FHIFI-RO

Sistema PCR FastStart^™ alta fedeltà

5 unit/μL, suitable for PCR, High Fidelity PCR, hotstart, Multiplex PCR

• Codice UNSPSC: 41106300
• NACRES: NA.21

Proprietà

• impiego: sufficient for ≤1,000 reactions (03553361001); sufficient for ≤200 reactions (03553400001)
• Livello qualitativo: 100
• Caratteristiche: High Fidelity PCR; Multiplex PCR; dNTPs included: no; hotstart
• Confezionamento: pkg of 2,500 U (03553361001 [10 x 250 U]); pkg of 500 U (03553400001 [2 x 250 U])
• Produttore/marchio commerciale: Roche
• Concentrazione: 5 unit/μL
• Parametri: 72 °C optimum reaction temp.
• tecniche: PCR: suitable
• input: purified DNA
• Temperatura di conservazione: −20°C

Descrizione

Descrizione generale

Il sistema per PCR FastStart^™ High Fidelity unisce una Taq DNA polimerasi FastStart e una proteina termostabile con attività proofreading, anch′essa chimicamente modificata. Questa proteina presenta l′attività proofreading, ma non è dotata di attività polimerasica. Entrambe le proteine sono inattive al di sotto di +75 °C e vengono attivate dal riscaldamento a +95 °C per due minuti.

I protocolli hot start hanno migliorato la specificità, la sensibilità e la resa della PCR. I gruppi bloccanti termolabili posti sui residui amminoacidici della Taq DNA polimerasi FastStart^™ rendono l'enzima inattivo a temperatura ambiente. Non si verifica alcun allungamento dei primer a basse temperature nella fase in cui questi tendono a legarsi in modo non specifico. La Taq DNA polimerasi FastStart^™ viene attivata dalla rimozione dei gruppi bloccanti con una fase di preincubazione a +95 °C. Il sistema per PCR FastStart^™ High Fidelity è il prodotto ideale per la PCR multiplex.

• Miscela enzimatica FastStart^™ High Fidelity (5U/μL) in tampone di stoccaggio
• Tampone di reazione FastStart^™ High Fidelity, 10x concentrato con MgCl_{2 18 mM}
• Tampone di reazione FastStart^™ High Fidelity, 10x concentrato senza MgCl₂
• Soluzione madre di MgCl₂, 25 mM
• DMSO

Applicazioni

Il sistema per PCR FastStart^™ High Fidelity, una nuova miscela di enzimi per la PCR hot start, unisce a tutti i vantaggi della Taq DNA polimerasi FastStart^™ un′accuratezza quattro volte superiore e la capacità di amplificare frammenti fino a 5 kb.

• PCR
• PCR Multiplex
• RT-PCR
• Amplificazione di templati ricchi in GC
• PCR difficili o impegnative
• Amplificazione del genoma del Papillomavirus umano e del DNA metilato

Il sistema per PCR FastStart^™ High Fidelity è il prodotto di elezione per la PCR multiplex.
Usare il sistema FastStart^™ High Fidelity nella versione dNTPack comprendente anche una miscela di nucleotidi per PCR pronti all′uso.

Caratteristiche e vantaggi

• Eccellenti prestazioni multiplex.
• Per risultati rapidi di qualità elevata, usare anche il kit di ottimizzazione della PCR di Roche.′
• Maggiore fedeltà.
• Fedeltà quattro volte superiore rispetto alla DNA polimerasi Taq e alla DNA polimerasi Taq FastStart.
• Amplificazione di DNA impegnativo.
• Viene fornito il DMSO, un additivo per PCR da usare con i template difficili.

Confezionamento

1 kit con 5 componenti

Qualità

La funzione di ogni lotto viene esaminata con la PRC usando DNA genomico umano e primer specifici per un frammento da 1,8 kb del gene EPO e primer specifici per un frammento da 4,8 kb del gene tPA.

Definizione di unità

Una unità di DNA polimerasi Taq FastStart è definita come la quantità di enzima che incorpora 10 nmol di desossiribonucleotidi trifosfati totali in DNA precipitabile in acido entro 60 minuti a +65 °C.

Attività per volume: 5 U/μL

Nota sulla preparazione

Concentrazione di lavoro: Per una PCR standard da 50 μL si consiglia di usare 2,5 U della miscela enzimatica.

Altre note

Da utilizzare solo per ricerca nelle scienze naturali. Non usare in procedure diagnostiche.

