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Merck

C9722

Sigma-Aldrich

コラゲナーゼ Clostridium histolyticum由来

lyophilized powder (from 0.2μm filtered solution), 0.5-5.0 FALGPA units/mg solid, suitable for cell culture

別名:

クロストリジオペプチダーゼA

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About This Item

CAS番号:
Enzyme Commission number:
EC Number:
MDL番号:
UNSPSCコード:
12352204
NACRES:
NA.75

由来生物

Clostridium histolyticum

品質水準

無菌性

0.2 μm filtered

形状

lyophilized powder (from 0.2μm filtered solution)

比活性

0.5-5.0 FALGPA units/mg solid

濃度

1 mg/mL

テクニック

cell culture | mammalian: suitable
single cell analysis: suitable

pH

7.4

輸送温度

ambient

保管温度

−20°C

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アプリケーション

本製品は、ヒト腫瘍、マウス腎臓、ヒト成体および胎児脳、肺、ならびに他の上皮組織の凝集防止に適しています。 また、肝臓および腎臓の灌流実験、膵臓の消化、ラットの肝臓の非実質細胞の分離、ならびに肝細胞の調製においても効果的であることが示されています。 コラゲナーゼはまた、終端糖化産物の研究のための動脈組織の調製にも使用されています。 本酵素は、肝細胞の遊離のために約1 mg/mLの濃度でテストされています。 消化のための濃度範囲は0.1 ~ 5 mg/mLです。

シーケンス用シングルセル懸濁液の調製に適しています。

生物化学的/生理学的作用

コラゲナーゼは、モル酵素あたり 4 グラム原子カルシウムによって活性化されます。 本製品は、エチレングリコール-ビス(β-アミノエチルエーテル) - N, N, N′,N′-四酢酸、β-メルカプトエタノール、グルタチオン、チオグリコール酸、および 8-ヒドロキシキノリンによって阻害されます。
コラゲナーゼ製品は、C. histolyticumが分泌する酵素の混合物で、分泌された酵素に見られる10~18種類の成分の相対比によって区別されています。主成分は2種類のコラゲナーゼ、クロストリパインと中性プロテアーゼです。これらの酵素の相乗効果でコラーゲンやその他の細胞内物質が分解されます。組織から細胞を効果的に分離するには、コラゲナーゼ酵素と中性プロテアーゼの両方の作用が必要です。各種コラーゲンはコラゲナーゼの天然の基質です。

注意

供給時点で本製品は-20℃で1年間安定です。37℃、50℃および-20℃では、30日間にFALGPAまたはプロテアーゼ活性が低下することはありません。粗コラゲナーゼ溶液は、アリコット(10 mg/mL)で急速凍結し、-20℃で凍結維持すれば安定です。さらに凍結・融解サイクルを繰り返すと、溶液が劣化します。本製品を氷上で保存した場合、7時間まで活性が100%保たれます。

単位の定義

1 コラーゲン消化単位(CDU)は、ウシアキレス腱由来コラーゲンからペプチドを遊離し、カルシウムイオン存在下、pH 7.4、37°C、5 時間のニンヒドリン呈色における、1.0 umol のロイシンに相当します。1 FALGPA 加水分解単位は、25°Cで、1 分間あたりに、1.0 umol の furylacryloyl-Leu-Gly-Pro-Ala を加水分解します。1 中性プロテアーゼ単位は、pH 7.5、37°Cでカゼインを加水分解し、5 時間あたり1.0 umol のチロシンに相当する色を生成します。1 クロストリパイン単位は、DTT の存在下、pH 7.6、25°Cで、1 分間あたり 1.0 umol の BAEE を加水分解します。

調製ノート

溶液は通常、TESCAバッファーにより1~2 mg/mLで調製されます(50 mM TES、0.36 mM塩化カルシウムを含む、37℃でpH 7.4)。また、本製品はクロストリパイン、非特異的中性プロテアーゼおよびトリプシン活性を含みます。

ピクトグラム

Health hazard

シグナルワード

Danger

危険有害性情報

注意書き

危険有害性の分類

Resp. Sens. 1

保管分類コード

11 - Combustible Solids

WGK

WGK 1

引火点(°F)

Not applicable

引火点(℃)

Not applicable

個人用保護具 (PPE)

dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves


試験成績書(COA)

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