ELONG-RO

Sistema per PCR Expand^™ Long Template

suitable for PCR, optimum reaction temp. 68 °C

• Sinonimo/i: PCR a lungo raggio, PCR templato lungo
• Classificazione EC (Enzyme Commission): 2.7.7.7 (BRENDA, IUBMB)
• Codice UNSPSC: 41106300

Proprietà

• impiego: sufficient for ≤190 reactions (11681842001); sufficient for ≤38 reactions (11681834001); sufficient for ≤950 reactions (11759060001)
• Livello qualitativo: 100
• Confezionamento: pkg of 3,600 U (11759060001 [10x360 U]); pkg of 150 U (11681834001); pkg of 720 U (11681842001 [2x360 U])
• Produttore/marchio commerciale: Roche
• Parametri: 68 °C optimum reaction temp.
• tecniche: PCR: suitable
• Temperatura di conservazione: −20°C

Descrizione

Descrizione generale

Il sistema per PCR Expand Long Template è una miscela di enzimi che contiene la Taq DNA Polimerasi e una DNA polimerasi termostabile dotata di attività di proofreading. Questa potente miscela di polimerasi assicura un′elevata resa di prodotti della PCR da DNA genomico. Il sistema per PCR Expand Long Template consente di amplificare frammenti di DNA fino a 20 kb da DNA genomico umano e fino a 40 kb da λDNA.
Il sistema Expand Long Template copia il DNA con un′accuratezza tre volte superiore alla Taq DNA Polimerasi
Errori nell′incorporazione causano il distacco della Taq Polimerasi dal filamento di DNA. L′attività 3′→ 5′ esonucleasica della miscela di enzimi con attività proofreading consente di amplificare il DNA con un′accuratezza tre volte superiore rispetto alla Taq DNA Polimerasi da sola.
I prodotti di PCR lunghi richiedono un tampone speciale e un protocollo ottimizzato. Questo kit usa tre buffer diversi per l′amplificazione di frammenti da 0,5 a 9 kb, da 9 a 12 kb, e più lunghi di 12kb. Per un templato di alta qualità, usare il kit High Pure Template Preparation Roche per l′estrazione del DNA genomico stampo.

Applicazioni

L′applicazione principale del sistema PCR Expand Long Template è l′amplificazione accurata di sequenze bersaglio molto lunghe, anche da DNA genomico. Usare questa miscela ottimizzata di enzimi e il complesso di tre tamponi per generare prodotti PCR da 5 a 20 kb di lunghezza.
Scegliere sistema PCR Expand Long Template di primagenerazione per reazioni PCR lunghe e accurate. Usare questa miscela ottimizzata di enzimi e il complesso di tre tamponi per generare prodotti PCR da 5 a 20 kb di lunghezza. Usare il prodotto per:

• PCR
• RT-PCR o PCR a lungo raggio
• Amplificazione di lunghi frammenti
• Mappatura e sequenziamento del genoma
• Costruzione di contigui
• Caratterizzazioni di sequenze clonate in fagi lambda o cosmidi.
• Identificazione rapida e clonazione di geni completi da DNA genomico o sequenza cDNA come materiale di partenza

Per un′alternativa conveniente si raccomanda di aggiornarsi a Expand Long Range di 2^a generazione, dNTPack.
Per dimensioni amplicon da 20 a 35 kb scegliere il sistema PCR Expand 20 kb^PLUS dNTPack.

Caratteristiche e vantaggi

II sistema PCR Expand Long Template è ideale per mappatura e sequenziamento genomico, costruzione di contigui, caratterizzazione di sequenze clonate in fagi lambda o cosmidi e clonazione e analisi di geni eucariotici.

• Amplifica(re) templati più lunghi: L′insieme di tre tamponi amplifica prodotti da 5 a 20 kb.
• Ottieni rese superiori e fedeltà tre volte maggiore in confronto a Taq DNA Polimerasi.
• Migliori la (Sua) PCR: Ottenere più prodotto PCR di lunghezza piena è un risultato ideale.

Confezionamento

1 kit contenente 4 componenti

Qualità

Ogni lotto è testato funzionalmente per la PCR usando DNA genomico umano e primer specifici per un frammento di 9 kb, 12 kb e 15 kb. La miscela enzimatica è testata per l′assenza di qualsiasi attività contaminante incluse le endo o le esonucleasi e attività di incisione del DNA, secondo le procedure di controllo della qualità attuali.

