Hodowla hematopoetycznych komórek macierzystych i odpornościowych
- Komórki macierzyste układu krwiotwórczego
- Monocyty ludzkie.
- ludzkie komórki jednojądrzaste (PBMC)
- ludzkie makrofagi
- Człowiecze komórki dendrytyczne
- Komórki zrębu dla komórek T.Stromal Cells for T-Cell Differentiation
Hematopoetyczne komórki macierzyste (HSC) dają początek wszystkim typom komórek krwi, w tym linii mieloidalnej i limfoidalnej. Komórki szpikowe obejmują monocyty, makrofagi, neutrofile, bazofile, eozynofile, erytrocyty, komórki dendrytyczne i megakariocyty lub płytki krwi. Komórki limfoidalne obejmują limfocyty T, limfocyty B i komórki naturalnych zabójców. HSC znajdują się w szpiku kostnym dorosłych, krwi pępowinowej, łożysku i zmobilizowanej krwi obwodowej. Ostatnie postępy w biologii krwiotwórczych komórek macierzystych zaowocowały wykorzystaniem przeszczepów HSC w leczeniu nowotworów i innych zaburzeń układu odpornościowego. Oferujemy szeroką gamę narzędzi, komórek i zoptymalizowanych pożywek do ekspansji bez surowicy do hodowli ludzkich hematopoetycznych komórek macierzystych CD34+ i innych typów ludzkich komórek odpornościowych, w tym monocytów CD14+, komórek jednojądrzastych (PBMC), makrofagów, komórek dendrytycznych i limfocytów T.

Rysunek 1. Etapy hematopoezy.W procesie hematopoezy wszystkie komórkowe składniki krwi pochodzą z krwiotwórczych komórek macierzystych.
Hematopoetyczne komórki macierzyste
CD34+ Hematopoietic Progenitor Cells
CD34 jest markerem ludzkich HSC. Cała aktywność tworzenia kolonii ludzkich komórek szpiku kostnego (BM) znajduje się we frakcji komórek progenitorowych CD34+. Kliniczne badania transplantacyjne, w których wykorzystano wzbogacone komórki CD34+ BM, wykazały obecność HSC z długoterminową zdolnością do rekonstytucji BM w tej frakcji. Oferujemy kriokonserwowane hematopoetyczne komórki progenitorowe CD34+ izolowane z krwi pępowinowej zdrowych ludzkich dawców. Komórki progenitorowe CD34+ zawierają dwie główne subpopulacje komórkowe, hematopoetyczne i śródbłonkowe komórki progenitorowe. Dlatego komórki progenitorowe CD34+ są odpowiednie do szeregu badań, w tym ukierunkowanego różnicowania w bardziej zaangażowane typy komórek krwi i linii śródbłonka.

Rysunek 2.Morfologia i charakterystyka ludzkich hematopoetycznych komórek progenitorowych CD34+ za pomocą cytometrii przepływowej.
Podłoża dla hematopoetycznych komórek macierzystych
HSC są zdolne do ekspansji in vivo do dużych liczb na mocy ich wyraźnych zdolności samoodnowy. Test jednostek tworzących kolonie (CFU) in vitro został wykorzystany do zbadania wzoru proliferacji i różnicowania progenitorów hematopoetycznych poprzez ich zdolność do tworzenia kolonii w półstałym podłożu agarowym. Badacze napotykają jednak na trudności podczas ekspansji niezróżnicowanych HSCs w warunkach in vitro, z rosnącym różnicowaniem komórek obserwowanym podczas fazy ekspansji w tradycyjnych systemach hodowlanych zawierających surowicę.
Podłoże do ekspansji hematopoetycznych komórek progenitorowych (HPC) DXF zostało zaprojektowane w celu maksymalnej ekspansji prymitywnych HPCs w pełni zdefiniowanym, wolnym od kseno środowisku hodowlanym. Ze względu na wykorzystanie wyłącznie syntetycznych, rekombinowanych lub roślinnych materiałów, pożywka ta jest zdefiniowana i wolna od wszelkich składników pochodzenia zwierzęcego.
Uwaga dotycząca stosowania: In Vitro Expansion of CD34+/CD38- Human Hematopoietic Progenitor Cells in a Serum-free and Xeno-free Stem Cell Culture Media.
Featured Product
Stemline® II Hematopoietic Stem Cell Medium
Opracowany w celu promowania optymalnej ekspansji ludzkich krwiotwórczych komórek macierzystych (HSC) ze szpiku kostnego, zmobilizowanej krwi obwodowej i krwi pępowinowej;Stemline® Hematopoietic Stem Cell Expansion Medium (S0192) wykazuje wyższy wzrost całkowitej liczby komórek jądrzastych (TNC) niż inne dostępne na rynku preparaty bez surowicy.
Cechy i zalety
- Skład bez surowicy
- Zwiększona ekspansja komórek CD34+ z krwi pępowinowej
- Ekspansja komórek ze wszystkich odpowiednich linii krwiotwórczych w jednostce tworzącej kolonię.
- Dokładnie przetestowany w 7-dniowych i 14-dniowych testach wzrostu.
- Produkowany w nowoczesnym zakładzie GMP z dostępnym głównym plikiem urządzenia (DMF).

