HPPIKRO

ハイピュアプラスミドアイソレーションキット

Roche, pkg of 50 purifications (11754777001), pkg of 250 purifications (11754785001)

• UNSPSCコード: 41105500

特性

• メーカー／製品名: Roche
• 品質水準: 100
• 包装: pkg of 250 purifications (11754785001); pkg of 50 purifications (11754777001)

詳細

詳細

低から中程度の処理能力、ミニスケール、プラスミド単離。

ハイピュアプラスミドアイソレーションキットは、RNA汚染がない大腸菌由来の高純度のプラスミドDNAの作製によく用いられるアルカリ細胞溶解法を使用して少量の高純度プラスミドDNAを単離します。

核酸はカオトロピック塩（グアニジン HCl）の存在下でガラス繊維フリースの表面に結合します。これによって、ハイピュアフィルターチューブは、核酸に汚染物質が無い場合、ヌクレイン酸（DNAおよびRNA両方）を特異的に固定することが可能となります：

能力：High Pure Spin Filter Tubes（ハイピュアスピンフィルターチューブ）は、最大700 µLのサンプル容量を保持することができます。
サンプル：0.5～4.0 mLの大腸菌の培養液（1.5～5.0A ₆₀₀単位/mLの密度で収穫）

アプリケーション

ハイピュアプラスミドアイソレーションキットは細菌培養物から最大15 gの精製プラスミドDNAを調製します。この精製プラスミドDNAはほとんどの分子生物学応用に直接使用することができます：

• PCR
• 塩基配列決定法
• クローニング
• in vitro転写
• 制限酵素消化
• ランダムプライムラベリング

特徴および利点

• 30分以内で最大24個のプラスミドサンプルを素早く精製します。
• DNAを分解する沈殿または他の処理工程無しに汚染物質を除去するキットを用いてDNAの損失を最小化します。
• プラスミドDNAに予測できない作用をさせるRNAおよび他の不純物を除去するキットを用いて下流用途における信頼性および再現性を改善します。
• 塩化セシウム、フェノール、クロロホルムおよびエチジウムブロミドのような有害な有機化合物が不要になります。

構成

• 懸濁緩衝液
• RNアーゼA 、乾燥粉末
• 細胞溶解緩衝液
• 結合緩衝液
• 洗浄緩衝液I
• 洗浄緩衝液II
• 溶出緩衝液
• ハイピュアスピンフィルターチューブ（ガラス繊維フリースを含む）
• 捕集チューブ

品質

プラスミドpUC19（4.5 µg）は、16時間アンピシリンを含むLB培地で増殖した大腸菌jM ₈₃の1.5 mL懸濁液から細胞密度5 A₆₀₀単位/mLに精製されます。1 µgの精製プラスミドDNAを5単位の制限エンドヌクレアーゼEco RIと37°Cで1時間インキュベートし、次いでアガロースゲル電気泳動によって分析します。単離されるプラスミドDNAはCsCl密度遠心によって単離されたプラスミドDNAと同じぐらい制限エンドヌクレアーゼ消化に敏感です。

調製ノート

このキットはバクテリアから遊離プラスミドDNAを放出するアルカリ細胞溶解に依拠しています。RNアーゼによって溶解質中のすべてのRNAを除去します。細胞の血液成分屑および（トラップされた）ゲノムDNAを遠心分離によって除去した後、残存する上澄みをカオトロピック塩と混合して、ハイピュアスピンフィルターチューブのガラス繊維フリースに塗布します。この 手順で用いられる緩衝液条件の下で、プラスミドはガラス繊維フリースに結合しますが、一方で汚染物質（塩、タンパク質および他の細胞汚染物）は結合しません。これらの汚染物質は短時間の洗浄およびスピンの工程で容易に除去されます。精製されると、プラスミドは少量の低塩緩衝液または水で容易に溶出することができます。

その他情報

ハイピュアテクノロジーおよびシリカ吸着キット

生命科学研究専用です。診断手順には使用しません。

安全性情報

• ピクトグラム: GHS05,GHS07
• シグナルワード: Danger
• 危険有害性情報: H302 + H332 - H314
• 注意書き: P261 - P280 - P301 + P330 + P331 - P303 + P361 + P353 - P304 + P340 + P310 - P305 + P351 + P338 + P310
• 危険有害性の分類: Acute Tox. 4 Inhalation - Acute Tox. 4 Oral - Eye Dam. 1 - Skin Corr. 1
• 保管分類コード: 8B - Non-combustible, corrosive hazardous materials
• WGK: WGK 1
• 引火点(°F): Not applicable
• 引火点(℃): Not applicable