PWOSUP-RO

Pwo SuperYield DNAポリメラーゼ

suitable for PCR, Difficult Templates/Specialty Enzymes PCR, hotstart: no, dNTPs included: no

• Enzyme Commission number: 2.7.7.7 (BRENDA, IUBMB)
• UNSPSCコード: 41106300
• NACRES: NA.55

特性

• 由来生物: (pyrococcus woesei)
• 品質水準: 100
• 形状: liquid
• 使用法: sufficient for ≤200 reactions (04340850001); sufficient for 200 reactions; sufficient for ≤40 reactions (04340868001); sufficient for 40 reactions
• 比活性: 5 U/μL
• 分子量: ~ 90 kDa
• 特徴: Difficult Templates/Specialty Enzymes PCR; High Fidelity PCR; dNTPs included: no; hotstart: no
• 包装: pkg of 100 U (04340868001); pkg of 500 U (04340850001 [2 x 250 U])
• メーカー／製品名: Roche
• 濃度: 50 U/mL
• パラメーター: 72 °C optimum reaction temp.
• テクニック: PCR: suitable
• 色: colorless
• 入力: purified DNA
• pH: 8.0 (39 °F)
• 溶解性: water: miscible
• 適合性: suitable for PCR
• NCBIアクセッション番号: AAB67984
• UniProtアクセッション番号: P61876
• アプリケーション: life science and biopharma
• その他の活性: Endonuclease 30 units, none detected; Nicking activity 30 units, none detected
• 保管温度: −20°C

詳細

詳細

Pwo SuperYield DNA Polymeraseは、もともとPyrococcus woeseiから単離されたもので、3′ →5′エキソヌクレアーゼの校正活性を有する処理能力の高い5′ →3′ DNAポリメラーゼです；5′ →3′エキソヌクレアーゼ活性は検出できません。
本酵素は、PCRで効率的に核酸を標識するための修飾ヌクレオチドを受け入れます。
PCR産物は、平滑末端ライゲーション用に直接使用できる平滑末端です。
付属のマグネシウム含有反応緩衝液を使用すると、MgCl₂の最終濃度は1.5 mMになります。

Pwo SuperYield DNA Polymeraseは、組換え酵素Pwo DNA Polymeraseと最適化された緩衝系を組み合わせたものです。この緩衝系は、ポリメラーゼの酵素特性を増強させるので、DNA合成の忠実度を変えることなく、増幅反応の収率が高まります。この酵素は、独特の酵素設計と最適化されたバッファー系によって、優れた結果をもたらします。最大3 kbのフラグメントを増幅します - 単純なテンプレートからさらに長いアンプリコンが可能です。
Pwo SuperYield DNA Polymeraseは、この温度での半減期が5分未満であるTaq DNA Polymeraseと比較して、熱安定性が高く、半減期が+100°Cで2時間を超えます。

特異性

スター活性スター活性が認められる場合、および／またはPCR混合液中の酵素の活性が低い場合は、まずHigh Pure PCR Product Purification Kitを使用して増幅産物を精製してから、制限酵素消化を行ってください。

アプリケーション

• Pwo SuperYield DNA Polymeraseは、組換え酵素Pwo DNA Polymeraseと新たに最適化された緩衝系を組み合わせたものです。Pwo SuperYield DNA Polymeraseは、増幅産物の配列決定または本製品のクローン化（例：遺伝子産物の発現のため）を目的としたDNAの増幅に使用されます。この酵素は忠実度が高いため、特に以下の用途に適しています：高忠実度PCR
• 部位特異的変異導入
• クローニング
• 遺伝子発現
• 個々のRNA転写産物におけるアレル（対立遺伝子）多形の研究
• 組織のまれな変異の特性評価
• 単一細胞または単一DNA分子のアレルステージの特性評価

特徴および利点

Pwo SuperYield DNA Polymeraseは、より高い忠実度のPCR産物を生成します。この最適化された緩衝液により、優れた結果が得られます。最大3 kbのフラグメントを増幅します。難しいテンプレートには、GC-RICH溶液が含まれています。

• Taq DNA Polymeraseと比較して、収率が高く、18倍高い忠実度を有します

。

• 難しいテンプレートを用いても高い性能。

GC-RICH SolutionはGC-rich PCR用です。

• クローニングの作業ステップが減ります。

Pwo SuperYield PCRミックスにおいて、直接的に消化が行われます。

包装

1キットに3成分が含まれています。

品質

各ロットについて、活性化DNAを使用してアッセイします。用いたPCR試験λとヒトゲノムDNA。

単位の定義

Pwo SuperYield DNA Polymeraseの1単位は、+70°Cで30分以内に10 nmolの総デオキシリボヌクレオシド三リン酸を、酸沈殿性のDNAに取り込むのを触媒する酵素の量として定義されます。