Rysunek 2. Stemline® wykazuje doskonałą ekspansję hematopoetycznych komórek macierzystych szpiku kostnego (HSC).HSCs CD34+ wysiano do dołków 24-dołkowych płytek do hodowli tkankowej. Do każdej studzienki dodano jeden mililitr pożywki z odpowiednimi cytokinami stymulującymi wzrost (po 100 ng/ml TPO, SCF i G-CSF). Każde warunki wykonano w trzech powtórzeniach i wysiano 10 000 komórek na ml w każdym dołku. Komórki zliczono w 14. dniu, a krotność wzrostu określono na podstawie stosunku komórek końcowych do komórek początkowych. HSC ze szpiku kostnego hodowane w Stemline® i Stemline® II wykazały lepszą ekspansję niż te hodowane w innych pożywkach HSC bez surowicy.
Cytokiny hematopoetyczne i czynniki wzrostu
Liczne cytokiny związane z układem odpornościowym są zaangażowane w regulację hematopoezy w ramach złożonej sieci pozytywnych i negatywnych regulatorów. Niektóre cytokiny mają bardzo wąską specyficzność liniową swoich działań, podczas gdy wiele innych ma raczej szerokie i nakładające się zakresy specyficzności. W tej sekcji wymieniono cytokiny i czynniki wzrostu, których działanie wydaje się polegać na stymulacji lub regulacji rozwoju krwiotwórczych komórek macierzystych:
Markery hematopoetycznych komórek macierzystych
AldeRed™ ALDH Detection Assay
Hematopoetyczne komórki macierzyste wykazują podwyższony poziom dehydrogenazy aldehydowej (ALDH). Aktywność ALDH została wykorzystana jako marker jakości przeszczepów hematopoetycznych komórek macierzystych. Historycznie, poziomy ALDH były mierzone przy użyciu barwników przepuszczalnych dla żywych komórek, które emitują w zielonym obszarze widma elektromagnetycznego (512 nm). W związku z tym odczynnik nie może być jednocześnie stosowany w komórkach lub myszach wyrażających białka emitujące zieloną fluorescencję. The AldeRed™ ALDH Detection Assay jest przesuniętym w kierunku czerwonym fluorescencyjnym substratem dla ALDH używanym do znakowania żywotnych ALDH dodatnich HSC, pozostawiając zielony kanał emisji dostępny do dalszych eksperymentów.
Ludzkie monocyty
Monocyty są niedojrzałymi komórkami fagocytarnymi krążącymi we krwi. Działając jako komórki odpornościowe prezentujące antygen, mogą fagocytować i rozkładać drobnoustroje i cząstki stałe. Nasze pierwotne ludzkie monocyty CD14+ są izolowane ze świeżej krwi obwodowej jednego zdrowego dawcy. Po wyizolowaniu ultraczystej frakcji komórek jednojądrzastych za pomocą zastrzeżonych metod, monocyty CD14+ są izolowane przez pozytywną selekcję o czystości 95%. Monocyte Attachment Medium pozwala na skuteczną selekcję adherencyjną monocytów ze świeżo wyizolowanych ludzkich komórek jednojądrzastych przy jednoczesnym zachowaniu optymalnego zdrowia komórek.
Ludzkie komórki jednojądrzaste (PBMCs)
Komórki jednojądrzaste, w tym komórki jednojądrzaste krwi obwodowej (PBMCs), reprezentują frakcję limfocytów i monocytów wyizolowaną z krwi pępowinowej lub krwi obwodowej. Są one przygotowywane poprzez zoptymalizowane wirowanie w gradiencie o niskiej gęstości, które skutecznie zmniejsza zawartość granulocytów. Czerwone krwinki są delikatnie, ale dokładnie usuwane za pomocą opatentowanych technik zamiast lizy osmotycznej. Dzięki temu uzyskuje się ultraczyste komórki jednojądrzaste o doskonałej żywotności i niezmienionej funkcji biologicznej. PBMC mogą być używane bezpośrednio do eksperymentów lub jako materiał wyjściowy do izolacji kilku typów komórek, np. progenitorów hematopoetycznych i śródbłonkowych, monocytów i subpopulacji limfocytów.

