ELONGN-RO

dNTPack a lungo raggio Expand^™

suitable for PCR, hotstart: no, Long Range PCR

• Sinonimo/i: PCR lungo templato, enzimi per pcr, miscele e set di nucleotidi, pcr a lungo raggio
• Classificazione EC (Enzyme Commission): 2.7.7.7 (BRENDA, IUBMB)
• Codice UNSPSC: 41106300

Proprietà

• impiego: sufficient for ≤1000 reactions (04829069001); sufficient for ≤200 reactions (04829042001); sufficient for >50 reactions (04829034001)
• Livello qualitativo: 100
• Caratteristiche: Long Range PCR; dNTPs included; hotstart: no
• Confezionamento: pkg of 3,500 U (04829069001 [5x700 U]); pkg of 175 U (04829034001); pkg of 700 U (04829042001)
• Produttore/marchio commerciale: Roche
• Parametri: 68 °C optimum reaction temp.
• tecniche: PCR: suitable
• input: purified DNA
• Temperatura di conservazione: −20°C

Descrizione

Descrizione generale

Il dNTPack a lungo raggio Expand è la versione di seconda generazione del sistema per PCR con templato lungo Expand, ottimizzata e progettata per amplificare in modo coerente prodotti di PCR da 5 kb a 25 kb da DNA genomico (o fino a 40 kb da templati di λ DNA). Il tampone in dotazione può essere utilizzato per prodotti di PCR di qualsiasi dimensione. Sono inoltre inclusi un tampone senza MgCl₂ e flaconcini separati di MgCl₂ e DMSO, da utilizzare se è necessaria l′ottimizzazione. Il dNTPack a lungo raggio Expand contiene una speciale miscela di enzimi composta da una Taq DNA polimerasi termostabile e una DNA polimerasi termostabile dotata di attività di correzione. Questa miscela di potenti polimerasi produce una resa elevata di prodotti di PCR. A causa dell′attività intrinseca della 3′–5′ esonucleasi della polimerasi con correzione, il dNTPack a lungo raggio Expand copia il DNA con un′accuratezza tre volte superiore alla Taq DNA polimerasi.

Specificità

Inattivazione termica: > 92 °C

Applicazioni

Il dNTPack a lungo raggio Expand è ottimizzato per amplificare in modo efficiente grandi frammenti di DNA genomico da 5 kb a 25 kb con una fedeltà tre volte più alta della Taq DNA polimerasi. Il dNTPack a lungo raggio Expand è ideale per:

• Mappatura e sequenziamento del genoma
• Costruzione di contigui
• Caratterizzazione di sequenze clonate in fagi lambda o cosmidi
• Clonazione e analisi di geni eucariotici
• Identificazione rapida e clonazione di geni completi da DNA genomico utilizzando una sequenza di cDNA come materiale di partenza
• RT-PCR in due passaggi

Il set con tampone speciale, la miscela di nucleotidi per PCR ultrapuri e la miscela ottimizzata di DNA polimerasi termostabili sono adatti a:

• PCR
• Amplificazione di lunghi frammenti
• RT-PCR

Per ampliconi da 20 a 35 kb, scegliere il sistema per PCR Expand 20kb PLUS, dNTPack.

Caratteristiche e vantaggi

II sistema per PCR a lungo raggio Expand è ideale per la mappatura e il sequenziamento genomico, la costruzione di contigui, la caratterizzazione di sequenze clonate in fagi lambda o cosmidi e la clonazione e l′analisi di geni eucariotici.
Amplificazione di frammenti di DNA da 5 a 20 kb da DNA genomico umano e da 40 kb da λDNA utilizzando i tamponi di reazione in dotazione.
Si utilizzano 3,75 U per una PCR standard da 50 μl.
Ciascun dNTPack contiene 10 mM di nucleotidi di sali sodici privi di additivi sotto forma di miscela pronta all′uso.

• Amplificazione di templati lunghi

fino a 25 kb con elevata resa e specificità e con maggiore fedeltà.

• Risparmio di tempo e risorse

con un solo tampone e con la regolazione tramite la soluzione di DMSO e MgCl₂.

• Un kit adatto a tutte le applicazioni con templati lunghi

per ottenere rese elevate del frammento desiderato.

• Massima praticità

con la comoda soluzione premiscelata di dNTP per PCR.

Confezionamento

1 kit contenente 6 componenti

Qualità

Ogni lotto è testato funzionalmente con PCR usando DNA genomico umano e primer specifici per un frammento da 9 kb, 12 kb e 15 kb. La miscela enzimatica è testata per verificare l′assenza di qualsiasi contaminazione attiva, incluse endo- o esonucleasi e incisioni del DNA, secondo gli attuali criteri di controllo qualità.

Definizione di unità

Attività specifica: 5 U/μl

Nota sulla preparazione

Concentrazione di lavoro: Concentrazione standard dell′enzima: 3,5 U per 50 μL di reazione

Altre note

Da utilizzare solo per ricerca nelle scienze naturali. Non usare a scopo diagnostico.

Note legali

L′utilizzo di questo prodotto è coperto da richieste di brevetto USA e dalle corrispondenti richieste di brevetto al di fuori degli USA. L′acquisto di questo prodotto include un′immunità limitata e non trasferibile dalle azioni giudiziarie ai sensi delle suddette rivendicazioni di brevetto per l′utilizzo limitato a questa quantità di prodotto per la ricerca interna dell′acquirente. Non è espresso esplicitamente, implicitamente o per malafede alcun diritto a qualsiasi altra rivendicazione di brevetto e nessun diritto a prestare servizi commerciali di qualsiasi tipo, inclusa senza limitazioni la comunicazione dei risultati delle attività degli acquirenti dietro pagamento o altro corrispettivo commerciale. Questo prodotto è destinato esclusivamente a scopi di ricerca. Gli usi diagnostici sotto richieste di brevetto Roche richiedono una licenza separata da Roche. Ulteriori informazioni sull′acquisto di licenze possono essere ottenute contattando il Direttore Licenze, Applied Biosystems, 850 Lincoln Centre Drive, Foster City, California 94404, USA.

Expand is a trademark of Roche

Solo come componenti del kit

• Expand Long Range Enzyme Mix
• Expand Long Range Buffer with 12.5 mM MgCl₂ 5x concentrated
• Expand Long Range Buffer without MgCl₂ 5x concentrated
• MgCl₂ Stock Solution 25 mM
• DMSO 100%
• PCR Nucleotide Mix

Informazioni sulla sicurezza

• Indicazioni di pericolo: H412
• Consigli di prudenza: P273 - P501
• Classi di pericolo: Aquatic Chronic 3
• Codice della classe di stoccaggio: 10 - Combustible liquids
• Classe di pericolosità dell'acqua (WGK): WGK 2
• Punto d’infiammabilità (°F): 203.0 °F
• Punto d’infiammabilità (°C): 95 °C