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リコンビナント
expressed in E. coli
品質水準
包装
vial of 50 μL
濃度
20 ng/μL in TE buffer; DNA (1μg of plasmid DNA)
プロモーター
Promoter name: CMV
レポーター遺伝子
GFP
セレクション
kanamycin
輸送温度
dry ice
保管温度
−20°C
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詳細
Cas9発現プラスミドは、Cas9の強力な一過性発現のためにCMVプロモーターを使用します。代替プロモーターは、MluIおよびNheIを使用したCMVによって置き換えることができます。また、Cas9発現プラスミドは、T7ベースのmRNA生産のためにXbaIを用いて線形化できます。Cas9ヌクレアーゼと共に発現する蛍光色素分子の追加により、トランスフェクションの成功を簡単に視覚化できます。
アプリケーション
CMV-CAS9-2A-GFPプラスミドは、ヒトU937白血病細胞にadditional sex combs-like1変異を導入するために使用されます。また、CRISPR/Cas9分析にも使用されます。
CMV-CAS9-2A-GFPプラスミドは、次の目的で行う機能的ゲノム/標的バリデーションに適しています。
CMV-CAS9-2A-GFPプラスミドは、次の目的で行う機能的ゲノム/標的バリデーションに適しています。
- 複数の細胞株における遺伝子ノックアウトの作製
- RNAiに適さない遺伝子の完全なノックアウト
- プロモーター、融合タグ、あるいはレポーターを内在性遺伝子に組み込んだノックイン細胞株の作製
構成
1バイアルあたり1 μgのCas9-2A-GFPプラスミドをを含みます。
製品にはガイドRNAは含まれないことにご留意ください。こちらは、Custom CRISPR製品タブから別個に購入していただく必要があります。
製品にはガイドRNAは含まれないことにご留意ください。こちらは、Custom CRISPR製品タブから別個に購入していただく必要があります。
原理
CRISPR/Cas系は、細菌および古細菌において、侵入するウイルスやプラスミドに対する防御系として使用されています。近年、単一Cas9タンパク質とノンコーディングガイドRNA（gRNA）という2つの分子成分を用いて、真核細胞系で機能する細菌Streptococcus pyogenes由来のII型CRISPR/Cas系が作られました。Cas9エンドヌクレアーゼを単一gRNAによりプログラムして、希望するゲノム位置でDNA二本鎖切断（DSB）を発生させることができます。亜鉛フィンガーヌクレアーゼ（ZFN）によって誘導されるDSBと同様に、細胞は次に内因性DNA修復過程である非相同末端結合（NHEJ）または相同組換え修復（HDR）を活性化し、標的DSBを修復します。
その他情報
DNAの二本鎖切断を仲介するためには、U6-gRNAプラスミドを併用する必要があります。
文献で使用される典型的なトランスフェクション濃度は、Cas9プラスミドで1.0 μg/μL以上、5 μL以下、U6-gRNAプラスミドで1.0 μg/μL以上、5 μL以下の範囲にあります。<= 5 μL of Cas9 plasmid combined with >（上記用量は、50〜100万個の細胞がヌクレオフェクションすることを仮定しています。）
文献で使用される典型的なトランスフェクション濃度は、Cas9プラスミドで1.0 μg/μL以上、5 μL以下、U6-gRNAプラスミドで1.0 μg/μL以上、5 μL以下の範囲にあります。<= 5 μL of Cas9 plasmid combined with >（上記用量は、50〜100万個の細胞がヌクレオフェクションすることを仮定しています。）
法的情報
保管分類コード
10 - Combustible liquids
WGK
nwg
引火点(°F)
Not applicable
引火点(℃)
Not applicable
適用法令
試験研究用途を考慮した関連法令を主に挙げております。化学物質以外については、一部の情報のみ提供しています。 製品を安全かつ合法的に使用することは、使用者の義務です。最新情報により修正される場合があります。WEBの反映には時間を要することがあるため、適宜SDSをご参照ください。
Jan Code
CAS9GFPP-BULK:
CAS9GFPP-1EA:
最新バージョンのいずれかを選択してください：
試験成績書（COA）
Lot/Batch Number
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プロトコル
Learn about CRISPR Cas9, what it is and how it works. CRISPR is a new affordable genome editing tool enabling access to genome editing for all.
ライフサイエンス、有機合成、材料科学、クロマトグラフィー、分析など、あらゆる分野の研究に経験のあるメンバーがおります。.
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