COLLA-RO

コラゲナーゼA

from Clostridium histolyticum

• Enzyme Commission number: 3.4.24.3 (BRENDA, IUBMB)
• UNSPSCコード: 12352204

特性

• 由来生物: Clostridium histolyticum
• 品質水準: 100
• 無菌性: non-sterile
• 形状: lyophilized
• 比活性: >0.15 U/mg lyophilizate (Collagenase activity)
• 包装: pkg of 100 mg (10103578001); pkg of 2.5 g (11088793001); pkg of 500 mg (10103586001)
• メーカー／製品名: Roche
• 濃度: 1 mg/mL (0.1%, w/v)
• 色: brown
• 最適pH: 6.0-8.0
• 溶解性: water: soluble
• 適合性: suitable for PCR
• NCBIアクセッション番号: WP_138210331
• UniProtアクセッション番号: A0A4U9RG91
• アプリケーション: cell analysis; life science and biopharma; sample preparation
• その他の活性: Clostripain 9.489 U/mg; Proteases 6.067 U/mg (Azocoll ); Trypsin 0.144 U/mg (with BAEE)
• 保管温度: 2-8°C
• 遺伝子情報: Clostridium histolyticum ... COLA_1(1668506084)

詳細

詳細

コラゲナーゼは、コラーゲンと呼ばれる三重螺旋タンパク質を切断します。Clostridium histolyticumは6種類のコラゲナーゼ、すなわちα、β、γ、δ、ε、λコラゲナーゼを産生します。これらのコラゲナーゼは、結合組織に対して活性を示し、コラーゲンよりもゼラチンに対し高い反応性を示します。Clostridium histolyticumから得られるコラゲナーゼは、両末端からコラーゲンを断片化するので、4～10℃という低い温度で非常に強い活性を示します。

特異性

コラゲナーゼは天然コラーゲンを分解します。トリプシン様酵素であるクロストリパインおよび中性プロテアーゼも他のタンパク質を分解します。
酵素活性：
コラゲナーゼ活性：＞0.15U/mg（Wünschによる）（+25℃、4-フェニル-アゾベンジル-オキシカルボニル-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Argを基質とする）
汚染酵素活性：トリプシン、クロストリパインおよび中性タンパク質分解活性
コラゲナーゼAでは酵素活性の比率のバランスが取れています。

アプリケーション

C. histolyticumから得たコラゲナーゼは、以下に広く使用されています：

• さまざまな組織（肺、心臓、筋肉、骨、脂肪組織、肝臓、腎臓、軟骨、乳腺、胎盤、血管、脳、腫瘍、臍帯など）の脱凝集
• 一次培養系を確立させるための単一細胞懸濁液の調製コラゲナーゼＡは、収量、生存能および機能性が重要な場合に推奨されます。
• 肝細胞、脂肪細胞、膵島、上皮細胞、筋肉細胞、上皮細胞といったさまざまな組織からの細胞の調製などです。しかし、酵素の各ロットが特定の組織の破壊に適しているかは、実験的に決定する必要があります。

単位の定義

内容物
凍結乾燥物、非滅菌

単位の定義：Rocheのコラゲナーゼのアッセイは、 Wünsch単位（Wünsch基質を用い+25℃において1分当たり製品1 μmolを生成）で行います。
多くの場合、コラゲナーゼ活性はMandl単位（+37℃において5時間で1 μmolのロイシンがコラーゲンから遊離）で示されます。
残念ながら、Mandl単位はコラゲナーゼ調製物中の混入プロテアーゼの濃度に部分的に依存し、これが定義できない変量となることから、この2つの活性単位の間に一貫した変換係数はありません。より純度の高いコラゲナーゼ調製物は、粗調製物に比べMandl単位で示す特異的活性は実際に低くなります。Clostridium調製物には、一般に約1:1800の変換係数があります（たとえば、Clostridiumコラゲナーゼの特定のロットには、約 0.15 Wünsch U/mg および250 Mandl U/mgが含まれています）。

調製ノート

活性化剤：Ca²⁺
インヒビター：
コラゲナーゼインヒビター：EDTA、EGTA、Cys、His、DTT、2-メルカプト-エタノール
コラゲナーゼは血清で阻害されません。
クロストリパインインヒビター：TLCK
トリプシンインヒビター：アプロチニン、トリプシンインヒビター（卵白、ダイズ）、血清
使用濃度：0.5～2.5 mg/mL
保存条件（使用溶液）：-15～-25℃
Rocheは、即時使用に必要な量の凍結乾燥物のみを溶解することを推奨します。溶解した溶液は-15～-25℃で1週間まで保存できます。溶解後は活性が低下するため、凍結と解凍を繰り返すことは避けてください。

再構成

あらゆる平衡塩類溶液（HBSSなど）に溶解

保管および安定性

容器を密閉し、乾燥した換気の良い場所で保管してください

その他情報

ライフサイエンス研究専用。診断には使用しないこと。

出荷状態は異なる場合があります

安全性情報

• ピクトグラム: GHS07,GHS08
• シグナルワード: Danger
• 危険有害性情報: H315 - H319 - H334 - H335
• 注意書き: P261 - P264 - P280 - P284 - P304 + P340 + P312 - P342 + P311
• 危険有害性の分類: Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
• ターゲットの組織: Respiratory system
• 保管分類コード: 11 - Combustible Solids
• WGK: WGK 1
• 引火点(°F): does not flash
• 引火点(℃): does not flash