由来生物
mouse
品質水準
抗体製品の状態
purified immunoglobulin
抗体製品タイプ
primary antibodies
クローン
5D8-G9, monoclonal
化学種の反応性
pig, canine, sheep, human, bovine
以下との反応禁止
guinea pig, ground squirrel, rat, kangaroo, horse, chicken, mouse
メーカー／製品名
Chemicon®
テクニック
ELISA: suitable
flow cytometry: suitable
immunohistochemistry: suitable
western blot: suitable
アイソタイプ
IgG1
NCBIアクセッション番号
UniProtアクセッション番号
輸送温度
wet ice
ターゲットの翻訳後修飾
unmodified
遺伝子情報
human ... COL1A1(1277)
関連するカテゴリー
詳細
コラーゲンは進化の過程で高度に保存されており、三重ヘリックス構造に必要な部分である途切れない「グリシンX Y」トリプレットリピートが特徴です。I型コラーゲン（95 kDa）は、骨、角膜、皮膚、腱に存在します。コードする遺伝子の変異は、骨形成不全症、エーラス・ダンロス症候群、および特発性骨粗鬆症と関連しています。この遺伝子と血小板由来増殖因子ベータが存在する17番および22番染色体の相互転座は、隆起性皮膚線維肉腫と呼ばれる特定のタイプの皮膚腫瘍（増殖因子のアップレギュレートされた発現に起因する）と関連しています。
特異性
コラーゲンタイプI抗体は、I型コラーゲンのC末端付近のエピトープに結合するモノクローナルIgG1抗体です。
I型コラーゲン抗体は、ヒトおよびウシのI型コラーゲンに高い親和性を示します。 III、VおよびVI型コラーゲン、または結合組織タンパク質との交差反応の証拠はありません。天然の未変成I型コラーゲンのみと反応します。
I型コラーゲン抗体は、ヒトおよびウシのI型コラーゲンに高い親和性を示します。 III、VおよびVI型コラーゲン、または結合組織タンパク質との交差反応の証拠はありません。天然の未変成I型コラーゲンのみと反応します。
アプリケーション
ELISA：天然I型コラーゲンの検出捕捉：2～4 μg/mL、検出：抗I型コラーゲン抗体のμg/mLの希釈液で、50 ngのヒトI型コラーゲンを検出できるでしょう。他のコラーゲンとは反応しません。 より低濃度のコラーゲンの検出には、より高レベルの抗体が必要な可能性があります。注記：この抗体はそれ自体で対にはなりません。
免疫組織染色（未固定凍結切片）：
冷凍ミクロトームを用いた凍結サンプルの6 μm厚の切片。徹底した風乾。 PBSで再水和してください。 通常、IF試験ではブロッキングは不要です。DABを使用する場合は、ペルオキシダーゼの前処理を推奨します。PBS中の2%BSAブロッキングによりバックグランドが低下します。
抗I型コラーゲン抗体をPBSバッファーで希釈し、サンプルに加えて60分間インキュベートします（希釈倍率1:100～1:500）。
PBS中で10分間、切片を2回洗浄します。 FITC結合抗マウス抗体を添加し、60分間インキュベートします。
PBS中で10分間、2回洗浄します。
1 mMの1,4-フェニレンジアミンを含むグリセロール／水（9:1 v/v）で切片をマウントします。（FITC安定性またはChemiconカタログ番号5096または5013の使用について
注記：
予備的研究では、切片を各種酵素（例：0.1 M HCl＋0.1%ペプシンで37°Cで5分間）で前処理（ステップ2の前）することで、特定の組織の染色性が向上することが示唆されています。
フローサイトメトリー： 1:100
イムノブロッティング：希釈倍率1:1,000で使用、天然、未変成、非還元ウェスタンブロッティングのみ。 Ramshaw, et.al (1988) "Electrophoretic and electroblotting of native collagens." Anal. Biochem. 168:82-87. 従来型の還元ウェスタンブロッティングには使用できません。
すなわち、天然コラーゲン泳動用のPAGEゲルの準備が必要です。
架橋剤としてモノマーに対して3.2%(w/w)のビスアクリルアミドを含む3%(w/v)の全アクリルアミド分離ゲルを、10 mM乳酸カルシウム（pH6.8）中で、0.05〜0.1%のTEMEDおよび0.05〜0.1%の過硫酸アンモニウム（10%保存溶液から添加）の添加により、垂直ガラスプレート間で重合させます。 陰極（負極）バッファーは乳酸で調整した50 mM Trisバッファー（pH 6.6）で、陽極（正極）バッファーは0.1 M乳酸（pH 2.5）です（Friis, SJ et al, 1985 J Biochem Biophys Methods 10:301-306.）。
サンプル負荷前に、ゲルを100Vで少なくとも90分間作動させます。コラーゲンサンプルを10%スクロースを含む0.1 M乳酸または0.1 M酢酸に1mg/mLで溶解し、1レーンあたり5～10 μgを負荷します。必要に応じてメチルグリーンを添加し、負荷を補助します。室温、70Vで、5時間電気泳動します。
ブロッティングには0.1 M乳酸（pH 2.5）を用い、室温、20Vで、16時間行うと、コラーゲンは陰極に向かって移動する。
免疫組織染色（未固定凍結切片）：
冷凍ミクロトームを用いた凍結サンプルの6 μm厚の切片。徹底した風乾。 PBSで再水和してください。 通常、IF試験ではブロッキングは不要です。DABを使用する場合は、ペルオキシダーゼの前処理を推奨します。PBS中の2%BSAブロッキングによりバックグランドが低下します。