Note legali

AVVISO ALL'ACQUIRENTE: LICENZA LIMITATA<br />L'utilizzo di questo prodotto è coperto dal brevetto USA n. 6.127.155 e dalle corrispondenti richieste di brevetto al di fuori degli Stati Uniti.  L′acquisto di questo prodotto include un'immunità limitata e non trasferibile dalle azioni giudiziarie ai sensi delle suddette richieste di brevetto per l'utilizzo limitato a questa quantità di prodotto per la ricerca interna dell'acquirente.  Non è espresso esplicitamente, implicitamente o per malafede, alcun diritto ai sensi di qualsiasi altra richiesta di brevetto e alcun diritto a prestare servizi commerciali di qualsiasi tipo, inclusa senza limitazioni la comunicazione dei risultati delle attività degli acquirenti a fronte di un pagamento o di altro corrispettivo commerciale.  Questo prodotto è destinato esclusivamente a scopi di ricerca. Gli usi diagnostici in campo umano e veterinario sotto richiesta di brevetti Roche richiedono una licenza separata da Roche.  Tutti gli usi diversi dalla ricerca interna e gli usi diagnostici in campo umano e veterinario sotto richieste di brevetto da parte di Roche, richiedono una licenza aggiuntiva da parte di Thermo Fisher Scientific. Ulteriori informazioni sull'acquisto di licenze da Roche possono essere ottenute contattando il Dipartimento Licenze di Roche Molecular Systems, Inc., 4300 Hacienda Drive, Pleasanton, California 94588, USA o Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, 68305 Mannheim, Germania.  Ulteriori informazioni sull'acquisto di licenze da Thermo Fisher Scientific possono essere ottenute contattando il dipartimento licenze di  Thermo Fisher Scientific, 5791 Van Allen Way, Carlsbad, California 92008, USA.</ br>NOTA PER L'ACQUIRENTE: LICENZA LIMITATA<br />L'utilizzo di questo prodotto è coperto dai brevetti USA n. 5.677.152 e 5.773.258, e dalle corrispondenti richieste di brevetto al di fuori degli Stati Uniti.  L′acquisto di questo prodotto include un'immunità limitata e non trasferibile dalle azioni giudiziarie ai sensi delle suddette richieste di brevetto per l'utilizzo limitato a questa quantità di prodotto per la ricerca interna dell'acquirente.  Non è espresso esplicitamente, implicitamente o per malafede, alcun diritto ai sensi di qualsiasi altra richiesta di brevetto e alcun diritto a prestare servizi commerciali di qualsiasi tipo, inclusa senza limitazioni la comunicazione dei risultati delle attività degli acquirenti a fronte di un pagamento o di altro corrispettivo commerciale.  Questo prodotto è destinato esclusivamente a scopi di ricerca.  Gli usi diagnostici in campo umano e veterinario sotto richiesta di brevetti Roche richiedono una licenza separata da Roche.  Tutti gli usi diversi dalla ricerca interna e gli usi diagnostici in campo umano e veterinario sotto richieste di brevetto da parte di Roche, richiedono una licenza aggiuntiva da parte di Thermo Fisher Scientific. Ulteriori informazioni sull'acquisto di licenze da Roche possono essere ottenute contattando il Dipartimento Licenze di Roche Molecular Systems, Inc., 4300 Hacienda Drive, Pleasanton, California 94588, USA o Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, 68305 Mannheim, Germania.  Ulteriori informazioni sull'acquisto di licenze da Thermo Fisher Scientific possono essere ottenute contattando il Dipartimento Licenze  di Thermo Fisher Scientific, 5791 Van Allen Way, Carlsbad, California 92008, USA.

FastStart is a trademark of Roche

Solo come componenti del kit

• FastStart High Fidelity Enzyme Blend, in storage buffer 5 U/μl
• FastStart High Fidelity Reaction Buffer, with 18 mM MgCl₂ 10x concentrated
• FastStart High Fidelity Reaction Buffer, without MgCl₂ 10x concentrated
• MgCl₂ Stock Solution 25 mM
• DMSO

Informazioni sulla sicurezza

• Codice della classe di stoccaggio: 10 - Combustible liquids
• Classe di pericolosità dell'acqua (WGK): WGK 1
• Punto d’infiammabilità (°F): 203.0 °F
• Punto d’infiammabilità (°C): 95 °C