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アプリケーション
Clostridium histolyticum(クロストリジウムヒストリチクム)由来のコラゲナーゼは以下の用途に用いられています。
- マウスにおける脳内出血の誘発
- 免疫蛍光染色のためのコラーゲン3Dゲルの消化
- マウスにおける局所性血液溢出・出血の誘発
コラゲナーゼは、終末糖化産物(AGE)の研究を目的とした動脈組織の処理に用いられています。また、ヒト腫瘍、マウス腎、ヒト脳、肺、上皮、その他多くの組織の細胞分散に、他のプロテアーゼとともに用いられています。肝臓および腎臓の灌流試験、膵島の分離、非実質肝細胞の単離にも有用です。
生物化学的/生理学的作用
Clostridium histolyticumには2種類のコラゲナーゼが含まれています。クロストリジウムコラゲナーゼは哺乳類コラゲナーゼよりも有効です。コラーゲン三重らせん体を複数部位で切断します。クロストリジウムコラゲナーゼはガス壊そにおける細菌侵入に関与しています。
組織から効果的に細胞を分離するには、コラゲナーゼ酵素と中性プロテアーゼの両方の作用が必要です。コラゲナーゼは酵素1モルあたり4 gのカルシウム原子(Ca2+)によって活性化されます。細胞ろ液には、分子量68~130 kDaの7種類以上のプロテアーゼ(至適pH:6.3~8.8)が含まれていると考えられます。コラゲナーゼは配列-R-Pro-8-X-Gly-Pro-R-を認識します。このXは、ほとんどの場合中性アミノ酸です。
コラゲナーゼは、モル酵素あたり 4 グラム原子カルシウムによって活性化されます。 本製品は、エチレングリコール-ビス(β-アミノエチルエーテル) - N, N, N′,N′-四酢酸、β-メルカプトエタノール、グルタチオン、チオグリコール酸、および 8-ヒドロキシキノリンによって阻害されます。
単位の定義
1 コラーゲン消化単位(CDU)は、ウシアキレス腱由来コラーゲンからペプチドを遊離し、カルシウムイオン存在下、pH 7.4、37°C、5 時間のニンヒドリン呈色における、1.0 umol のロイシンに相当します。1 FALGPA 加水分解単位は、25°Cで、1 分間あたりに、1.0 umol の furylacryloyl-Leu-Gly-Pro-Ala を加水分解します。1 中性プロテアーゼ単位は、pH 7.5、37°Cでカゼインを加水分解し、5 時間あたり1.0 umol のチロシンに相当する色を生成します。1 クロストリパイン単位は、DTT の存在下、pH 7.6、25°Cで、1 分間あたり 1.0 umol の BAEE を加水分解します。
調製ノート
タイプVII(C0773)から調製します。原液は0.36 mM塩化カルシウムを含有する37℃、pH7.4の50 mM TES緩衝液(TESCA)1 mLにコラゲナーゼ0.05~0.1 mgを溶解して調製します。
基質
シグナルワード
Danger
危険有害性情報
危険有害性の分類
Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
ターゲットの組織
Respiratory system
保管分類コード
11 - Combustible Solids
WGK
WGK 1
引火点(°F)
Not applicable
引火点(℃)
Not applicable
個人用保護具 (PPE)
dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves
適用法令
試験研究用途を考慮した関連法令を主に挙げております。化学物質以外については、一部の情報のみ提供しています。 製品を安全かつ合法的に使用することは、使用者の義務です。最新情報により修正される場合があります。WEBの反映には時間を要することがあるため、適宜SDSをご参照ください。
Jan Code
C2399-15KU-PW:
C2399-1.5KU:
C2399-3KU:
C2399-7.5KU:
C2399-7.5KU-PW:
C2399-PH:
C2399-15KU:
C2399-BULK:
C2399-VAR:
C2399-3KU-PW:
C2399-1.5KU-PW:
試験成績書(COA)
製品のロット番号・バッチ番号を入力して、試験成績書(COA) を検索できます。ロット番号・バッチ番号は、製品ラベルに「Lot」または「Batch」に続いて記載されています。
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プロトコル
This procedure may be used for Collagenase products.
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