Makrofagi ludzkie
Makrofagi są rezydentnymi tkankowo profesjonalnymi fagocytami i komórkami prezentującymi antygen (APC), które różnicują się z krążących monocytów krwi obwodowej do fenotypów M1 lub M2. Podłoże do generowania makrofagów zostało opracowane w celu skutecznego generowania makrofagów pochodzących z monocytów (MDM) ze świeżo wyizolowanych ludzkich monocytów krwi obwodowej lub bezpośrednio z PBMC jako materiału wyjściowego. Podłoże do generowania makrofagów M1 DXF zawiera GM-CSF i umożliwia generowanie makrofagów o polaryzacji M1. Podłoże do generowania makrofagów M2 DXF zawiera M-CSF i umożliwia generowanie makrofagów o polaryzacji M2. Obie pożywki do makrofagów DXF są preparatami zdefiniowanymi i wolnymi od kseno i wykorzystują wyłącznie materiały syntetyczne, rekombinowane lub pochodzenia roślinnego, pożywka ta jest wolna od wszelkich składników pochodzenia zwierzęcego.
Nota aplikacyjna: In Vitro Differentiation of Human PBMC Derived Monocytes into M1 or M2 Macrophages in a Serum-free and Xeno-free Cell Culture Media.
.
Human Dendritic Cells
Komórki dendrytyczne są wysoce ruchliwymi komórkami odpornościowymi i są najpotężniejszymi komórkami prezentującymi antygen (APC) układu odpornościowego ssaków. Komórki dendrytyczne są jedynymi komórkami prezentującymi antygen zdolnymi do stymulowania naiwnych limfocytów T, a zatem odgrywają kluczową rolę w generowaniu odporności adaptacyjnej. Pożywka do generowania komórek dendrytycznych (DC) została opracowana w celu łatwego i wydajnego generowania zarówno niedojrzałych, jak i w pełni dojrzałych mieloidalnych komórek dendrytycznych z monocytów krwi obwodowej. DC Generation Medium to zdefiniowany i wolny od ksenogenów preparat do stosowania ze świeżo wyizolowanymi komórkami. Ze względu na wykorzystanie wyłącznie syntetycznych, rekombinowanych lub roślinnych materiałów, pożywka ta jest wolna od wszelkich składników pochodzenia zwierzęcego.
Nota aplikacyjna: In Vitro Differentiation of Human PBMC and CD34+ Derived Monocytes into Mature CD83+/CD14- Dendritic Cells.
.Komórki zrębu dla różnicowania komórek T
Limfocyty T rozwijają się w grasicy z hematopoetycznych komórek macierzystych (HSCs) i progenitorowych (HSPCs) pochodzących ze szpiku kostnego.In vitro, różne systemy modelowe zostały zastosowane do naśladowania funkcji grasicy wspierającej rozwój limfocytów T. Niedawno opracowano nowy system sztucznych organoidów grasicy (ATO) bez surowicy, który wspiera wysoce wydajne i powtarzalne różnicowanie in vitro i pozytywną selekcję ludzkich komórek T z wielu źródeł HSPC, w tym krwi pępowinowej, szpiku kostnego i krwi obwodowej CD34+ HSPC.Kluczowym elementem systemu ATO jest linia komórkowa MS5-DLL1, która eliminuje potrzebę stosowania pierwotnych tkanek grasicy. Aby utworzyć organoidy, komórki zrębu MS5-DLL1 są agregowane z HSPC przez odwirowanie i hodowane na Millicell® wkładce do hodowli komórkowej w określonej pożywce bez surowicy.

Zaloguj się lub utwórz konto, aby kontynuować.
Nie masz konta użytkownika?