生物タンパク質の1つですが、哺乳類と鳥類では、電気泳動及びアミノ酸配列分析によって特徴付けられる、少なくとも6つのアイソフォームとして発現されます。

特異性

モノクローナル抗アクチン抗体は、アクチンのC末端に位置するエピトープを認識し、N末端のエピトープは認識しません。このエピトープは全てのアクチンアイソフォームで保存されています。本抗体は、免疫ブロット法(42 kDaにバンド)、培養細胞株の免疫蛍光染色、免疫組織分析において、様々な組織及び種のアクチンを特異的に標識します。ヒト、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ブタ、ウサギ、イヌ、マウス、ラット、モルモット、ハムスター、ニワトリ、コイ、毒ヘビ、カエル、カタツムリとの交差反応が観察されています。本抗体はメタノール固定凍結切片の染色に使用され、抗体によって認識されるエピトープは、ホルマリン固定とパラフィン包埋に抵抗性を示します。亜鉛-ホルマリン、B5、エタノール、methacarn、Brunnel′又はBouin′液も、固定液として使用されます。

免疫原

多抗原ペプチド(MAP)骨格に付着した合成アクチンC末端ペプチド

アプリケーション

モノクローナルウサギ抗アクチンは、次の用途で使用されています:
  • ウエスタンブロッティングを用いたHeLa細胞、乳がん細胞株、白血病細胞株におけるアクチンの検出
  • 免疫蛍光検出法によるヒト線維芽細胞
モノクローナル抗アクチン抗体が、Cos-7細胞溶解物のウエスタンブロット解析において、タンパク質負荷量を等しくするために使用されました。
モノクローナル抗アクチン抗体を一次抗体として、MDCK細胞溶解物のウエスタンブロット解析が行われました。

生物化学的/生理学的作用

アクチンとミオシンは、多くの種類の細胞の成分であり、運動、分泌、細胞質流動、ファゴサイトーシス、および細胞質分裂を含めた細胞プロセスに関与しています。アクチンのN末端領域が主要な抗原性領域であるとみられ、アクチンのミオシンなどの他のタンパク質との相互作用に関与すると考えられます。アクチンの6つのアイソフォームのうち、4つは筋組織の分化マーカーであり、2つはほぼ全ての細胞に存在します。アイソフォームには、3つのαアクチン(骨格、心臓、および平滑筋)、1つのβ−アクチン(β-非筋肉)、および2つのγアクチン(γ平滑筋およびγ非筋肉)があります。アクチンのアイソフォームは、全体では90%以上の配列相同性を示しますが、N末端の残基では50~60%となります。
さまざまな種や組織の細胞内のアクチンは、電気泳動やアミノ酸配列分析によって特徴付けられる免疫学的・物理的性質が非常によく似ています(bulletinより)。これらのアイソフォームは、T細胞活性化時の細胞骨格再構築を仲介します。γ-アクチンおよびβ-アクチン遺伝子の変異は、Baraitser-Winter症候群と呼ばれる発達障害に関連しています。γ-アクチンの変異は難聴を引き起こします。

物理的形状

15 mMのアジ化ナトリウムを保存剤として含む腹水として提供されます。

保管および安定性

継続して使用する場合、2~8℃で保存し、1ヵ月まで使用できます。長期保存する場合は、溶液を作業用の一定分量に分けて凍結することができます。凍結及び融解の繰り返し、又は「霜取り不要」冷凍庫の使用は推奨されません。長期の保存でわずかな濁りが生じた場合、使用前に遠心分離し、溶液をクリアにしてください。

その他情報

アクチン抗体選択ガイドにつきましては、www.sigmaaldrich.com/actinをご確認ください。

免責事項

弊社の製品は、弊社カタログや製品に付随する他社の文書において別段の記述がない限り、研究での用途のみを目的としており、他のいかなる目的、例えばこれに限るものではありませんが、許可されていない商用利用、in vitro診断での利用、ex vivo若しくはin vivoでの治療用途、又はヒト若しくは動物へのいかなる種類の消費若しくは応用にも使用できません。

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保管分類コード

11 - Combustible Solids

WGK

WGK 1


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