RAP-RO

rAPid アルカリホスファターゼ

1 units/μg protein, optimum reaction temp. 37 °C

• 別名: アルカリホスファターゼ、DNA断片のクローン
• Enzyme Commission number: 3.1.3.1 (BRENDA, IUBMB)
• UNSPSCコード: 12352204
• NACRES: NA.21

特性

• 由来生物: bovine intestine
• 品質水準: 100
• リコンビナント: expressed in Pichia pastoris
• 形状: liquid
• 比活性: 1 units/μg protein
• 分子量: monomer 56 kDa by SDS-PAGE
• 包装: pkg of 1,000 U (04898133001 [1 U/μl]); pkg of 5,000 U (04898141001 [1 U/μl])
• メーカー／製品名: Roche
• 濃度: <0.1 % (w/w)
• パラメーター: 37 °C optimum reaction temp.
• テクニック: molecular cloning: suitable
• 色: colorless
• pH: 7.6-8.5 (68 °F)
• 溶解性: water: miscible
• 適合性: suitable for molecular biology
• NCBIアクセッション番号: QBZ39068
• UniProtアクセッション番号: P09487; ; P09487
• アプリケーション: life science and biopharma
• その他の活性: Nicking activity, none detected (up to 20 µl enzyme using pBR322-DNA/ 16h / 37°C); unspecific endonuclease, none detected (up to 20 µl enzyme using Lambda-DNA 16 h/37 °C)
• 保管温度: −20°C
• 遺伝子情報: bovine ... ALPI(280993)

詳細

詳細

rAPidアルカリホスファターゼは、ウシ膵臓から分離されたアルカリホスファターゼであり、酵母菌のピキア・パストリスと表記される56 kDの再結合酵素として供給されます。再結合フォームにより、耐久性と安全性が保証されます。rAPidアルカリホスファターゼは、5′リン酸塩のDNAおよびRNA、ヌクレオチド、およびたんぱく質からの脱リン酸化に触媒作用を及ぼします。アルカリホスフォターゼ処理によって、リガーゼに必要な5′-ホスホリル終端の除去によりDNA断片の自己核酸連結が防止されます。この特徴は、ベクトルバックグラウンドを減少させるためのクローン戦略においてもっとも重要です。ウシ腸ホスファターゼと異なり、rAPidアルカリホスファターゼは、+75°Cで2分間の熱処理により急速に、完全に、かつ不可逆的に不活性化されます。 したがって、これはShrimp Alkaline Phosphataseの代替品として優れています。さらに、本酵素は制限酵素バッファー内で活性です。したがって、制限酵素分解、脱リン酸化、酵素不活性化、核酸連結、または5′-終端ラベリングは、精製工程なしで実行可能です。

特異性

アルカリホスファターゼは、第一級および第二級アルコール、サッカライド、環状アルコール、フェノール、アミン等の多くのホスファターゼエステルの加水分解に触媒作用を及ぼします。ホスホジエステラーゼは反応しません。酵素は、無機ピロホスフェイトを加水分解します。酵素の運動特性は、酵素の純度、分析中の酵素の濃度、緩衝剤、pH等の多くの因子に依存します。
熱による不活性化：RAPidアルカリホスファターゼは75°Cで2分間の保温により不活性化されます。

アプリケーション

• 以下を含む多くのアプリケーションでRAPidアルカリホスファターゼが使用できます。核酸からの5′-ホスホリルグループの除去。
• 5′-終端ラベリング用のテンプレートの準備。
• dNTPsの除去によるPCR製品の洗浄。
• たんぱく質の脱リン酸化。

注記：rAPidアルカリホスフォターゼは、+75 °Cで2分間加熱されると急速に不活性化します。制限および脱リン酸化後には、付加的な精製工程は不要です。脱リン酸化されたDNAは、核酸連結反応で直接的に使用可能です。
注記： rAPidアルカリホスフォターゼはまた、迅速で効率的な脱リン酸化および、粘着性またはブラント端のDNA断片の核酸連結を可能にする、 Rapid DNA Dephos &核酸連結キットにも含まれます。この便利なキットによって、ブラントで粘着性の5′-突出端の脱リン酸化が+37°C で10分間以内に実行され、核酸連結は +15–25°Cでちょうど5分間で完了します。

特徴および利点

• 汚染リスクの除去：組換体発現、および高信頼性かつ高感度の品質管理試験により、高純度が保証されます。
• 現在使用中のホスファターゼを安価なソリューションに交換しましょう： rAPidアルカリホスファターゼは、Shrimp Alkaline Phosphatase またはBovine Alkaline Phosphataseと同等の働きをします。
• 動物起因の病気の除去：ピキア・パストリスにおける発現により、耐久性および安全性が保証されます。
• 急速な熱不活性化による利点：rAPidアルカリホスファターゼは、+75°Cで2分間加熱するだけで不活性化されます。
• 一貫した結果を得ること：rAPidアルカリホスファターゼは、他のアルカリホスファターゼと比べて、保管中の優れた安定性を有します。

包装

一つのキットは二つの部品を有します。

品質

rAPidアルカリホスファターゼの全ロットは、最新の品質管理手順に基づいて、デオキシリボヌクレアーゼの不在およびニッキング活性について試験されます。

単位の定義

RAPidアルカリホスファターゼの一単位は、分析条件下において+37°Cで1分間、1モルの4-ニトロフェニルホスファターゼを加水分解する酵素活性です。

体積活性：1 U/μl

その他情報

生命科学研究用途に限ります。診断措置において使用しないでください。

キットの構成要素のみ

• rAPid Alkaline Phosphatase Buffer 10x concentrated
• rAPid Alkaline Phosphatase 1 U/μl

安全性情報

• 保管分類コード: 12 - Non Combustible Liquids
• WGK: WGK 1
• 引火点(°F): does not flash
• 引火点(℃): does not flash