単位アッセイ：活性化DNAのアッセイ用インキュベーション緩衝液
20 mM Tris-HCl、pH 8.8（20°C）、50 mM KCl、2.5 mM MgCl₂、10 mM 2-メルカプトエタノール、0.2 mMの各dATP、dCTP、dGTP、dTTP。

インキュベーション法：
12.5 mgの活性仔ウシ胸腺DNAと0.1 mCi [α-³²P]dCTPを0.01～0.1 UのPwo SuperYield DNA Polymeraseとともに、パラフィン油で覆った50 μLのインキュベーション緩衝液中で+70°C、30分間インキュベートします。取り込まれたdNTPの量は、トリクロロ酢酸沈殿法により、続いてシンチレーション計数により測定します。

体積活性：5 U/μL

その他情報

修飾ヌクレオチドは基質です
Pwo DNA Polymeraseは、ジゴキシゲニンdUTP、ビオチンdUTP、フルオレセインdUTPなどの修飾ヌクレオチドを受け入れます。このように、PCR中にこれらのヌクレオチドをDNAに追加できます。これらの非放射性標識製品は、多くの用途でハイブリダイゼーションプローブとして使用できます。

生命科学研究用途に限ります。診断措置において使用しないでください。

法的情報

この製品を使用することは、米国特許の請求項および対応する米国以外の特許の請求項の対象になります。本製品の購入について、購入者自身の内部研究のために購入した量を使用する場合に限り、前述の特許請求に基づく訴訟から免責されますが、これは限定的なものであり、譲渡することはできません。′他の特許請求によって保護されている権利、特許取得済みの方法を実施する権利、あらゆる種類の商業サービス（購入者の研究結果を報酬やその他の商業的事由のために無制限に報告することを含む）を行う権利が、暗示や禁反言によって明示的に譲渡されるわけではありません。′この製品は研究にのみ使用されます。ロシュの特許請求項に基づいて診断に使用するには、ロシュから別のライセンスを取得する必要があります。購入ライセンスに関する詳細は、Director of Licensing, Applied Biosystems, 850 Lincoln Centre Drive, Foster City, California 94404, USAに連絡して得ることができます。</ br>購入者への注意事項：限定ライセンス<br />この製品を使用することは、米国特許番号6,127,155の特許請求および対応する米国以外の特許請求の対象になります。 本製品の購入について、購入者自身の内部研究のために購入した量を使用する場合に限り、前述の特許請求に基づく訴訟から免責されますが、これは限定的なものであり、譲渡することはできません。′ 別の特許に基づく権利、および費用またはその他の商業的報酬に対する購入者の活動の結果の報告を含み、それに限定されないあらゆる種類の商用サービスを行うための権利が明示的に、暗示的、または禁反言によって譲渡されることはありません。′ この製品は研究にのみ使用されます。ロシュの特許請求の下でヒトおよび動物の診断に使用するには、ロシュから個別のライセンスを取得する必要があります。 ロシュの特許請求の下での社内研究およびヒトおよび動物の診断以外のすべての使用には、サーモフィッシャーサイエンティフィックからの個別のライセンスを取得する必要があります。ロシュからのライセンス購入に関する詳細情報は、Roche Molecular Systems, Inc.のLicensing Department（4300 Hacienda Drive, Pleasanton, California 94588, USA or Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, 68305 Mannheim, Germany）にお問い合わせただくことにより入手が許可されます。 サーモフィッシャーサイエンティフィックからのライセンス購入に関する詳細情報は、 Thermo Fisher ScientificのLicensing Department（5791 Van Allen Way, Carlsbad, California 92008, USA）にお問い合わせいただくことにより入手が許可されます。

キットの構成要素のみ

• Pwo SuperYield DNA Polymerase 5 U/μl
• PCR buffer, containing 15 mM MgSO₄ 10x concentrated
• GC-RICH Solution 5x concentrated

安全性情報

• 危険有害性情報: H412
• 注意書き: P273 - P501
• 危険有害性の分類: Aquatic Chronic 3
• 保管分類コード: 12 - Non Combustible Liquids
• WGK: WGK 2
• 引火点(°F): does not flash
• 引火点(℃): does not flash