Definizione di unità

Attività per volume: 5 U/μL

Nota sulla preparazione

Concentrazione di lavoro: La concentrazione ottimale dell′enzima varia da 0,5 a 5,0 U per 50 μL di reazione. La concentrazione standard dell′enzima è 3,75 U per 50 μL di reazione.

Altre note

Esclusivamente per ricerche life science. Non usare in procedure diagnostiche.

Note legali

L'utilizzo di questo prodotto è coperto da rivendicazioni di brevetto USA e dalle corrispondenti rivendicazioni al di fuori degli USA. L′acquisto di questo prodotto include un'immunità limitata e non trasferibile contro le azioni legali ai sensi delle suddette rivendicazioni di brevetto per l'esclusivo impiego di questa quantità di prodotto ai fini della ricerca interna dell'acquirente. Non è conferito espressamente, implicitamente o per preclusione alcun diritto ai sensi di qualsiasi altra rivendicazione di brevetto, alcun diritto a eseguire metodi brevettati e alcun diritto a prestare servizi commerciali di qualsiasi tipo, inclusa, ma non solo, la comunicazione dei risultati delle attività degli acquirenti a fronte di un pagamento o di altro corrispettivo commerciale. Questo prodotto è destinato esclusivamente a scopi di ricerca. Gli usi diagnostici coperti da rivendicazione di brevetto Roche richiedono una licenza separata da parte di Roche. Per ulteriori informazioni sull′acquisto di licenze, contattare il Responsabile delle Licenze, Applied Biosystems, 850 Lincoln Centre Drive, Foster City, California, 94404, USA.</ br>NOTA PER L′ACQUIRENTE: LICENZA LIMITATA<br />L′utilizzo di questo prodotto è coperto dal brevetto USA n° 6,127,155 e dalle corrispondenti rivendicazioni di brevetto al di fuori degli Stati Uniti.  L′acquisto di questo prodotto include un'immunità limitata e non trasferibile contro le azioni legali ai sensi delle suddette rivendicazioni di brevetto per l'esclusivo impiego di questa quantità di prodotto ai fini della ricerca interna dell'acquirente.  Non è conferito espressamente, implicitamente o per preclusione alcun diritto ai sensi di qualsiasi altra rivendicazione di brevetto, alcun diritto a eseguire metodi brevettati e alcun diritto a prestare servizi commerciali di qualsiasi tipo, inclusa, ma non solo, la comunicazione dei risultati delle attività degli acquirenti a fronte di un pagamento o di altro corrispettivo commerciale.  Questo prodotto è destinato esclusivamente a scopi di ricerca. Gli usi diagnostici in campo umano e veterinario coperti da rivendicazione di brevetto Roche richiedono una licenza separata da parte di Roche.  Tutti gli usi diversi dalla ricerca interna e gli usi diagnostici in campo umano e veterinario sotto rivendicazione di brevetto da parte di Roche, richiedono una licenza aggiuntiva da parte di Thermo Fisher Scientific. Ulteriori informazioni sull'acquisto di licenze da Roche possono essere ottenute contattando il Licensing Department of Roche Molecular Systems, Inc., 4300 Hacienda Drive, Pleasanton, California 94588, USA o Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, 68305 Mannheim, Germania.  Per maggiori informazioni sull'acquisto di licenze da Thermo Fisher Scientific, contattare il Licensing Department of  Thermo Fisher Scientific, 5791 Van Allen Way, Carlsbad, California 92008, USA.

Expand is a trademark of Roche

Solo come componenti del kit

• Expand Long Template Enzyme Mix
• Expand Long Template Buffer 1, with 17.5 mM MgCl₂ 10x concentrated
• Expand Long Template Buffer 2, with 27.5 mM MgCl₂ 10x concentrated
• Expand Long Template Buffer 3, with 27.5 mM MgCl₂ and detergents 10x concentrated

Informazioni sulla sicurezza

• Indicazioni di pericolo: H412
• Consigli di prudenza: P273 - P501
• Classi di pericolo: Aquatic Chronic 3
• Codice della classe di stoccaggio: 12 - Non Combustible Liquids
• Classe di pericolosità dell'acqua (WGK): WGK 2
• Punto d’infiammabilità (°F): does not flash
• Punto d’infiammabilità (°C): does not flash