Test di sterilità

Metodi di analisi della sterilità nel settore farmaceutico

I metodi compendiali per il test di sterilità dei prodotti farmaceutici richiedono che i campioni vengano coltivati ​in due terreni separati. Nei test di sterilità vengono utilizzati due diversi tipi di terreni di coltura per promuovere la crescita sia dei batteri anaerobi che di batteri aerobi e funghi. Per la coltura di batteri anaerobi e di alcuni tipi di batteri aerobi si utilizza generalmente il terreno fluido al tioglicolato (FTM) mentre per la coltura di funghi e batteri aerobi si ricorre al terreno al digerito di soia e caseina (SCDM). I campioni vengono incubati per 14 giorni, rispettivamente a 32,5°C e 22,5°C prima dell'osservazione. L’eventuale torbidità del terreno di coltura può indicare una crescita e deve essere quindi valutata. Sono due i metodi consigliati per il test di sterilità dei prodotti farmaceutici: la filtrazione su membrana e l’inoculo diretto.

Test di sterilità mediante filtrazione su membrana

Il test di sterilità mediante filtrazione su membrana è considerato dalla legislazione il metodo elettivo per l’analisi della sterilità dei prodotti farmaceutici filtrabili, come riportato nelle USP <71>, Farmacopea Europea <2.6.1> e Farmacopea Giapponese <4.06>. I campioni vengono filtrati attraverso una membrana da 0,45 µm e raccolti in un canister a cui si aggiunge del terreno di coltura per la successiva incubazione. Questo metodo è in grado di offrire una maggiore sensibilità rispetto ad altre procedure poiché l'intero campione o un campione composito viene filtrato attraverso un singolo filtro. La filtrazione consente inoltre di lavare via i componenti presenti nel campione che possono causare torbidità o inibire la crescita, come ad esempio antibiotici o conservanti.

Test di sterilità mediante inoculo diretto

Nell'inoculo diretto, un piccolo volume viene prelevato in modo asettico dal campione, inoculato direttamente in un adeguato volume di terreno di crescita e incubato. Sebbene semplice, questo metodo di analisi presenta alcune limitazioni significative. Solo piccoli volumi di prodotto possono essere inoculati nel terreno di coltura, limitando la sensibilità del test. Se il campione appare torbido già dopo l'inoculo, può essere difficile rilevare la torbidità dovuta alla crescita microbica alla fine del periodo di incubazione. Inoltre, se il prodotto ha proprietà antimicrobiche, il campione deve essere neutralizzato in modo che non inibisca la crescita microbica.

Metodi per il test di sterilità di dispositivi medici

Il metodo per trasferimento diretto è l'approccio raccomandato per il test di sterilità dei dispositivi medici. Il dispositivo da testare è posto in contatto diretto con il terreno durante tutto il periodo di incubazione in modo che eventuali microrganismi presenti all'interno o sulla superficie del dispositivo possano crescere e proliferare. Il test di sterilità mediante flussaggio del prodotto è da preferire per i prodotti che comprendono tubi cavi, come i prodotti per trasfusione e infusione in cui il percorso del fluido deve essere sterile. Il lume del prodotto viene lavato con un fluido di risciacquo, l'eluito viene quindi filtrato su membrana e si procede con l’incubazione in un terreno adatto.

Flusso di lavoro del test di sterilità