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Merck

P6782

Sigma-Aldrich

过氧化物酶 来源于辣根

Type VI-A, essentially salt-free, lyophilized powder, ≥250 units/mg solid (using pyrogallol), 950-2000 units/mg solid (using ABTS)

别名:

供体:过氧化氢氧化还原酶, 辣根过氧化物酶

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About This Item

CAS号:
EC號碼:
MDL號碼:
分類程式碼代碼:
12352204
eCl@ss:
32160410
NACRES:
NA.54

種類

Type VI-A

品質等級

形狀

essentially salt-free, lyophilized powder

比活性

≥250 units/mg solid (using pyrogallol)
950-2000 units/mg solid (using ABTS)

分子量

~44 kDa

溶解度

0.1 M phosphate buffer: soluble 10 mg/mL, clear, orange to red (pH 6.0)
H2O: soluble

應用

diagnostic assay manufacturing

儲存溫度

2-8°C

InChI

1S/H2O3/c1-3-2/h1-2H

InChI 密鑰

JSPLKZUTYZBBKA-UHFFFAOYSA-N

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一般說明

辣根过氧化物酶是从辣根(Amoracia rusticana)中分离出来的,属于过氧化物酶的铁原卟啉基团。HRP是含有四个二硫键的单链多肽。它是一种含有18%碳水化合物的糖蛋白。碳水化合物由半乳糖、阿拉伯糖、木糖、岩藻糖、甘露糖、甘露糖胺和半乳糖胺组成,具体取决于特定同工酶。其分子量(约44 kDa)包括多肽链(33,890道尔顿)、氯化血红素加Ca2+ (约700道尔顿)和碳水化合物(约9,400道尔顿)。至少存在7种HRP同工酶。 辣根过氧化物酶同工酶的等电点范围为3.0-9.0。

應用

Sigma的酶已被用于开发快速、灵敏且具有长期稳定性的半乳糖氧化酶-过氧化物酶生物传感器,以便检测半乳糖。它已被用作含有3,3′,5,5′-四甲基联苯胺(TMB)的培养基(MRS琼脂板)的组分,用于乳酸菌的生长。TMB是过氧化物酶的显色底物。过氧化物酶将乳酸菌产生的H2O2 催化分解为O2,并且TMB在O2存在下将菌落染成蓝色。因此,在含5% CO2 的空气环境下孵育48小时后,MRS琼脂上产生H2O2 的菌落呈深蓝色。不产生H2O2 的菌落仍为无色。它已被用于研究聚乙烯醇对辣根过氧化物酶的稳定作用。它还被用于测定溶液中的葡萄糖 和过氧化物
辣根过氧化物酶(HRP)分离自辣根中(Amoracia rusticana)。 它可用于生物化学应用,如蛋白质印迹、ELISA和免疫组织化学。 辣根过氧化物酶可用于扩增弱信号并增加靶分子(例如蛋白质)的可检测性。 产品P6782是VI-A型,本质上是一种无盐冻干粉。 它被用于定量胆固醇和胆固醇酯,并用于研究水凝胶和硅水凝胶隐形眼镜的体外脂质沉积

生化/生理作用

HRP容易与过氧化氢(H2O2)结合,生成的[HRP-H2O2]配合物可以氧化多种氢供体。该酶的最适pH为6.0-6.5,在5.0-9.0的pH范围内最稳定。HRP可以通过几种不同的方法与抗体结合,包括使用戊二醛、高碘酸盐氧化、二硫键以及氨基和巯基定向交联剂。它比酶标记物β-半乳糖苷酶和碱性磷酸酶更小、更稳定。因此,它是最理想的标记物。同时,其糖基化会产生较低的非特异性结合。已有研究发现叠氮化钠、氰化物、L-胱氨酸、重铬酸盐、亚乙基硫脲、羟胺、硫化物、钒酸盐、对氨基苯甲酸以及 Cd2+、Co2+、Cu2+、Fe3+、Mn2+、Ni2+和Pb2+离子可抑制该酶活性。
辣根过氧化物酶与底物一起孵育时,产生一种有色、荧光或发光的标记分子衍生物,以便可以定量。 辣根过氧化物酶已被证明能抑制cydAB突变,使其突变水平稍微降低。

包裝

包装单位为mg固体

聯結

与P8375相似

單位定義

一个ABTS单元将在25°C、pH 5.0条件下每分钟氧化1 μM的ABTS
一个连苯三酚单元将在20℃、pH 6.0条件下,在20秒内从连苯三酚形成1.0mg的红棓酚。

準備報告

本品以1 mg/mL的浓度溶于0.1 M磷酸盐缓冲液(pH 6.0)中,可在室温下保持活性至少两周。该溶液在5次冻融循环后仍保留活性。

分析報告

RZ(Reinheitszahl)是指溶于去离子水中的酶(0.5–1.0 mg/ml)的吸光度比值A403/A275 。 它是血红素含量的量度,而不是酶活性。 即使是RZ值较高的制剂也可能具有较低的酶活性。
本品使用ABTS测定,以便与其他供应商的单位进行比较:每mg固体约1,000单位

其他說明

有关过氧化物酶的更多信息,请访问 www.sigma-aldrich.com/enzymeexplorer

象形圖

Health hazard

訊號詞

Danger

危險聲明

防範說明

危險分類

Resp. Sens. 1

儲存類別代碼

11 - Combustible Solids

水污染物質分類(WGK)

WGK 1

個人防護裝備

Eyeshields, Gloves, type N95 (US)


分析证书(COA)

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Chiara Marabelli et al.
Cell reports, 27(2), 387-399 (2019-04-11)
LSD1 and LSD2 are homologous histone demethylases with opposite biological outcomes related to chromatin silencing and transcription elongation, respectively. Unlike LSD1, LSD2 nucleosome-demethylase activity relies on a specific linker peptide from the multidomain protein NPAC. We used single-particle cryoelectron microscopy (cryo-EM)
Rapid and sensitive galactose oxidase-peroxidase biosensor for galactose detection with prolonged stability
Tkac J, et al.
Biotechnol. Tech., 13(12), 931-936 (1999)
Stabilization effect of polyvinyl alcohol on horseradish peroxidase, glucose oxidase, β-galactosidase and alkaline phosphatase.
Boyd S, et al.
Biotechnol. Tech., 10(9), 693- 698 (1996)
From Concept to Product Development
Enzyme Immunoassay, 169-171 (1996)
Zollner, H.
Handbook of Enzyme Inhibitors, 1993, 367-368 null

实验方案

Reinheitszahl (RZ) is the ratio of absorbance due to hemin (A403, Soret region) to absorbance due to protein (A275).

This procedure is for the determination of Peroxidase enzymatic activity using Pyrogallol as the substrate.

This procedure is for the determination of Peroxidase enzymatic activity using Pyrogallol as the substrate.

To standardize a procedure for the assay of Peroxidase using 2,2'-Azino-bis(3-Ethylbenzthiazoline-6-Sulfonic Acid) as a substrate.

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