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アプリケーション
コラゲナーゼは、終末糖化産物(AGE)研究のための動脈組織の調製に使用されています。この酵素は、その他のプロテアーゼと共に、ヒト腫瘍、マウス腎臓、ヒトの脳、肺上皮およびその他多くの組織の脱凝集にも使用されています。また、肝臓と腎臓の潅流研究、膵臓の消化、および非実質肝細胞の単離にも有効です。また、ラットの精巣上体脂肪体からの脂肪細胞の調製にも適しています。
生物化学的/生理学的作用
コラゲナーゼは、モル酵素あたり 4 グラム原子カルシウムによって活性化されます。 本製品は、エチレングリコール-ビス(β-アミノエチルエーテル) - N, N, N′,N′-四酢酸、β-メルカプトエタノール、グルタチオン、チオグリコール酸、および 8-ヒドロキシキノリンによって阻害されます。
組織から細胞を効果的に放出するには、コラケナーゼ酵素と中性プロテアーゼの両方が作用する必要があります。コラゲナーゼは、酵素1モル当たり4グラム原子のカルシウム(Ca2+)によって活性化されます。培養ろ液は、分子量が68~130 kDaの範囲である少なくとも7種の異なるプロテアーゼを含むと考えられます(最適pH:6.3~8.8)。本酵素は、配列-R-Pro-8-X-Gly-Pro-R-を認識し、ほとんどの場合、Xは中性アミノ酸です。
注意
供給時点でのこの製品は-20℃で1年間安定です。37℃、50℃および-20℃では、30日間でFALGPAまたはプロテアーゼ活性が減少することはありません。粗コラゲナーゼ溶液は、アリコット(10 mg/mL)で急速凍結し、-20℃で凍結維持すれば安定です。さらに凍結・融解サイクルを繰り返すと、溶液が損傷を受けます。 この製品は、氷上に保つと100%の活性を7時間にわたって保持します。
単位の定義
1 コラーゲン消化単位(CDU)は、ウシアキレス腱由来コラーゲンからペプチドを遊離し、カルシウムイオン存在下、pH 7.4、37°C、5 時間のニンヒドリン呈色における、1.0 umol のロイシンに相当します。1 FALGPA 加水分解単位は、25°Cで、1 分間あたりに、1.0 umol の furylacryloyl-Leu-Gly-Pro-Ala を加水分解します。1 中性プロテアーゼ単位は、pH 7.5、37°Cでカゼインを加水分解し、5 時間あたり1.0 umol のチロシンに相当する色を生成します。1 クロストリパイン単位は、DTT の存在下、pH 7.6、25°Cで、1 分間あたり 1.0 umol の BAEE を加水分解します。
調製ノート
本製品は、Clostridium histolyticum由来のタイプII(C6885)コラゲナーゼから調製されています。 溶液は通常、TESCAバッファーにより1~2 mg/mLで調製されます(50 mM TES、0.36 mM塩化カルシウムを含む、37℃でpH 7.4)。また、本製品はクロストリパイン、非特異的中性プロテアーゼおよびトリプシン活性を含みます。
基質
シグナルワード
Danger
危険有害性情報
危険有害性の分類
Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
ターゲットの組織
Respiratory system
保管分類コード
11 - Combustible Solids
WGK
WGK 1
引火点(°F)
Not applicable
引火点(℃)
Not applicable
個人用保護具 (PPE)
dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves
適用法令
試験研究用途を考慮した関連法令を主に挙げております。化学物質以外については、一部の情報のみ提供しています。 製品を安全かつ合法的に使用することは、使用者の義務です。最新情報により修正される場合があります。WEBの反映には時間を要することがあるため、適宜SDSをご参照ください。
Jan Code
C1764-50MG-PW:
C1764-500MG:
C1764-VAR:
C1764PROC:
C1764-BULK:
C1764-50MG:
C1764-PH:
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プロトコル
This procedure may be used for Collagenase products.
ライフサイエンス、有機合成、材料科学、クロマトグラフィー、分析など、あらゆる分野の研究に経験のあるメンバーがおります。.
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