C0773

コラゲナーゼ Clostridium histolyticum由来

high purity, purified by chromatography, Type VII, ≥4 FALGPA units/mg solid, lyophilized powder, ≥700 CDU/mg solid (CDU = collagen digestion units)

• 別名: クロストリジオペプチダーゼA
• CAS番号: 9001-12-1
• Enzyme Commission number: 3.4.24.3 (BRENDA, IUBMB)
• EC Number: 232-582-9
• MDL番号: MFCD00130830
• UNSPSCコード: 12352204
• NACRES: NA.54

特性

• 品質水準: 200
• タイプ: Type VII
• フォーム: lyophilized powder
• 比活性: ≥4 FALGPA units/mg solid; ≥700 CDU/mg solid (CDU = collagen digestion units)
• 分子量: 68-130 kDa
• 精製方法: chromatography
• 組成: Protein, ≥85% biuret
• 溶解性: TESCA buffer (50 mM TES, 0.36 mM Calcium chloride, pH 7.4): soluble 0.05-0.1 mg/mL at 37 °C
• その他の活性: caseinase and clostripain ≤1 units/mg protein
• 保管温度: −20°C

詳細

アプリケーション

コラゲナーゼは、進行グルコシル化最終産物（AGE）の研究を目的とした動脈組織の調製に使用されています。本酵素はまた、ヒト腫瘍、マウス腎臓、ヒト脳、肺上皮およびその他の多数の組織の脱凝集のために他のプロテアーゼと共に使用されています。また、肝臓および腎臓灌流試験、膵臓の消化および非実質肝細胞の分離にも有効です。

生物化学的／生理学的作用

コラゲナーゼは、モル酵素あたり 4 グラム原子カルシウムによって活性化されます。 本製品は、エチレングリコール-ビス(β-アミノエチルエーテル) - N, N, N′,N′-四酢酸、β-メルカプトエタノール、グルタチオン、チオグリコール酸、および 8-ヒドロキシキノリンによって阻害されます。

細胞の組織からの効果的な遊離には、コラゲナーゼと中性プロテアーゼの両方の作用が必要です。コラゲナーゼは、酵素1モルあたり4グラム原子のカルシウム（Ca²⁺）によって活性化されます。培養ろ液は、分子量68～130 kDaの幅で、最低でも7種類のプロテアーゼを含むと考えられます。至適pHの幅は6.3～8.8です。本酵素は、-R-Pro-8-X-Gly-Pro-R-の配列を認識し、ここでXは、中性アミノ酸であることがほとんどです。

単位の定義

1 コラーゲン消化単位（CDU）は、ウシアキレス腱由来コラーゲンからペプチドを遊離し、カルシウムイオン存在下、pH 7.4、37°C、5 時間のニンヒドリン呈色における、1.0 umol のロイシンに相当します。1 FALGPA 加水分解単位は、25°Cで、1 分間あたりに、1.0 umol の furylacryloyl-Leu-Gly-Pro-Ala を加水分解します。1 中性プロテアーゼ単位は、pH 7.5、37°Cでカゼインを加水分解し、5 時間あたり1.0 umol のチロシンに相当する色を生成します。1 クロストリパイン単位は、DTT の存在下、pH 7.6、25°Cで、1 分間あたり　1.0 umol　の BAEE を加水分解します。

物理的形状

塩化カルシウムを含む凍結乾燥粉末

調製ノート

ストック溶液は、37℃、pH 7.4で、0.36 mMの塩化カルシウムを含有する50 mMのTES緩衝液（TESCA）に0.05～0.1 mg/mLのコラゲナーゼを溶解することにより調製できます。冷えた緩衝液を使用します。@°@

材料が完全に溶解せず、沈殿物が見られる場合があります。沈殿物は溶液の活性に影響を及ぼすものではありません。

安全性情報

• ピクトグラム: GHS08,GHS07
• シグナルワード: Danger
• 危険有害性情報: H315,H319,H334,H335
• 注意書き: P261 - P264 - P271 - P280 - P302 + P352 - P305 + P351 + P338
• 危険有害性の分類: Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
• ターゲットの組織: Respiratory system
• 保管分類コード: 11 - Combustible Solids
• WGK: WGK 1
• 引火点(°F): Not applicable
• 引火点(℃): Not applicable
• 個人用保護具 (PPE): dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves