COLLA-RO
Roche
Colagenase A
from Clostridium histolyticum
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About This Item
Produtos recomendados
fonte biológica
Clostridium histolyticum
Nível de qualidade
esterilidade
non-sterile
forma
lyophilized
atividade específica
>0.15 U/mg lyophilizate (Collagenase activity)
embalagem
pkg of 100 mg (10103578001)
pkg of 2.5 g (11088793001)
pkg of 500 mg (10103586001)
fabricante/nome comercial
Roche
concentração
1 mg/mL (0.1%, w/v)
cor
brown
pH ideal
6.0-8.0
solubilidade
water: soluble
adequação
suitable for PCR
nº de adesão NCBI
nº de adesão UniProt
aplicação(ões)
cell analysis
life science and biopharma
sample preparation
atividade externa
Clostripain 9.489 U/mg
Proteases 6.067 U/mg (Azocoll )
Trypsin 0.144 U/mg (with BAEE)
temperatura de armazenamento
2-8°C
Informações sobre genes
Clostridium histolyticum ... COLA_1(1668506084)
Descrição geral
A colagenase é uma protease que cliva a proteína em tripla-hélice chamada colágeno. O Clostridium histolyticum produz seis tipos de colagenases, a saber α, β, γ, δ, ε e λ. Essas colagenases são ativas contra o tecido conjuntivo e apresentam maior reatividade em relação à gelatina que ao colágeno. A colagenase obtida de Clostridium histolyticum tem uma atividade muito forte, já que digere colágeno das duas extremidades, em temperaturas que chegam a 4-10 °C.
Especificidade
A colagenase degrada o colágeno nativo. Clostripaína, enzimas semelhantes à tripsina e proteases neutras também degradam outras proteínas.
Atividade enzimática:
Atividade da colagenase: >0,15 U/mg (segundo Wünsch) (+25 °C, 4-fenil-azobenzil-oxicarbonil-Pro-Leu-Gli-Pro-D-Arg como substrato)
Atividades enzimáticas contaminantes: tripsina, clostripaína e atividade proteolítica neutra
A colagenase A tem uma proporção equilibrada de atividades enzimáticas.
Atividade enzimática:
Atividade da colagenase: >0,15 U/mg (segundo Wünsch) (+25 °C, 4-fenil-azobenzil-oxicarbonil-Pro-Leu-Gli-Pro-D-Arg como substrato)
Atividades enzimáticas contaminantes: tripsina, clostripaína e atividade proteolítica neutra
A colagenase A tem uma proporção equilibrada de atividades enzimáticas.
Aplicação
A colagenase de C. histolyticum é amplamente usada para:
- Desagregação de muitos tipos de tecidos (por exemplo, pulmão, coração, músculos, ossos, tecido adiposo, fígado, rins, cartilagem, glândula mamária, placenta, vasos sanguíneos, cérebro, tumores, cordão umbilical)
- preparação de suspensões de célula única para o estabelecimento de sistemas de cultura de células primárias. A colagenase A é recomendada quando o rendimento, a viabilidade e a funcionalidade são importantes.
- Preparação de células de vários tipos de tecido, como hepatócitos, adipócitos, ilhotas pancreáticas, células epiteliais, células musculares, células endoteliais etc. No entanto, a adequação de cada lote da enzima para o rompimento de um tecido específico deve ser determinada empiricamente.
Definição da unidade
Conteúdo
Liofilizado, não estéril
Liofilizado, não estéril
Definição de unidade: A colagenase da Roche é determinada em unidades de Wünsch (1 μmol de produto formado por minuto a +25 °C com substrato de Wünsch).
Frequentemente, as atividades de colagenase são fornecidas em unidades de Mandl (1 μmol de leucina liberada do colágeno em 5 horas a +37 °C).
Infelizmente, não existe um fator de conversão consistente entre as duas unidades de atividade, já que a unidade de Mandl depende, em parte, da concentração das proteases contaminantes no preparo da colagenase, uma variável indefinível. De fato, um preparo mais puro de colagenase geraria uma menor atividade específica em unidades de Mandl que o preparo bruto. Os preparados de Clostridium costumam gerar fatores de conversão de cerca de 1:1800 (p.ex., um lote específico de colagenase de Clostridium contém cerca de 0,15 unid. de Wünsch/mg e 250 unid. de Mandl/mg).
Frequentemente, as atividades de colagenase são fornecidas em unidades de Mandl (1 μmol de leucina liberada do colágeno em 5 horas a +37 °C).
Infelizmente, não existe um fator de conversão consistente entre as duas unidades de atividade, já que a unidade de Mandl depende, em parte, da concentração das proteases contaminantes no preparo da colagenase, uma variável indefinível. De fato, um preparo mais puro de colagenase geraria uma menor atividade específica em unidades de Mandl que o preparo bruto. Os preparados de Clostridium costumam gerar fatores de conversão de cerca de 1:1800 (p.ex., um lote específico de colagenase de Clostridium contém cerca de 0,15 unid. de Wünsch/mg e 250 unid. de Mandl/mg).
Nota de preparo
Ativador: Ca2+
Inibidores:
Inibidores de colagenase: EDTA, EGTA, Cis, His, DTT, 2-mercapto-etanol
A colagenase não é inibida pelo soro.
Inibidores de clostripain: TLCK
Inibidores de tripsina: aprotinina, inibidor de tripsina (clara de ovo, soja), soro
Concentração de trabalho: 0,5 a 2,5 mg/ml
Condições de armazenamento (solução de trabalho): -15 ºC a -25 °C
A Roche recomenda reconstituir apenas a quantidade de liofilizado necessária para uso imediato. A solução reconstituída pode ser armazenada a -15 ºC a -25 °C por até uma semana. Evite o congelamento e descongelamento repetido, uma vez que a atividade diminui após cada reconstituição.
Inibidores:
Inibidores de colagenase: EDTA, EGTA, Cis, His, DTT, 2-mercapto-etanol
A colagenase não é inibida pelo soro.
Inibidores de clostripain: TLCK
Inibidores de tripsina: aprotinina, inibidor de tripsina (clara de ovo, soja), soro
Concentração de trabalho: 0,5 a 2,5 mg/ml
Condições de armazenamento (solução de trabalho): -15 ºC a -25 °C
A Roche recomenda reconstituir apenas a quantidade de liofilizado necessária para uso imediato. A solução reconstituída pode ser armazenada a -15 ºC a -25 °C por até uma semana. Evite o congelamento e descongelamento repetido, uma vez que a atividade diminui após cada reconstituição.
Reconstituição
Reconstituição em qualquer solução salina balanceada (como HBSS)
Armazenamento e estabilidade
Mantenha o recipiente hermeticamente fechado, em local seco e bem ventilado
Outras notas
Somente para fins de pesquisas biológicas. Não é destinado ao uso em procedimentos diagnósticos.
As condições de envio podem variar
Palavra indicadora
Danger
Frases de perigo
Declarações de precaução
Classificações de perigo
Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
Órgãos-alvo
Respiratory system
Código de classe de armazenamento
11 - Combustible Solids
Classe de risco de água (WGK)
WGK 1
Ponto de fulgor (°F)
does not flash
Ponto de fulgor (°C)
does not flash
Certificados de análise (COA)
Busque Certificados de análise (COA) digitando o Número do Lote do produto. Os números de lote e remessa podem ser encontrados no rótulo de um produto após a palavra “Lot” ou “Batch”.
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