CAS9D10APR

Cas9-D10Aニッカーゼタンパク質

from Streptococcus pyogenes with D10A mutation, recombinant, expressed in E. coli, 1X NLS

• 別名: Cas9D10A, Cas9ニッカーゼ, ニッカーゼCas9
• UNSPSCコード: 12352202
• NACRES: NA.51

特性

• 品質水準: 200
• アッセイ: ≥95% (SDS-PAGE)
• フォーム: lyophilized powder
• 包装: pkg of 1 kit (3 components)
• 輸送温度: dry ice
• 保管温度: −20°C

詳細

詳細

Streptococcus pyogenes由来のリコンビナントタンパク質Cas9-D10Aニッカーゼ（約160 Kd）は調製不要のゲノム編集用試薬です。S. pyogenes由来Cas9-D10Aニッカーゼは、標的特異的なpgRNAと併用すると、培養細胞のトランスフェクションや、一細胞胚注入による遺伝子改変動物の迅速作製に適した標的ヌクレアーゼとして機能します。

Cas9（CRISPR（clustered regularly interspaced short palindromic repeats）関連タンパク質-9ヌクレアーゼ）ニッカーゼは、RuvCとHNHという2つのヌクレアーゼドメインで二重鎖を切断します。

アプリケーション

機能ゲノミクス／標的バリデーション／ゲノム編集

特徴および利点

• 高特異性
• 高活性
• 注入／トランスフェクトにすぐ使用できます

包装

50 gパッケージ（300 pmol以上）
250 gパッケージ（1500 pmol以上）

構成

各キットの内容：

• リコンビナントタンパク質Cas9-D10Aニッカーゼ 1バイアル
• 1 mLの1倍希釈バッファー 1バイアル
• 1 mLのグリセロール含有ヌクレアーゼフリー水 1バイアル

原理

CRISPR/Casシステムは、細菌や古細菌に備わるウイルスやプラスミドの侵入に対する防御機構です。近年、細菌Streptococcus pyogenes由来のII型CRISPR/Casシステムが、単一のCas9タンパク質と非コーディングガイドRNA（gRNA）の2つの分子成分を用いて真核生物系で機能するように設計されました。Cas9エンドヌクレアーゼは、gRNAでプログラムすることができ、目的のゲノム位置でDNA二本鎖切断（DSB）を誘導します。Znフィンガーヌクレアーゼ（ZFN）によって誘導されるDSBと同様に、細胞は内因性DNA修復プロセス［非相同末端結合（NHEJ）または相同性指向修復（HDR）］を活性化して、標的とされたDSBを修復します。

再構成

凍結乾燥したS. pyogenes Cas9-D10Aニッカーゼタンパク質は、希望する濃度になるまで溶解液に再懸濁してください。チューブを穏やかに叩いて凍結乾燥粉末を完全に溶解させ、氷上で10分間インキュベートし、チューブを遠心して材料をチューブの底に移動させます。

その他情報

gRNAの注文には、弊社のCRISPR選択ツールをご使用ください

弊社の他のMISSION^® Cas9タンパク質につきましては、SigmaAldrich.com/CRISPRproteinsをご覧ください

製品については、最近bioRxivに投稿した弊社の論文Highly efficient and specific genome editing in human cells with paired CRISPR-Cas9 nickase ribonucleoproteinsをご参照ください

法的情報

CRISPR使用許諾契約

MISSION is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

安全性情報

• 保管分類コード: 11 - Combustible Solids