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リコンビナント
expressed in E. coli
品質水準
形状
liquid
包装
vial of 50 μL
濃度
20 ng/μL in TE buffer; DNA (1μg of plasmid DNA)
プロモーター
Promoter name: CMV
レポーター遺伝子
GFP
selection
kanamycin
輸送温度
dry ice
保管温度
−20°C
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詳細
The Cas9-D10A nickase plasmid co-expressing GFP uses the CMV promoter for strong transient expression of Cas9-D10A. Alternate promoters can be substituted by replacement of CMV using MluI and NheI. Also, the Cas9D10A expression plasmids can be linearized using XbaI for T7-based mRNA production.
アプリケーション
CMV-CAS9D10A-2A-GFP Plasmid has been used in CRISPR-Cas9 mutagenesis to truncate the forkhead box O3 (FOXO3) gene in the mammalian cell.
Functional Genomics
Use of Paired Cas9 Nickase + GFP for:
Use of Paired Cas9 Nickase + GFP for:
- Creation of gene knockouts in multiple cell lines
- Complete knockout of genes not amenable to RNAi
- Creation of knock-in cell lines with promoters, fusion tags or reporters integrated into endogenous genes
構成
1 vial containing 1ug of Cas9-D10A Nickase-GFP plasmid.
Please note, this product does not contain any guide RNA sequence. A pair of gRNA plasmids must be purchased separately through the Custom CRISPR paired nickase product tab.
Please note, this product does not contain any guide RNA sequence. A pair of gRNA plasmids must be purchased separately through the Custom CRISPR paired nickase product tab.
物理的形状
1 ug of Sigma Cas9-D10A nickase-GFP plasmid
その他情報
The type II CRISPR/Cas system from the bacterium Streptococcus pyogenes has been engineered to function in eukaryotic systems using two molecular components: a single Cas9 protein and a non-coding guide RNA (gRNA). The Cas9 endonuclease can be programmed with a single gRNA, directing a DNA double-strand break (DSB) at a desired genomic location. Similar to DSBs induced by zinc finger nucleases (ZFNs), the cell then activates endogenous DNA repair processes, either non-homologous end joining (NHEJ) or homology-directed repair (HDR), to heal the targeted DSB. GFP is co-expressed from the same mRNA as the Cas9 nickase protein via a 2A peptide linkage, enabling tracking of transfection efficiency and enrichment of genome editing activity in cell populations via fluorescence activated cell sorting (FACS).
保管分類コード
10 - Combustible liquids
WGK
nwg
引火点(°F)
Not applicable
引火点(℃)
Not applicable
適用法令
試験研究用途を考慮した関連法令を主に挙げております。化学物質以外については、一部の情報のみ提供しています。 製品を安全かつ合法的に使用することは、使用者の義務です。最新情報により修正される場合があります。WEBの反映には時間を要することがあるため、適宜SDSをご参照ください。
Jan Code
CAS9D10AGFPP-BULK:
CAS9D10AGFPP-1EA:
試験成績書(COA)
製品のロット番号・バッチ番号を入力して、試験成績書(COA) を検索できます。ロット番号・バッチ番号は、製品ラベルに「Lot」または「Batch」に続いて記載されています。
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A protocol for custom CRISPR Cas9 donor vector construction to truncate genes in mammalian cells using pcDNA3 backbone
BMC Molecular Biology, 19(1), 3-3 (2018)
プロトコル
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ライフサイエンス、有機合成、材料科学、クロマトグラフィー、分析など、あらゆる分野の研究に経験のあるメンバーがおります。.
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