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COLLD-RO

Roche

Colagenase D

from Clostridium histolyticum

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About This Item

Número da licença da enzima:
Código UNSPSC:
12352204

fonte biológica

Clostridium histolyticum

Nível de qualidade

esterilidade

non-sterile

forma

lyophilized

collagenase activity

>0.15 U/mg lyophilizate

embalagem

pkg of 100 mg (11088858001)
pkg of 2.5 g (11088882001)
pkg of 500 mg (11088866001)

fabricante/nome comercial

Roche

concentração

(working concentration: 0.5 - 2.5 mg/ml)

técnica(s)

tissue processing: suitable

cor

light brown

pH ideal

6.0-8.0

solubilidade

water: soluble

nº de adesão NCBI

aplicação(ões)

cell analysis

atividade externa

Clostripain 0.060 U/mg
Proteases 8 U/mg ( Azocoll)
Trypsin <0.2 U/mg (with BAEE)

temperatura de armazenamento

2-8°C

Descrição geral

A colagenase D é preparada a partir de culturas de Clostridium histolyticum por filtração, precipitação de sulfato de amônio, diálise e liofilização.

Especificidade

A colagenase degrada o colágeno nativo. Clostripain, enzimas como a tripsina e proteases neutras também degradam outras proteínas.

Aplicação

A colagenase de C. histolyticum é amplamente usada para desagregação de vários tipos de tecidos (p. ex.,, pulmão, coração, músculos, ossos, tecido adiposo, fígado, rins, cartilagem. glândulas mamárias, placenta, vasos sanguíneos, cérebro, tumores) e para o preparo de suspensões de célula única para o estabelecimento de sistemas de cultura celular primária. A colagenase D é recomendada quando a funcionalidade e a integridade das proteínas de superfície celular são importantes.
A colagenase de Clostridium da Roche foi usada para preparar células de vários tipos de tecido, como hepatócitos, adipócitos, ilhotas pancreáticos, células epiteliais, células musculares, células endoteliais, etc. Contudo, a adequação de cada lote da enzima para perturbação de um tecido específico deve ser determinada empiricamente.

Características e benefícios

Conteúdo
Liofilizado, não estéril

Definição da unidade

A colagenase da Roche é medida em unidades Wünsch (1 μmol de produto formado por minuto a +25 °C com substrato Wünsch).
Frequentemente, as atividades da colagenase são representadas em unidades de Mandl (1 μmol de leucina liberada do colágeno em 5 horas a +37 ºC).
Infelizmente, não existe um fator de consistente entre as duas unidades de atividade, uma vez que a unidade de Mandl depende, em parte, da concentração de proteases contaminantes no preparo da colagenase, uma variável indefinível. Um preparado de colagenase mais puro resultaria, na verdade, em uma atividade específica menor em unidades de Mandl do que o preparado bruto. Preparados de Clostridium tipicamente geram fatores de conversão de cerca de 1:1800 (p. ex., um determinado lote de colagenase de Clostridium continha cerca de 0,15 Wünsch U/mg e 250 Mandl U/mg).

forma física

Liofilizado, não estéril.

Nota de preparo

Ativador: Ca2+
Concentração de trabalho: 0,5-2,5 mg/ml
Condições de armazenamento (solução de trabalho): -15 ºC a -25 °C
A Roche recomenda reconstituir apenas a quantidade de liofilizado necessária para uso imediato. A solução reconstituída pode ser armazenada a -15 ºC a -25 °C por até uma semana. Evite o congelamento e descongelamento repetido, uma vez que a atividade diminui após cada reconstituição.

Inibidores:

Inibidores de colagenase: EDTA, EGTA, Cis, His, DTT, 2-mercaptoetanol
A colagenase não é inibida pelo soro.
Inibidores de clostripain: TLCK
Inibidores da tripsina: aprotinina, inibidor da tripsina (clara de ovos, soja)

Atividade enzimática:
Atividade da colagenase: >0,15 U/mg (segundo Wünsch) (+25 °C, 4-fenil-azobenzil-oxicarbonil-Pro-Leu-Gli-Pro-D-Arg como o substrato)
Atividades enzimáticas contaminantes: tripsina, clostripain e atividade proteolítica total
A colagenase D tem uma atividade de colagenase de normal a alta e atividade tríptica muito baixa) (em geral <0,2 unidades/mg, BAEE como substrato).

Reconstituição

Reconstituição em solução salina balanceada (p. ex., HBSS)

Armazenamento e estabilidade

Armazenar ao abrigo da luz.

Outras notas

Somente para fins de pesquisas biológicas. Não é destinado ao uso em procedimentos diagnósticos.

Pictogramas

Exclamation markHealth hazard

Palavra indicadora

Danger

Classificações de perigo

Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3

Órgãos-alvo

Respiratory system

Código de classe de armazenamento

11 - Combustible Solids

Classe de risco de água (WGK)

WGK 1

Ponto de fulgor (°F)

does not flash

Ponto de fulgor (°C)

does not flash


Certificados de análise (COA)

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