DCAS9PROT

dCas9-3XFLAG^™-ビオチンタンパク質

from Streptococcus pyogenes with D10A and H840A mutations, recombinant, expressed in E. coli, 1X NLS

• 別名: Cas9 D10A H840A, dCas9、触媒活性のないCas9, 不活性型Cas9
• UNSPSCコード: 12352202
• NACRES: NA.51

特性

• リコンビナント: expressed in E. coli
• 品質水準: 200
• アッセイ: ≥90% (SDS-PAGE)
• 形状: lyophilized powder
• 包装: pkg of 1 kit (3 components)
• 輸送温度: ambient
• 保管温度: −20°C

詳細

詳細

化膿連鎖球菌由来の組換えdCas9-3X FLAG-ビオチンタンパク質（約165 KD）は、ゲノム編集およびゲノムDNAの検出、分離、およびイメージング実験に調製不要の試薬です。ターゲット固有のガイドRNAと組み合わせると、死滅した化膿連鎖球菌Cas9タンパク質は、細胞培養のトランスフェクション、マイクロインジェクション、DNAプルダウン、クロマチン濃縮、微生物同定、およびin situ DNAイメージングに適したDNA標的タンパク質として作用します。C末端で、このタンパク質は核輸入用にSV40ラージT抗原核局在化シグナル（NLS）で、ならびに抗FLAG^®ベースまたはストレプトアビジンベースの実験用に3XFLAGエピトープおよびビオチンの両方でタグ付けされます。

アプリケーション

機能ゲノミクス／ターゲット検証／ゲノム編集／分子生物学／合成生物学／DNA検出／分離／DNAイメージング

特徴および利点

• 高い特異性：
• ゲノムDNAの検出／分離に適しています
• 注入／トランスフェクトが容易です

包装

• 50 μg（≥ 300 pmol）パッケージ
• 250 μg（≥ 1500pmol）パッケージ

構成

各キットの構成：

• dCas9組換えタンパク質のバイアル1本
• 1倍希釈バッファー1 mLを含むバイアル1本
• グリセロールを含むヌクレアーゼ非含有水1 mLを含むバイアル1本

原理

CRISPR/Casシステムは、侵入するウイルスやプラスミドに対する防御として細菌や古細菌に採用されています。近年、化膿連鎖球菌のタイプII CRISPR/Casシステムが、単一のCas9タンパク質と非コーディングガイドRNA（gRNA）の2つの分子成分を使用して、真核生物の系で機能するように設計されました。Cas9エンドヌクレアーゼは、ヌクレアーゼ活性に関与する2つのタンパク質領域であるRuvCおよびHnH（それぞれD10AおよびH840A）への変異とともに不活化されます（dCas9）。その後このタンパク質は1つのgRNAでプログラムすることができ、目的のDNA配列に結合するよう誘導します。

再構成

凍結乾燥dCas9タンパク質は、付属の溶解用溶液に再懸濁して所要の濃度にしてください。チューブを静かに叩いて凍結乾燥粉末を完全に溶解させ、氷上で10分間インキュベートし、チューブを遠心して材料をチューブの底に移動させます。

その他情報

gRNAの注文にはCRISPR Selection Toolをご使用ください

弊社のその他のMISSION^®Cas9タンパク質につきましては、SigmaAldrich.com/CRISPRproteinsをご確認ください。

法的情報

CRISPR使用許諾契約

3xFLAG is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC

FLAG is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

MISSION is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

安全性情報

• 保管分類コード: 10 - Combustible liquids