抗I型コラーゲン抗体をPBSバッファーで希釈し、サンプルに加えて60分間インキュベートします（希釈倍率1:100～1:500）。
PBS中で10分間、切片を2回洗浄します。 FITC結合抗マウス抗体を添加し、60分間インキュベートします。
PBS中で10分間、2回洗浄します。
1 mMの1,4-フェニレンジアミンを含むグリセロール／水（9:1 v/v）で切片をマウントします。（FITC安定性またはChemiconカタログ番号5096または5013の使用について
注記：
予備的研究では、切片を各種酵素（例：0.1 M HCl＋0.1%ペプシンで37°Cで5分間）で前処理（ステップ2の前）することで、特定の組織の染色性が向上することが示唆されています。
フローサイトメトリー： 1:100
イムノブロッティング：希釈倍率1:1,000で使用、天然、未変成、非還元ウェスタンブロッティングのみ。 Ramshaw, et.al (1988) "Electrophoretic and electroblotting of native collagens." Anal. Biochem. 168:82-87. 従来型の還元ウェスタンブロッティングには使用できません。
すなわち、天然コラーゲン泳動用のPAGEゲルの準備が必要です。
架橋剤としてモノマーに対して3.2%(w/w)のビスアクリルアミドを含む3%(w/v)の全アクリルアミド分離ゲルを、10 mM乳酸カルシウム（pH6.8）中で、0.05〜0.1%のTEMEDおよび0.05〜0.1%の過硫酸アンモニウム（10%保存溶液から添加）の添加により、垂直ガラスプレート間で重合させます。 陰極（負極）バッファーは乳酸で調整した50 mM Trisバッファー（pH 6.6）で、陽極（正極）バッファーは0.1 M乳酸（pH 2.5）です（Friis, SJ et al, 1985 J Biochem Biophys Methods 10:301-306.）。
サンプル負荷前に、ゲルを100Vで少なくとも90分間作動させます。コラーゲンサンプルを10%スクロースを含む0.1 M乳酸または0.1 M酢酸に1mg/mLで溶解し、1レーンあたり5～10 μgを負荷します。必要に応じてメチルグリーンを添加し、負荷を補助します。室温、70Vで、5時間電気泳動します。
ブロッティングには0.1 M乳酸（pH 2.5）を用い、室温、20Vで、16時間行うと、コラーゲンは陰極に向かって移動する。
この抗I型コラーゲン抗体クローン5D8-G9は、I型コラーゲンの検出において、ELISA、FC、WB、HFでの使用が検証されています。
研究カテゴリー
細胞構造
細胞構造
研究サブカテゴリー
ECMタンパク質
ECMタンパク質
物理的形状
100 μg精製抗体（1 mg/mL）、50 mM Tris酢酸（pH 5.5）＋150 mM NaCl＋0.1% ブロニドックス溶液
免疫グロブリン画分をプロテインAクロマトグラフィーで精製し、クマシー染色PAGEで95％を上回る純度が示されました。抗I型コラーゲン抗体は0.22 μmでろ過されて提供されます。
免疫グロブリン画分をプロテインAクロマトグラフィーで精製し、クマシー染色PAGEで95％を上回る純度が示されました。抗I型コラーゲン抗体は0.22 μmでろ過されて提供されます。
フォーマット：精製
保管および安定性
抗I型コラーゲン抗体は、常温で溶液状態として出荷されます。 2～8°Cで、最長6か月安定して保存できます。
警告：モノクローナル試薬溶液は、保存剤として0.1%のアジ化ナトリウムを含みます。パイプ中にこの物質が蓄積することで生じる潜在的な危険があるため、使用済み試薬は十分な量の水とともに処分してください。
警告：モノクローナル試薬溶液は、保存剤として0.1%のアジ化ナトリウムを含みます。パイプ中にこの物質が蓄積することで生じる潜在的な危険があるため、使用済み試薬は十分な量の水とともに処分してください。
アナリシスノート
コントロール
ヒト腎臓ライセート
ヒト腎臓ライセート
法的情報
CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
免責事項
メルクのカタログまたは製品に添付されたメルクのその他の文書に記載されていない場合、メルクの製品は研究用途のみを目的としているため、他のいかなる目的にも使用することはできません。このような目的としては、未承認の商業用途、in vitroの診断用途、ex vivoあるいはin vivoの治療用途、またはヒトあるいは動物へのあらゆる種類の消費あるいは適用などがありますが、これらに限定されません。
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保管分類コード
12 - Non Combustible Liquids
WGK
WGK 2
引火点(°F)
Not applicable
引火点(℃)
Not applicable
適用法令
試験研究用途を考慮した関連法令を主に挙げております。化学物質以外については、一部の情報のみ提供しています。 製品を安全かつ合法的に使用することは、使用者の義務です。最新情報により修正される場合があります。WEBの反映には時間を要することがあるため、適宜SDSをご参照ください。
Jan Code
MAB3391:
試験成績書（COA）
製品のロット番号・バッチ番号を入力して、試験成績書（COA） を検索できます。ロット番号・バッチ番号は、製品ラベルに「Lot」または「Batch」に続いて記載されています。
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