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Merck

CAS9PROT

Sigma-Aldrich

Cas9タンパク質

from Streptococcus pyogenes, recombinant, expressed in E. coli, 1X NLS

別名:

Cas9, SpCas9, SpyCas9

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About This Item

UNSPSCコード:
12352200

リコンビナント

expressed in E. coli

品質水準

アッセイ

≥95% (SDS-PAGE)

フォーム

lyophilized powder

包装

pkg of 1 kit (3 components)

アプリケーション

CRISPR

輸送温度

ambient

保管温度

−20°C

関連するカテゴリー

詳細

Streptococcus pyogenes由来の組換えCas9タンパク質(約160 KD)は、ゲノム編集実験にすぐに使用できる試薬です。標的特異的なガイドRNAと併用すると、野生型Streptococcus pyogenes Cas9タンパク質は、培養細胞のトランスフェクションや、一細胞胚注入を介する遺伝子改変動物の迅速作成に適した、標的ヌクレアーゼとして働きます。
cas5及びcsn1としても知られるCAS9は、II型のクラスター化して規則的な配置の短い回文配列リピート(CRISPR)-RuvC(RNase H-like fold) cas系のシグネチャー遺伝子です。CAS9は1,388個のアミノ酸を含有します。このタンパク質は、crRNA成熟に関与するRuvC/リボヌクレアーゼ(RNase)Hドメインと、DNA分解段階に関与するMcrA/HNHシグネチャードメインを含有すると予測されます。

アプリケーション

機能ゲノミクス/標的バリデーション/ゲノム編集

生物化学的/生理学的作用

CAS9は、プラスミドDNA干渉にきわめて重要な役割を果たします。外来DNAに対する抵抗性を与えるために必要とされる、唯一のcasタンパク質です。CAS9は、様々な生物においてRNAガイドによるゲノム編集と遺伝子調節の両方を刺激しますが、どの細胞内でも一度に片方の活性しか促進できません。

特徴および利点

  • 高特異性
  • 高活性
  • すぐに注入/トランスフェクトできます

包装

50 μg(300 pmol)パッケージ
250 μg(≥ 1500 pmol)パッケージ

構成

各キットは以下で構成されています:
  • Cas9組換えタンパク質のバイアル1本
  • 1×希釈バッファー1 mLを含むバイアル1本
  • グリセロールを加えたヌクレアーゼフリー水1 mLを含むバイアル1本

原理

CRISPR/Cas系は、細菌及び古細菌において、侵入するウイルスやプラスミドに対する防御として働いています。近年、単一Cas9タンパク質とノンコーディングのガイドRNA(gRNA)という2つの分子成分を用いて、真核細胞系で機能する、細菌Streptococcus pyogenes由来のII型CRISPR/Cas系が作られています。Cas9エンドヌクレアーゼをgRNAによりプログラムして、希望するゲノム位置でDNA二本鎖切断(DSB)を発生させることができます。ジンクフィンガーヌクレアーゼ(ZFN)によって誘導されるDSBと同様に、細胞は続いて、非相同末端結合(NHEJ)又は相同組換え修復(HDR)のいずれかの内因性DNA修復過程を活性化し、標的DSBを修復します。

再構成

凍結乾燥したS. pyogenes Cas9タンパク質は、希望する濃度になるまで溶解液に再懸濁してください。チューブを穏やかに叩いて凍結乾燥粉末を完全に溶解させ、氷上で10分間インキュベートし、チューブを遠心して材料をチューブの底に移動させます。

その他情報

gRNAの注文にはCRISPR Selection Toolをご使用ください。

弊社のその他のMISSION® Cas9タンパク質につきましては、SigmaAldrich.com/CRISPRproteinsをご確認ください。

法的情報

MISSION is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

キットの構成要素のみ

製品番号
詳細

  • Cas9-NLS from Streptococcus pyogenes, expressed in Escherichia coli

  • Dilution buffer for Cas9 proteins

  • Reconstitution solution for Cas9 proteins

保管分類コード

10 - Combustible liquids

WGK

WGK 3

引火点(°F)

Not applicable

引火点(℃)

Not applicable


適用法令

試験研究用途を考慮した関連法令を主に挙げております。化学物質以外については、一部の情報のみ提供しています。 製品を安全かつ合法的に使用することは、使用者の義務です。最新情報により修正される場合があります。WEBの反映には時間を要することがあるため、適宜SDSをご参照ください。

毒物及び劇物取締法

キットコンポーネントの情報を参照してください

PRTR

キットコンポーネントの情報を参照してください

消防法

キットコンポーネントの情報を参照してください

労働安全衛生法名称等を表示すべき危険物及び有害物

キットコンポーネントの情報を参照してください

労働安全衛生法名称等を通知すべき危険物及び有害物

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カルタヘナ法

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Jan Code

キットコンポーネントの情報を参照してください


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プロトコル

The CRISPR (Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats) system was discovered in bacteria, where it functions as an adaptive immune system against invading viral and plasmid DNA.

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