Przetwarzanie wektora wirusowego
Procesy oczyszczania wektorów wirusowych były historycznie oparte na systemach stosowanych do przeciwciał monoklonalnych, które nie zostały zaprojektowane w celu zapewnienia niezbędnego poziomu odzysku.
Wprowadzenie nowych technologii zaprojektowanych specjalnie do przetwarzania wektorów wirusowych w terapii genowej oferuje możliwość zwiększenia wydajności i przepustowości. Wśród metod, które można wykorzystać do optymalizacji przetwarzania wektorów wirusowych, znajdują się:
- operacje ultrafiltracji/diafiltracjioperacje, w szczególności z wykorzystaniem filtracji z przepływem stycznym (TFF) do zbierania i oczyszczania komórek lub wirusów, dalszego zatężania białek i diafiltracji, a także w końcowej formulacji<
- Zintensyfikowane chromatografia procesy, które zmniejszają liczbę i rozmiar operacji jednostkowych, dzięki technologiom takim jak wysokowydajne, jednorazowe adsorbery membranowe do chromatografii
Technologie te oferują możliwość skrócenia czasu oczyszczania wektorów wirusowych z godzin do minut, przy jednoczesnej poprawie odzysku. Ponadto mogą one ułatwić skalowanie, zmniejszyć ślad procesu i umożliwić bardziej efektywne wykorzystanie obiektu.
Powiązane artykuły techniczne
- Nasz przegląd skalowalnej filtracji w przepływie stycznym do produkcji wektorów wirusowych dostarczy kluczowych rozważań na temat opracowywania i optymalizacji procesu końcowego.
- Endonukleaza Benzonase® skutecznie usuwa zanieczyszczenia kwasami nukleinowymi z produkcji wirusów, co ma kluczowe znaczenie dla terapii komórkowych i genowych oraz szczepionek.
- Poznaj strategie oddzielania pustych i wypełnionych kapsydów w produkcji wektorów wirusowych. Dowiedz się o strategiach poprzedzających i o tym, jak trendy w projektowaniu kapsydów AAV wpływają na oczyszczanie.
Znajdź więcej artykułów
Pierwotne oczyszczanie
Surowa pożywka zawierająca wektory wirusowe jest poddawana filtracji wgłębnej lub kombinacji wirowania i filtracji wgłębnej w celu usunięcia dużych pozostałości komórkowych i innych zanieczyszczeń.
Drugie oczyszczanie
Oczyszczone podłoże z pierwszego oczyszczania jest dalej oczyszczane w dodatkowych etapach.
Ultrafiltracja/Diafiltracja
Ultrafiltracja i diafiltracja są stosowane odpowiednio do zatężania i wymiany buforu. Wektor wirusowy jest oddzielany od zanieczyszczeń za pomocą filtracji opartej na rozmiarze. Diafiltracja usuwa sól i inne cząsteczki, zastępując je wybranym buforem.
Chromatografia
Do oczyszczania wektora wirusowego stosuje się co najmniej dwie metody chromatografii, w tym wymianę jonową, powinowactwo i wykluczenie wielkości.
Filtracja wirusa
Oczyszczony wektor wirusowy poddawany jest nanofiltracji z porami o wielkości 15 nanometrów w celu usunięcia przypadkowych wirusów, endotoksyn i wszelkich innych pozostałych zanieczyszczeń i agregatów.
Filtracja sterylna
Filtracja sterylna lub redukcja obciążenia biologicznego może być stosowana wielokrotnie w procesie. Strumień zasilający jest przepuszczany przez filtr klasy sterylizacji 0,4 lub 0,2 mikrona w celu usunięcia bakterii i innych mikroorganizmów, które zostały wprowadzone podczas przetwarzania.
Final Fill
Oczyszczony i sterylny wektor wirusowy jest napełniany do docelowego pojemnika. W tym miejscu należy zwrócić szczególną uwagę na formułę, materiały opakowaniowe, warunki przechowywania, aby zapewnić stabilność i integralność.
Powiązane zasoby
- Shear ignorance? Think again: Breaking the perception of shear within viral vector manufacturing
This podcast transcript discusses best practices – and common misconceptions – when establishing process conditions and utilizing different TFF device formats.
- Pellicon® Capsules versus Hollow Fibers for Ultrafiltration/Diafiltration (UF/DF) in Viral Gene Therapy Manufacturing
This application note discusses methodology and experimental results in the performance evaluation of Pellicon® Capsules versus hollow fibers for UF/DF of viral vectors and describes the impact of either filter type on a TFF process.
- /deepweb/assets/sigmaaldrich/marketing/global/documents/352/641/pellicon-capsule-aav-ot11666en-ms.pdf
Part of the linearly scalable Pellicon® family of TFF filters, single-use Pellicon® Capsules and scale-down Pellicon® XL 50 cassettes provide reliability and reproducibility at any stage of your AAV process, from development to manufacturing
- /deepweb/assets/sigmaaldrich/marketing/global/documents/987/212/pellicon-capsule-vgt-tb11669en-ms.pdf
In this technical brief, we discuss use of our new single-use technology for tangential flow filtration (TFF) of viral vectors during the evaluation of two TFF operating control strategies.
- /deepweb/assets/sigmaaldrich/marketing/global/documents/407/540/podcast-empty-full-separation-ot9653en-ms.pdf
This article explains the need for a more nuanced understanding of AAV capture and empty–full separation, and the trends driving innovation in this area.
Przepływ pracy
Przetwarzanie wektora wirusowego na wyższym poziomie
Podejmowanie właściwych decyzji dotyczących procesów wyższego szczebla ma wpływ nie tylko na miano wektora wirusowego, ale także na procesy niższego szczebla, harmonogramy i akceptację regulacyjną
.
Formuła wektora wirusowego i końcowe wypełnienie
Sformułowanie komercyjnie opłacalnej terapii genowej wymaga wysokiego poziomu wiedzy w zakresie zastosowań i regulacji
Charakterystyka wektorów wirusowych i testy bezpieczeństwa biologicznego
Krytyczne testy bezpieczeństwa biologicznego i charakterystyka produktów wektorów wirusowych mogą pomóc w pełnej analizie kluczowych atrybutów jakości: tożsamości, siły działania, bezpieczeństwa i stabilności
.
Rozwój i produkcja wektorów wirusowych na zlecenie
Partnerstwa z CDMO odgrywają kluczową rolę w rozwijaniu pipeline'ów klinicznych i osiąganiu udanej komercjalizacji
Zaloguj się lub utwórz konto, aby kontynuować.
Nie masz konta użytkownika?